伏娟麗
寧夏中寧縣農業農村局動物疾病預防控制中心,寧夏中寧 755100
2021年5月18日,中寧縣動物疾病預防控制中心實驗室接診一起病死羔羊,樣品來源是由中寧縣徐套鄉土塘村一養羊農戶送檢。
養殖戶存欄羊68只,2021年4月中旬開始發病,病程1月余,零星死亡。死亡羔羊為1~2月齡,拉黑色稀便,藥物治療不能控制。由于病程較長陸續死亡,疾控中心派技術人員到現場調查。
2.1 羊群的結構;有繁殖母羊、育肥羊,小羔羊,混群飼養無隔離措施。
2.2 飼養管理:日常飼喂中粗飼料主要為玉米秸稈和干稻草,經粉碎后放置于食槽中自由采食;精料主要為玉米和麩皮。成年羊每天每只0.25 kg,圈舍潮濕、不潔凈。
2.3 免疫情況:2021年2月12日肌肉注射O型口蹄疫疫苗1 mL/只、小反芻獸疫苗頸部皮下注射一頭份(一月齡以上的羊免疫、懷孕3個月以上的羊除外),免疫后羊群無異常表現。羊群一致沒有免疫羊四聯疫苗。
2.4 流行特點:發病一月余,已死亡13只,藥物治療可緩解癥狀,但死亡還零星發生。
病羊萎靡,精神不振,不愿采食,眼結膜潮紅,有的弓背,有的臥地不起,拉黑色稀便。發病急,死亡快,死亡為小羔羊,成年羊未見明顯發病癥狀。
將死亡羔羊的腹部剖開,可以清晰地看到羊的肝臟變得腫大,呈現出暗紫色,出血點和出血斑在肝臟表面呈彌散狀,將其切開后可以看到肝組織變的腫脹;脾臟也變得腫大,顏色黑紫;肺臟表面可以清楚地看到淤血斑,水腫明顯,顏色是鮮紅色;心包積液、液體為黃色透明狀,真胃內充滿乳凝塊、胃黏膜有出血斑。十二指腸腸道鼓氣明顯,剪開腸壁能觀察到出血癥狀,腸壁變薄,腸內可以看到脫落的腸黏膜,還有膿性分泌物,呈黃綠色,質地粘稠;切開空腸斷,能看到里面有大量的液體,粘稠,呈紅棕色;回腸有出血斑,結腸、直腸等都清晰地出現了大理石樣的變性。總之,死亡羔羊的實質性器官均發生了明顯的出血特征。
5.1 實驗室診斷
血清血檢測:采集羊血10份,離心分離血清,做虎紅平板凝集試驗,布氏桿菌陰性10份;取10份血清分別做O型口蹄疫(診斷試劑為蘭州獸研所生產)、小反芻獸疫(診斷試劑為青島立見)免疫抗體測定,結果均為陽性,達到免疫抗體合格標準。
5.2 細菌檢測
5.2.1 組織觸片:取病死羊病灶明顯的臟器:肝、脾、腸系膜淋巴結組織,在生物安全柜中無菌操作下觸片,保持自然環境干燥,溫度為常溫,對組織進行染色后將其放置在1 000倍顯微鏡下進行觀察,可以發現藍紫色的小桿菌,其兩端很整齊,長度不同,即革蘭氏陽性菌。玻片在空氣中放置15 min左右,再在油鏡下觀察,菌體周圍有白色熒光。
5.2.2 細菌培養:在無菌環境下對死亡羔羊的肝、脾、淋巴組織進行營養瓊脂培養,然后進行生化培養,保持環境溫度為37 ℃不變。24 h后,長出灰白色菌落。取單個的菌落劃線式接種于營養瓊脂、血液瓊脂培養基上,厭氧培養,在營養瓊脂同樣長出灰白色菌落、在血液瓊脂上有明顯的抑菌圈。分離培養觸片,經革蘭氏染色后進行顯微鏡鏡檢,視野下有兩端整齊、長短不一的藍紫色的小桿菌,即陽性菌。
5.2.3 糖發酵實驗:用接種棒取已培養的營養瓊脂的單個菌落少許,接種于葡萄糖高層瓊脂培養液管中,混勻后置37 ℃溫箱培養10~24 h后觀察結果。在含葡萄糖的高層瓊脂中培養產生大量氣體,并使瓊脂斷裂。能分解葡萄糖產酸產氣。這一特點是產氣莢膜梭菌顯著特點之一“發酵糖的能力”。
5.2.4 診斷結果:該細菌為產氣莢膜梭菌。
6.1 清理圈舍內每天剩余的飼草料和剩余的飲用水,做無害化處理,每天清理圈舍的糞便,場地每天用0.3%的燒堿噴霧徹底消毒一次,堅持15 d左右。
6.2 將病羊和健康羊隔離,病羊口服復合維生素+溫立康雙黃連,生理鹽水稀釋鹽酸林可霉素10~20 mg/只、復方磺胺甲氧嘧啶鈉0.3 mL/只,羔羊分兩側頸部肌肉注射,每天1次,連用3 d。健康羊群用白頭翁散拌料(以上劑量均按說明),連用3 d。用藥后停藥4 d,全羊群用羊四聯疫苗(頸部肌肉注射)免疫一次,每只羊1.5頭份,免疫后再無死亡。
7.1 致死原因分析
此病是由魏氏梭菌-產氣莢膜桿菌引起的二類動物疫病,本菌在自然界分布很廣,常見于低洼潮濕(土壤、圈舍、塵埃)的環境中,不易被消除,飼養管理不當、體質弱的羊容易通過消化道感染梭菌病。
7.1.1 小羔羊體質弱,免疫器官發育不完善,容易遭病原菌的侵襲,一旦感染,通過直接接觸、間接接觸而使羊群中的小羔羊發病。成年羊精神狀態良好,免疫疾病的抵抗力強,在飼養管理良好的條件下,對本病有一定的抵抗力,成年羊無死亡。
7.1.2 羊群沒有免疫羊四聯疫苗是誘發本病的直接原因:四聯疫苗頸部肌肉注射1頭份/只、免疫后4~7 d產生免疫力,免疫有效期12個月。繁殖母羊、種公羊一年免疫1次,母羊在配種前后免疫,對產下的小羔羊有免疫保護。實踐證明基礎免疫做好的繁殖母羊,生產的小羔羊很少發生此病。
7.2 合理分群、及時補飼,增強免疫力
小羔羊與成年羊混群飼喂,易遭踩踏、圈舍潮濕易感染病原菌,易誘發消化系統疾病。建議羔羊與成年羊分群,定時吃奶及早補飼,增強體質提高免疫力,預防疾病的發生。
7.3 做好環境消毒工作
定期對圈舍及周圍環境用4% NaOH進行徹底消毒。在疫病發生期間每天消毒一次,在羊群健康的條件下,每兩周消毒一次,很好的殺滅環境中的病原微生物,減少疫病感染的機會,保護羊群的健康。