無花果枝對食用菌生長和產(chǎn)量的影響

沈 盟，權(quán)新華，袁 曄，宋小亞，鄭巧平，王瑞森，姚祥坦

（1嘉興市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江嘉興314001；2.麗水市農(nóng)林科學(xué)研究院，浙江麗水323000）

0 引言

農(nóng)業(yè)廢棄物種類繁多，可分為種植業(yè)廢棄物、養(yǎng)殖業(yè)廢棄物、農(nóng)業(yè)加工廢棄物和農(nóng)場生活廢棄物4類，其中種植業(yè)廢棄物包括農(nóng)田和果園殘留物[1]，含有較多纖維素、半纖維素和木質(zhì)素，可完全滿足食用菌的生長需求，但國內(nèi)農(nóng)業(yè)廢棄物生產(chǎn)食用菌仍然處于試驗(yàn)階段或小面積栽培，主要原因是農(nóng)業(yè)廢棄物來源不同，理化性狀差距較大，作為食用菌生產(chǎn)原料存在不確定性，而建立廢棄物標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)體系、對培養(yǎng)料配方進(jìn)行改進(jìn)是促進(jìn)農(nóng)業(yè)廢棄物在食用菌產(chǎn)業(yè)中應(yīng)用的途徑之一[2]。無花果(Ficus carica)為桑科無花果屬的落葉灌木或小喬木，可以用作綠化觀賞樹，果實(shí)也可以食用。其枝干中黃酮類化合物含量較高，達(dá)到5.36 mg/g，新鮮的枝干中含有豐富的Vc[3]，其干果、汁液提取物還具有殺菌殺蟲的作用，葉片中的香豆素對線蟲具有強(qiáng)效的殺滅作用[4]，水提物則具有抗微生物活性[5-6]，但大多數(shù)利用無花果進(jìn)行的毒性試驗(yàn)中沒有觀察到任何毒性跡象[7]。國內(nèi)無花果產(chǎn)量逐年增加，產(chǎn)值也呈現(xiàn)平穩(wěn)增長，2018年無花果年產(chǎn)量約為4萬t，無花果抗旱、耐貧瘠，沒有病蟲害，無需用藥[8]，并且無花果枝繁葉茂，枝條年生長量大于1 m[9]，枝條不僅要進(jìn)行夏修還要進(jìn)行冬季修剪[10]，將其枝干作為食用菌培養(yǎng)料不僅來源豐富而且無農(nóng)藥污染，但目前將無花果剪枝用于食用菌栽培的研究較少。

筆者利用無花果枝屑栽培秀珍菇和猴頭菇，設(shè)置不同無花果枝屑添加量，分析無花果枝屑的營養(yǎng)成分以及對菌絲生長和產(chǎn)量的影響，以期探究無花果枝屑對食用菌的影響并探索出合適的用量，為種植業(yè)農(nóng)業(yè)廢棄物在食用菌產(chǎn)業(yè)中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試材料 無花果枝條，經(jīng)網(wǎng)孔為8 mm的粉碎機(jī)粉碎備用。木屑為食用菌栽培常用的闊葉木屑。

1.1.2 供試菌種‘臺秀57’購于嘉興市南湖區(qū)新豐三益家庭農(nóng)場，‘猴頭菇4916’購于山東澤海菌業(yè)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 含水率和持水力的測定 將闊葉木屑和無花果木屑風(fēng)干，按國家標(biāo)準(zhǔn)《木材含水率測定方法(GB/T 1931—2009)》測定含水率。稱取2.000 g風(fēng)干的樣品，置于100 mL燒杯中，加蒸餾水75 mL，在(25±2)℃下浸泡10 h后，在3600 r/min的轉(zhuǎn)速下離心20 min，取出，傾斜倒置10 min，瀝干多余液體，稱重，獲得樣品濕重，計(jì)算持水力如式(1)[11]。

1.2.2 培養(yǎng)料配方 將菌絲從購買的菌種中分離，保存至試管中作為母種，母種配方為土豆200 g、葡萄糖20 g、瓊脂18 g，配制成1 L。將母種轉(zhuǎn)接為原種，原種配方為木屑78%、麩皮21%、石膏1%，含水量60%。培養(yǎng)料配方如表1所示，每袋質(zhì)量1.1 kg。

表1 2種食用菌的培養(yǎng)料配方%

1.2.3 木屑浸出液制備和菌絲生長速度測定

（1）木屑浸出液培養(yǎng)基的制備。稱取20.0 g無花果木屑，加入1 L水煮沸20 min，用紗布過濾，濃縮濾液至100 mL備用，配制成含有0、5、20、35 mL木屑煮出液的PDA培養(yǎng)基各125 mL。用移液管取12 mL培養(yǎng)基到培養(yǎng)皿中。

（2）菌齡一致的菌絲塊培養(yǎng)。從母種中取菌絲塊，接種至裝有12 mL PDA培養(yǎng)基的90 mm培養(yǎng)皿中央，培養(yǎng)至菌絲剛長滿培養(yǎng)皿，用打孔器在菌落最外圍取大小一致的菌絲塊。

（3）接種方法。用打孔器取菌齡一致的菌絲塊接種至培養(yǎng)皿中央，接種后根據(jù)菌絲生長速度在相同時(shí)間點(diǎn)分2次測量菌絲直徑，2次間隔天數(shù)根據(jù)菌絲生長速度調(diào)節(jié)，約間隔3～5天，每個(gè)處理5次重復(fù)，計(jì)算菌絲生長速度如式(2)。

1.2.4 培養(yǎng)料菌絲生長指標(biāo)測定 取秀珍菇和猴頭菇母種接至PDA培養(yǎng)基中活化菌絲，用打孔器取菌齡一致的菌絲塊5塊接種至18 cm×38 cm的不同處理培養(yǎng)料的菌棒中，放于25℃培養(yǎng)室內(nèi)發(fā)菌。

菌包接種后10天開始測定菌絲生長速度，用油性筆在菌袋上標(biāo)明菌絲邊緣，間隔10天再用油性筆標(biāo)明菌絲邊緣，用直尺測量10天的菌絲生長量，計(jì)算菌絲生長速度如式(3)。

滿袋天數(shù)為從接種到菌絲長滿所用的天數(shù)，現(xiàn)蕾天數(shù)為絲長滿后記錄從開袋到出現(xiàn)菇蕾的天數(shù)。

1.2.5 化學(xué)指標(biāo)測定 將供試木屑烘干后經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，過100號篩，混合均勻使用，培養(yǎng)料含碳量和含氮量按照配方比例計(jì)算獲得。將秀珍菇和猴頭菇第1潮菇烘干后粉碎，過100號篩，混合均勻存儲在4℃冰箱備用。

總碳含量為使用重鉻酸鉀氧化法測定木屑中的碳含量[12]；總氮含量為消解后采用全自動凱氏定氮儀測定的木屑中的氮含量和蛋白質(zhì)含量；采用GB/T 15672—2009的方法測定食用菌中總糖含量；采用NY/T 1676—2008的方法測定食用菌中粗多糖含量。

1.2.6 出菇栽培管理 使用18 cm×38 cm的聚丙烯菌袋裝培養(yǎng)料，將同種配方的菌棒分成3份，每份20袋，每份為一個(gè)重復(fù)，放于大棚出菇架中層發(fā)菌。測定第1潮菇的子實(shí)體形態(tài)、干物質(zhì)含量、平均單菇重。

（1）秀珍菇試驗(yàn)于2019年3—9月在嘉興市南湖區(qū)新豐三益家庭農(nóng)場的秀珍菇棚內(nèi)完成，大棚長100 m、寬8 m、高3 m，采用鍍鋅鋼管做栽培架，制冷出菇，每潮菇4～6 h采摘1次，共采摘4潮。每個(gè)小區(qū)選擇最先采收的30個(gè)子實(shí)體作為測量樣本。

（2）猴頭菇試驗(yàn)于2019年10月—2020年4月在嘉興市農(nóng)科院食用菌栽培基地大棚內(nèi)完成，大棚長15 m、寬6 m、高3 m，采用涂塑網(wǎng)格做栽培架，常溫出菇，共采摘3潮。每個(gè)小區(qū)選擇最先采收的10個(gè)子實(shí)體作為測量樣本。

現(xiàn)蕾（采收）天數(shù)為秀珍菇從開袋到出現(xiàn)菇蕾所用的時(shí)間，猴頭菇從開袋到采收所用的時(shí)間。

將采收后的新鮮子實(shí)體稱重獲得子實(shí)體鮮重，再放入烘箱45℃烘干，稱重獲得子實(shí)體干重，干物質(zhì)含量計(jì)算如式(5)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，各組間數(shù)據(jù)采用Duncan新復(fù)極差法進(jìn)行多重比較，顯著性水平為0.05。采用Personal相關(guān)系數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 無花果枝屑的營養(yǎng)成分、含水率和持水力

木屑的營養(yǎng)成分、含水率和持水力能為培養(yǎng)料的利用提供科學(xué)依據(jù)[13]。由表2可知，無花果枝的半纖維素和木質(zhì)素含量與木屑差異較大，半纖維素含量較木屑高7.34%，木質(zhì)素含量較木屑低42.92%。自然風(fēng)干情況下，無花果枝的含水率較木屑低，而持水力則較高。

表2 無花果枝屑的營養(yǎng)成分、含水率和持水力

2.2 無花果枝屑對培養(yǎng)料含碳量、含氮量和碳氮比的影響

無花果枝屑生長時(shí)間短，從3月萌芽到12月剪枝[14]，枝條僅生長9個(gè)月。由表3可知，無花果枝含碳量39.26%，較木屑低6.7%；含氮量有1.22%，是木屑的5.8倍；因此碳氮比也比木屑低。隨著無花果枝屑添加量的增加，培養(yǎng)料含氮量受到的影響大于含碳量，配方3的含碳量比CK1降低3.4%，含氮量提高73.9%，碳氮比降低44.5%；配方6的含碳量比CK2降低4.7%，含氮量提高120.6%，碳氮比降低56.2%。

表3 無花果枝屑對培養(yǎng)料含碳量、含氮量和碳氮比的影響

2.3 無花果枝屑浸出液對菌絲生長的影響

由表4可知，無花果枝屑浸出液可以促進(jìn)秀珍菇和猴頭菇菌絲生長。隨著添加量的增加，2種食用菌的菌絲生長速度均加快，猴頭菇的菌絲生長速度增幅較大，添加35 mL時(shí)菌絲生長速度增加34.3%，而秀珍菇只增加了25%。

表4 無花果枝屑浸出液對食用菌菌絲生長速度、長勢、色澤和濃密度的影響

浸出液對2種菌絲長勢的影響也不同，少量添加就能使菌絲長勢得到促進(jìn)，而猴頭菇在添加35 mL時(shí)菌絲長勢才增強(qiáng)。菌絲色澤和菌絲濃密度的趨勢也與菌絲長勢一致。

2.4 無花果枝屑對食用菌菌絲生長的影響

將無花果枝屑與木屑、麩皮、棉籽殼和石膏混合做成培養(yǎng)料栽培食用菌。如表5所示，隨著無花果枝屑添加量的增加，秀珍菇和猴頭菇的菌絲生長速度都減慢，秀珍菇的菌絲生長速度減慢較明顯，添加50%無花果枝屑時(shí)較CK1慢14.9%，而猴頭菇在添加28%和48%無花果枝屑時(shí)菌絲生長速度與CK2無顯著差異，當(dāng)添加68%無花果枝屑時(shí)菌絲生長速度才減慢，較CK2慢8.7%。導(dǎo)致2種食用菌在添加無花果枝屑后滿袋時(shí)間延長，配方3和配方6分別比其對照延長7天和8天。

表5 無花果枝屑對食用菌菌絲生長的影響

培養(yǎng)料中菌絲長勢以猴頭菇變化更加明顯，隨著添加量的增加猴頭菇菌絲長勢逐漸加強(qiáng)，而秀珍菇的菌絲長勢僅配方3有所加強(qiáng)。無花果枝屑對出菇和采收也會產(chǎn)生影響，秀珍菇配方3菌絲滿袋時(shí)間最長，但在開袋前便出現(xiàn)菇蕾，隨即將所有菌包開袋，其他幾個(gè)處理都在開袋后2天才出現(xiàn)菇蕾；猴頭菇計(jì)算開袋到采收時(shí)間，添加無花果枝屑后采收時(shí)間明顯延后。

2.5 無花果枝屑對食用菌菇型、干物質(zhì)含量和單菇重的影響

由表6可知，無花果枝屑對食用菌菇型會產(chǎn)生影響。秀珍菇配方2的菌柄顯著細(xì)于配方1，配方3的菌蓋平均值較寬，但是與其他處理差異不顯著。猴頭菇在添加無花果枝屑后菇型都增大，以配方4的菇型最大，顯著高于CK2。無花果枝屑的添加對秀珍菇干物質(zhì)含量和單菇重?zé)o顯著影響，猴頭菇配方5的干物質(zhì)含量顯著高于CK2，而單菇重則隨著添加量的增加而減小。

表6 無花果枝屑對子實(shí)體形態(tài)、干物質(zhì)含量和單菇重的影響

續(xù)表6

2.6 無花果枝屑對食用菌產(chǎn)量的影響

秀珍菇和猴頭菇都以第1潮產(chǎn)量最高，秀珍菇隨著潮次增加產(chǎn)量降低較明顯（表7）。無花果枝屑對秀珍菇第1潮產(chǎn)量影響較大，對猴頭菇的第2、3潮產(chǎn)量影響較大。秀珍菇第1潮以配方3的產(chǎn)量最高，第2、3、4潮不同處理間的產(chǎn)量差異不顯著，總產(chǎn)量以配方3最高，較CK1高39.6%。猴頭菇第1潮不同配方間產(chǎn)量差異不顯著，第2、3潮均以配方4產(chǎn)量最高，并且顯著高于CK2，總產(chǎn)量也以配方4最高，較CK2高22.2%。

表7 無花果枝屑對食用菌產(chǎn)量的影響 kg/20袋

2.7 無花果枝屑對食用菌品質(zhì)的影響

如表8所示，添加無花果枝屑后秀珍菇和猴頭菇的總糖含量降低，并且顯著低于對照。2種食用菌的粗蛋白含量隨著無花果枝屑的添加量而增加。無花果枝屑對秀珍菇粗多糖含量無顯著影響，但會顯著降低猴頭菇的粗多糖含量。

表8 無花果枝屑對食用菌品質(zhì)的影響

2.8 相關(guān)性分析

將秀珍菇和猴頭菇的各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果見表9～10。秀珍菇菌絲生長速度與滿袋天數(shù)呈極顯著正相關(guān)，并且與第1、2潮產(chǎn)量和總產(chǎn)量呈顯著負(fù)相關(guān)，即菌絲生長速度越慢，第1、2潮菇產(chǎn)量越高。而添加無花果枝屑后，秀珍菇菌絲生長速度越慢，粗蛋白和總糖含量越高。秀珍菇的總糖含量還與其菌柄粗細(xì)有極顯著正相關(guān)性。秀珍菇前3潮的產(chǎn)量決定了其總產(chǎn)量，第2潮的產(chǎn)量與總產(chǎn)量相關(guān)性更強(qiáng)。秀珍菇在無花果枝屑中生長速度會變慢可能是無花果枝屑的添加提高了秀珍菇子實(shí)體的粗蛋白含量和產(chǎn)量。

表9 秀珍菇各指標(biāo)相關(guān)性分析

表10 猴頭菇各指標(biāo)相關(guān)性分析

猴頭菇對無花果枝屑的反應(yīng)與秀珍菇不同，滿袋天數(shù)則與猴頭菇單菇重呈負(fù)相關(guān)，即滿袋天數(shù)越長單菇重越輕。粗蛋白含量與單菇重有關(guān)，粗蛋白含量越高單菇重越輕。猴頭菇的總產(chǎn)量與第三潮菇的相關(guān)性較強(qiáng)。

3 結(jié)論

研究認(rèn)為，無花果枝屑可以用于栽培秀珍菇和猴頭菇，能夠加強(qiáng)2種食用菌菌絲長勢，其對秀珍菇菌絲出菇、產(chǎn)量和品質(zhì)都有較好的促進(jìn)作用，以添加50%無花果枝屑效果最佳，而猴頭菇栽培中用于增產(chǎn)的最佳添加量為28%。

4 討論

木材浸出液含有一些蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類、酚類、無機(jī)鹽酚、酸、醛、酮類[15]和芳香類等物質(zhì)，能提高真菌的酶活性，促進(jìn)某些酶的產(chǎn)生[16-17]。本研究中，無花果枝屑浸出液能促進(jìn)秀珍菇和猴頭菇菌絲生長，并且秀珍菇對無花果枝屑浸出液更加敏感，少量添加菌絲生長速度和長勢就得到了促進(jìn)，但在培養(yǎng)料中添加時(shí)菌絲生長速度卻減慢，這可能與培養(yǎng)料碳氮比含量有關(guān)，碳氮比是影響食用菌生長和產(chǎn)量的重要因素，過量的氮和碳都會抑制菌絲生長[18-19]。無花果枝條生長時(shí)間短，枝條木質(zhì)化程度低，木質(zhì)素含量只有17%，培養(yǎng)料添加無花果枝屑對碳氮比降低影響較大，而秀珍菇菌絲體生長最佳碳氮比為68:1～69:1[20]，猴頭菇菌絲體生長最佳碳氮比為20:1[21]。本研究中，CK1的碳氮比接近秀珍菇菌絲體生長最佳碳氮比，隨著碳氮比減小，菌絲生長速度逐漸減慢，但培養(yǎng)料碳氮比接近猴頭菇菌絲體生長最佳碳氮比時(shí)其生長速度反而變慢，可能是由于無花果樹汁液中含有許多藥用成分，還包括大量黃酮類物質(zhì)[22]，它在植物抗菌防病等方面起著重要的作用[23]，而黃酮類物質(zhì)難溶于水，不存在于浸出液中，導(dǎo)致培養(yǎng)料中的無花果枝屑對猴頭菇菌絲生長產(chǎn)生了抑制作用。

無花果枝的添加對秀珍菇第1潮菇產(chǎn)量影響較大，而后3潮的產(chǎn)量很低并且不同處理間差異不顯著，這可能是由于后3潮并不是每包都出菇，后期養(yǎng)菌時(shí)間長，養(yǎng)分消耗大，產(chǎn)量少，使產(chǎn)量差異不顯著；而猴頭菇產(chǎn)量則在2、3潮才表現(xiàn)出差異，這可能是少量添加無花果枝屑能減少后期養(yǎng)菌期間的養(yǎng)分消耗，還需進(jìn)一步研究。

雖然無花果枝屑可能存在一些抑制菌絲體生長的物質(zhì)，并且猴頭菇對于這種抑制物質(zhì)更為敏感，但其對于產(chǎn)量和子實(shí)體蛋白質(zhì)含量的促進(jìn)作用較明顯，在合理使用的情況下還是能達(dá)到較好的效果。