NBI放大內(nèi)鏡聯(lián)合Survivin、Cry61檢測與老年結直腸癌疾病診斷及預后的關系

常風娟 馬俊寶 胡鴻濤

(1新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院內(nèi)鏡室，河南 新鄉(xiāng) 453000；2鄭州大學附屬腫瘤醫(yī)院介入科)

結直腸癌是臨床常見的消化系統(tǒng)腫瘤，發(fā)病初期(早期、中期)無特異性或明顯臨床癥狀，一旦發(fā)現(xiàn)身體不適而進行就診時大多數(shù)已經(jīng)入中晚期，錯過了最佳治療時期，且老年患者體質(zhì)弱、免疫抵抗能力差，往往伴隨多種慢性疾病(高血壓、糖尿病、高血脂、冠心病等)，增加了治療難度〔1，2〕。文獻報道顯示血清腫瘤標志物與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切關聯(lián)，其中Survivin作為凋亡抑制蛋白(IAP)家族中的成員，調(diào)控腫瘤細胞的發(fā)生發(fā)展、侵襲轉移、組織分化等〔3〕，而Cry61作為富含半胱氨酸的分泌性肝素連接蛋白，參與細胞增殖、遷移、黏附、分化等生理學過程，兩者血清水平的變化與腫瘤進展及預后密切關聯(lián)〔4〕。目前內(nèi)鏡下病理組織學檢查是診斷結直腸癌的金標準，隨著診斷、治療的要求不斷提高，臨床上也越來越希望內(nèi)鏡技術保證高的穩(wěn)定性和準確性，同時可有效鑒別腫瘤、非腫瘤〔5〕。窄帶成像(NBI)是一種創(chuàng)新的光學技術，與放大內(nèi)鏡(ME)結合可精確觀察病變部位表面形態(tài)結構和黏膜微血管形態(tài)，指導醫(yī)師臨床判斷，實際臨床運用中腸道、病變情況會影響醫(yī)師判斷，研究發(fā)現(xiàn)輔助血清指標檢測有助于了解結直腸癌的生物學行為，從而提高診斷準確度，有效判斷預后情況〔5，6〕。本文旨在探討NBI放大內(nèi)鏡聯(lián)合Survivin、Cry61檢測與老年結直腸癌疾病診斷及預后的關系。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年8月至2018年8月于新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院經(jīng)常規(guī)內(nèi)鏡檢查判斷為疑似老年結直腸癌患者156例，其中男87例，女69例，年齡60～78歲，平均(68.86±6.89)歲。納入標準：①常規(guī)內(nèi)鏡檢查顯示存在結直腸新生物或息肉樣；②患者均未經(jīng)過手術治療、放化療及免疫治療等，均自愿接受組織病理學、NBI ME檢查；③病例資料完整，依從研究方案。排除標準：①心、肝、腎等重要臟器功能障礙者，造血系統(tǒng)疾病者；②炎性腸病如克羅恩病、潰瘍性結腸炎，家族性結直腸腺瘤性息肉??；③存在其他原發(fā)性惡性腫瘤，或者腫瘤轉移者；④腸道準備欠佳者，各項檢查依從性較差?；颊呒凹覍倬炇鹬橥鈺?，本研究獲得本院倫理委員會批準。

1.2方法 所有患者內(nèi)鏡檢查由同一經(jīng)驗豐富的內(nèi)鏡醫(yī)師操作，行常規(guī)內(nèi)鏡檢查、ME-NBI檢查，并取疑似老年結直腸癌患者病理組織，送至病理室進行組織活檢。

采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清Cry61及Survivin水平，所有試劑盒購自武漢博士德公司，具體操作按照試劑盒說明書進行。各指標診斷陽性判定標準：以受試者工作特征(ROC)曲線截斷值為臨界值，高于該值判為陽性，否則為陰性。平行聯(lián)合檢測判定：任何1項指標出現(xiàn)陽性，即判定為陽性。系列聯(lián)合檢測判定：幾個檢測指標均出現(xiàn)陽性結果時，判定為陽性。隨訪1年，每3個月1次電話問診，統(tǒng)計結直腸腫瘤患者存活情況。

1.3統(tǒng)計學處理 采用SPSS19.0軟件進行χ2檢驗，t檢驗，采用ROC曲線分析血清指標檢測對結直腸癌的診斷價值，采用 Kaplan Meier分析評估血清Cry61及Survivin表達對結直腸癌患者生存的影響。

2 結 果

2.1疑似老年結直腸癌患者血清Cry61及Survivin表達水平及ME-NBI檢測結果 結直腸癌112例，結直腸息肉44例，結直腸癌組血清Cry61及Survivin表達水平顯著高于結直腸息肉組(P<0.001)，ME-NBI檢測準確率為83.97%(131/156)，見表1。

表1 疑似老年結直腸癌患者血清Cry61及Survivin表達水平及ME-NBI檢測結果

2.2ME-NBI、Survivin、Cry61檢測對老年結直腸癌的診斷價值 血清Survivin、Cry61診斷結直腸癌的ROC曲線(圖1)顯示血清Survivin診斷結直腸癌的曲線下面積為0.844，血清Cry61診斷結直腸癌的曲線下面積為0.801(P<0.001)。以約登指數(shù)最大時的血清Survivin(386.21 ng/L)、Cry61(115.39 ng/L)水平作為臨界值。與其他檢測模式相比，三指標平行聯(lián)合檢測時敏感性、準確率顯著升高(P<0.05)；系列聯(lián)合檢測時特異性相對最高，見表2。

圖1 血清Survivin、Cry61診斷的ROC曲線

表2 ME-NBI、Survivin、Cry61檢測對老年結直腸癌的診斷價值

2.3Survivin、Cry61水平與老年結直腸癌預后的相關性 隨訪1年老年結直腸癌患者死亡24例，死亡組血清Cry61及Survivin表達水平顯著高于存活組(P<0.05)，見表3。以結直腸癌患者各血清中位數(shù)水平為臨界值，超過該值則判為陽性，否則為陰性。Kaplan Meier生存分析顯示隨訪1年血清Cry61及Survivin陽性患者死亡率(17/60、18/58)顯著高于陰性患者(7/52、6/54，P<0.05)，見圖2。

表3 疑似老年結直腸癌患者血清Cry61及Survivin表達水平

圖2 生存曲線

3 討 論

中晚期結直腸癌的無瘤生存時間低于38個月，化療、手術切除等方式治療后患者3年生存率低于65%，而早期發(fā)現(xiàn)并治療后患者5 年生存率高達 90%，因此早期診斷、治療對于患者預后至關重要〔7～9〕。目前結腸鏡等組織病理學檢查作為診斷金標準，操作具有侵入性，且操作復雜、有創(chuàng)，需在內(nèi)鏡下摘除病理組織并送病檢，反復內(nèi)鏡操作和病理分析增加了醫(yī)療費用和醫(yī)務人員工作量，不適宜于大量人群結直腸疾病的篩查，我國早期結直腸癌的檢出率不足10%〔10〕，因此仍需探尋操作簡便、高效、準確及經(jīng)濟的診斷方法。臨床研究發(fā)現(xiàn)ME-NBI相對于常規(guī)內(nèi)鏡檢查可清晰顯示消化道黏膜的表面的形態(tài)結構和血管分布，特別是平坦型和微小型病變腸道，從而指導內(nèi)鏡靶向活檢，提高了早期診斷檢出率，同時還能觀察結直腸癌黏膜的血管、腺管開口分型，可有效評估腫瘤組織學類型和腫瘤浸潤深度，指導醫(yī)生治療方案的選擇〔11，12〕。ME-NBI鑒別結直腸病變的診斷價值已得到臨床認可，如楊上文等〔5〕研究發(fā)現(xiàn)ME-NBI使用佐野分型在鑒別結直腸癌變的準確性、特異性、敏感度均超過90%。在實際操作過程中診斷準確度受到腫瘤分型、腸道準備以表面黏液、病變部位、浸潤深度、大小及獲取圖片清晰度等因素的影響，因此單純靠獲得的圖片并不能有效反映內(nèi)鏡醫(yī)師實際操作時的診斷準確率。

越來越多的腫瘤標志物已在臨床診斷中得到認可，配合組織病理學、內(nèi)鏡檢查，可有效提高診斷準確率，反映患者疾病進展及預后情況。Survivin 可在多種腫瘤組織(胃癌、肺癌等)中高表示，編碼存活素蛋白，從而調(diào)控腫瘤細胞的發(fā)生發(fā)展、侵襲轉移、組織分化等〔3，13〕。Cry61在前列腺癌、乳腺癌、胃癌、食管癌等腫瘤組織中高表達，可刺激P13K/Akt信號通路，激活NF-κB轉錄，加快腫瘤細胞增殖、遷移等，故而通過檢測血清腫瘤標志物水平可有效評估患者疾病進展〔4，14〕。本次研究結果與檀碧波等〔13，15〕報道一致，即腫瘤患者血清Cry61及Survivin處于高表達，從而調(diào)控腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。對于門診篩查，應選擇平行聯(lián)合檢測，可有效降低漏診率。

本研究結果表明血清Cry61及Survivin表達水平越高則患者預后越差，正如賴曉寧等〔15〕報道顯示Cry61及Survivin促進疾病進展，其中結直腸癌患者血清水平顯著高于良性腫瘤患者及健康者，其水平與結直腸癌的遠處轉移、臨床分期及血管侵襲存在相關性，高水平Cyr61表達患者的轉移風險高、5年生存率低〔15，16〕。趙巖等〔3〕研究發(fā)現(xiàn)Survivin可能通過抑制Caspase9的激活而增加腫瘤細胞抗凋亡能力，還能通過介導血管內(nèi)皮生長因子生成及促進血管形成素1的表達而誘導腫瘤處三維毛細血管網(wǎng)的形成，從而促進腫瘤細胞的生長、增殖和轉移。通過ME-NBI檢測可清晰觀察腫瘤病變表面結構及微血管，結合放大內(nèi)鏡實時進行組織學診斷，區(qū)分腫瘤、腺瘤和增生，同時對于內(nèi)鏡無法區(qū)分的病變，可通過檢測腫瘤標志物進行輔助判斷，有助于了解結直腸癌的生物學行為，從而提高診斷、預后判斷價值，并指導醫(yī)師進行針對性治療，如對于浸潤深度不超過1 mm的早期腫瘤適宜內(nèi)鏡下治療，對于超過1 mm的腫瘤，由于存在轉移風險，不適合內(nèi)鏡下治療，若對于淺表腫瘤行外科手術治療，則會導致過度治療〔5〕，因此聯(lián)合診斷可從浸潤深度和面積、轉移風險等多個方面評估結直腸癌預后情況，從而優(yōu)化治療方案，降低死亡風險。

ME-NBI、Survivin、Cry61平行聯(lián)合檢測可提高老年結直腸癌疾病診斷的敏感性、準確率及有效評估患者預后進展。