我國部分地區羊消化道寄生蟲感染情況調查及球蟲種類鑒定

劉林科，菅憶晨，王占銘，李世杰，王榮軍，寧長申，張素梅，菅復春

(河南農業大學動物醫學院，河南 鄭州 450046)

近年來，伴隨著我國人民生活水平的提高，對羊肉的需求量日益增加，羊養殖數量也快速增長[1]。在養殖過程中，各種疫病的發生常給生產造成巨大的經濟損失，其中寄生蟲感染是影響羊等小型反芻動物生產效益的重要因素之一[2]。羊腸道寄生蟲病可引起羊食欲不振、貧血、腹瀉、生長發育不良，甚至造成死亡[3]。有些寄生蟲病還能導致母羊妊娠率和后代存活率降低、產品產量及質量下降[4]。我國地域遼闊，羊品種豐富，不同地域、品種羊的腸道寄生蟲感染情況，以及羊對寄生蟲的抵抗力可能存在差異[2]。為了解我國部分地區羊春夏季節腸道寄生蟲流行規律，對全國8個省寄生蟲感染情況進行調查，以期為有效防控腸道寄生蟲病提供參考，本次調查選取4大優勢肉羊區域內的河南、江蘇、吉林、遼寧、甘肅、貴州作為主要采樣地，以及海南和青海共8個省份，涉及13個品種羊的共472份羊糞樣進行檢測。

1 材料與方法

1.1 樣品收集

2019年4月至7月，對全國8個省16個地區的羊采集新鮮糞便樣品，每份樣品20～30 g，收集于潔凈自封袋中，標明采集時間、地點、癥狀等相關背景信息，共采集樣品472份，每份樣品加入適量2.5%重鉻酸鉀，保存于4 ℃冰箱中備檢。

1.2 樣品檢查方法

每份樣品分別取5 g左右，采用水洗離心沉淀法、盧戈氏碘液染色法和飽和蔗糖溶液漂浮法進行檢測[5]，并使用MoticBA310顯微鏡對觀察到的卵囊和蟲卵進行拍照。

1.3 糞便檢查結果鑒定

對鏡檢檢查到的寄生蟲卵囊、包囊、蟲卵等，依據其形態結構，參照文獻[5]進行種類鑒定。

1.4 球蟲的孢子化培養及蟲種鑒定

參考陶立等[6]的方法，對黑山羊、波爾山羊和奶山羊的糞便樣品進行球蟲卵囊收集和培養，置于4 ℃冰箱保存備用，并依據形態進行蟲種鑒定[6-9]。

1.5 數據分析

數據統計采用Pearson卡方檢驗，P<0.01表示差異極顯著，P<0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 羊腸道寄生蟲總體感染情況

對不同地區羊腸道寄腸蟲感染情況調查結果見表1。

表1 不同地區羊感染腸道寄生蟲的種類和感染率

本次調查的472份羊糞便樣品中，腸道寄生蟲總感染率為85.38%(403/472)，共檢測到球蟲、阿米巴、線蟲、絳蟲4類寄生蟲的卵囊、包囊或蟲卵，感染率分別為68.86%(325/472)、44.49%(210/472)、29.24%(138/472)、1.91%(9/472)。

2.2 腸道寄生蟲混合感染情況

在472份樣品中，共403份樣品檢測出寄生蟲，其中單種病原感染率為38.98%(184/472)。2種寄生蟲混合感染率為35.38%(167/472)，3種寄生蟲混合感染率為10.38%(49/472)，4種寄生蟲混合感染率為0.64%(3/472)，總混合感染率為46.40%(219/472)。

2.3 不同品種羊腸道寄生蟲感染情況

在13個品種的羊中，黑山羊、波爾山羊、絨山羊、金堂山羊、努比亞山羊、撒能奶山羊、夏洛萊綿羊7種羊的球蟲感染率在80.00%以上。黑山羊、槐山羊、奶山羊、細毛羊、美利奴綿羊4種羊的線蟲感染率在40.00%以上。絳蟲只在白山羊，黑山羊，波爾山羊，奶山羊，湖羊5種羊中被檢測到。絨山羊和夏洛萊綿羊的球蟲感染率高達80.00%以上，但沒有檢測到線蟲。金堂山羊和努比亞山羊100.00%球蟲感染率的同時，線蟲感染率很低，分別只有10.00%和13.79%。

表2 不同品種羊感染腸道寄生蟲感染情況

2.4 不同性別羊腸道寄生蟲感染情況

對雌雄間的不同腸道寄生蟲感染率進行統計分析，結果見表3。母羊和公羊的球蟲感染率分別為77.78%(210/270)和30.91%(17/55)，母羊球蟲感染率高于公羊，差異極顯著(P<0.01)。母羊和公羊的絳蟲感染率分別為0.74%(2/270)和5.45%(3/55)，母羊絳蟲感染率低于公羊，差異顯著(P<0.05)。母羊和公羊見阿米巴原蟲和線蟲的感染率差異不明顯(P>0.05)。

表3 不同性別羊腸道寄生蟲感染情況

2.5 寄生蟲種類鑒定

在472份樣品中共檢測到4種線蟲，1種絳蟲。線蟲分別為細頸線蟲0.21%(1/472)、毛首線蟲3.39%(16/472)、類圓線蟲27.12%(128/472)、毛細線蟲0.21%(1/472)，絳蟲為擴展莫尼茨絳蟲1.91%(9/472)。對阿米巴原蟲未定種。在波爾山羊、黑山羊、奶山羊的樣品中共檢測到10種艾美耳球蟲(見圖1)。

A.毛首線蟲蟲卵(400×)；B.細頸線蟲蟲卵(200×)；C.毛細線蟲蟲卵(400×)；D.類圓線蟲蟲卵(400×)；E.擴展莫尼茨絳蟲蟲卵(400×)；F.阿米巴原蟲包囊(1 000×)；G.阿氏艾美耳球蟲(1 000×)；H.未孢子化球蟲卵囊(1 000×)；I.艾麗艾美耳球蟲(1 000×)；J.蒼白艾美耳球蟲(1 000×)；K.斑點艾美耳球蟲(1 000×)；L.家山羊艾美耳球蟲(1 000×)；M.山羊艾美耳球蟲(1 000×)；N.阿撒他艾美耳球蟲(1 000×)；O.羊艾美耳球蟲(1 000×)；P.顆粒艾美耳球蟲(1 000×)；Q.克氏艾美耳球蟲(1 000×)圖1 本次調查發現的寄生蟲卵囊、包囊和蟲卵

3種山羊感染球蟲的種類及感染率詳見表4。波爾山羊中發現的球蟲種類豐富(10種)，其中阿氏和阿薩他艾美耳球蟲為優勢蟲種，其次是山羊、艾麗、家山羊、克氏、顆粒艾美耳球蟲，感染比例較少的為蒼白、斑點和羊艾美耳球蟲。而海南黑山羊感染球蟲有7種，優勢種類分別是艾麗、阿薩他、克氏艾美耳球蟲。薩能奶山羊共感染6種球蟲，其中羊、艾麗、山羊艾美耳球蟲為優勢種類。

表4 3種山羊球蟲種類分布及感染率

3 討論

3.1 羊腸道寄生蟲感染情況分析

本次調查中羊腸道寄生蟲總感染率為85.38%(403/472)。與景紀春等[10]對河南地區舍飼湖羊腸道寄生蟲的調查結果(97.47%)，蔡為民等[11]對江蘇地區19個羊場羊腸道寄生蟲的調查結果(90.32%)，以及李夢婕等[12]對河南、吉林、遼寧和山東地區羊腸道寄生蟲的調查結果(97.2%)相比，本研究結果的感染率較低。與唐莉等[13]對安徽省、河南省、江蘇省和山東省部分地區羊腸道寄生蟲的報道(54.99%)，以及張艷艷等[14]對新疆規模化舍飼羊場羊腸道寄生蟲的調查結果(69.28%)相比，本研究結果相對較高。在混合感染方面，本次調查總混合感染率為42.58%(201/472)，與景紀春[10]、蔡為民[11]、李夢婕等[12]的報道相比較低。表明我國不同地區羊腸道寄生蟲感染情況雖有差別，但整體上羊腸道寄生蟲感染率依然很高，混合感染情況普遍。

此外，本研究共調查了16個地區的羊場，其中的12個地區羊場的羊腸道寄生蟲感染率均在80%及以上，甘肅武威0(0/3)、江蘇南通66.67%(8/12)、江蘇徐州54.63%(59/108)、青海共和66.67%(2/3)的感染率較低。其中甘肅武威和青海共和的樣品量較小，不足以代表總體的感染情況，還需進一步研究完善該地區的調查數據。江蘇徐州羊場在平時并未做過驅蟲，但其寄生蟲感染率卻相對較低，這可能與其高架床養殖模式有關。張宇新等[15]的報道也顯示了高架床養殖的感染率61.34%(73/119)明顯低于平地放養98.54%(135/137)，兩者差異極顯著。這說明高架床養殖模式有利于羊腸道寄生蟲的防控，應積極推廣。

馬來西亞的調查結果顯示，其球蟲病患病率為89.2%，胃腸道線蟲病患病率為52.3%[16]。韓國的報道顯示其羊腸道寄生蟲感染率為69.3%[17]。巴西帕拉伊巴報道的羊腸道寄生蟲感染率為75.9%[18]。說明羊腸道寄生蟲感染在不同地理環境，不同發展程度的國家都普遍存在，是全國乃至全球羊養殖業面臨的一個挑戰。

3.2 羊腸道寄生蟲優勢蟲種

本次調查結果顯示，球蟲仍為羊腸道寄生蟲的優勢蟲種，且在羔羊中最為嚴重。與張艷艷等[14]報道結果相一致。中國東北黑龍江省綿羊球蟲感染率為92.9%，山羊為87.9%[19]。羔羊的球蟲感染強度和患病率顯著高于成年羊。本次調查對部分羊場羊的球蟲感染強度進行了半定量分析，發現22份高感染強度樣品中有18份為羔羊。這與羔羊易感性高、抵抗力低，且容易被帶蟲母羊傳染有關。目前研究已證實，球蟲病會引起羊只腹瀉進而導致增重遲緩，給養殖場帶來潛在的經濟損失。羔羊感染球蟲后，卵囊排出在斷奶期前后達到高峰，隨后由于宿主免疫功能的增強而逐漸減少[20]，這也對本研究的結果做出了合理的解釋。因此，要關注妊娠母羊的球蟲防控，以防止母子傳播。羔羊球蟲嚴重感染的危險因素包括：養殖密度大、衛生條件差和生理、營養等應激因素[20]。在當下集約化養殖條件下，隨著養殖密度加大，球蟲病也隨之高發，養殖場應注意避免這些不利因素，并采取對產前母羊用藥驅蟲和哺乳期驅蟲等措施，減少羔羊染蟲率。

除球蟲外，線蟲也是反芻動物生產的主要限制因素之一，它們能夠引起羊只骨骼生長遲緩、體重減輕和產奶量減少[21]。胃腸道線蟲感染在全球羊養殖中也具有重要的經濟意義，而山羊與線蟲相互作用的特殊性可能影響胃腸道線蟲的防治策略。山羊獲得和表達針對胃腸道線蟲免疫反應的效率都比綿羊低，因此山羊比綿羊對線蟲更易感[22]。本次調查結果顯示，山羊的線蟲感染率為33.81%(119/352)，綿羊的為15.83%(19/120)，差異極顯著，這與之前的研究結果是相一致的。因此，對山羊和綿羊的線蟲防控要區別對待，山羊的線蟲治理需要更加詳細，規范的用藥程序，用藥前后需進行荷蟲量監測，以便做好藥效評價，為下次驅蟲工作提供參考。

3.3 不同品種羊腸道寄生蟲感染情況

3.3.1 不同品種羊腸道寄生蟲感染差異

本次調查結果中，絨山羊和夏洛萊綿羊的球蟲感染率高達80%以上，但卻沒有檢測到線蟲。金堂山羊和努比亞山羊球蟲感染率100%的同時，線蟲感染率卻很低。這可能提示了不同品種羊對不同寄生蟲有著不同程度的抗性。絳蟲只在白山羊、黑山羊、波爾山羊、奶山羊、湖羊5種羊中被檢測到，這可能與本次調查的羊場大部分都為舍飼飼養有關。李夢婕等-[12]報道顯示，舍飼羊群與放牧羊群相比不易感染絳蟲，和本次調查結果一致。13個品種中只有白山羊56.41%(22/39)和湖羊52%(39/75)寄生蟲總感染率較低，上述樣品來自于江蘇省徐州市同一家養殖場，這可能與該場飼養管理和寄生蟲防控水平較高有關。

目前關于宿主對寄生蟲抗性差異的信息很少，了解這些將有助于設計更合理的控制程序。Haile等[2]的研究表明，當地羊的線蟲抗性可能是由于該地區農業生態的變化，導致線蟲蟲卵的發育、存活和自由生活階段的適宜性發生了變化，同時也可能是不同品種的宿主在第一次接觸病原時，能夠產生有效的保護性免疫反應導致的。羊的品種與寄生蟲抗性之間的關系尚需要更多的試驗來證實。

3.3.2 不同品種山羊感染的艾美耳球蟲蟲種差異

綜合本研究和其他研究結果，不同地域山羊的優勢艾美耳球蟲種共有11種，常見的種類有阿氏、艾麗、克氏艾美耳球蟲，但其中無一為所有山羊都感染的種類，說明不同地域和山羊品種間感染艾美耳球蟲種類差異可能與其地勢、氣候和降雨量等差異有關，除此之外，也可能受飼料搭配和用藥情況等多種因素影響[6，9，23-24]。蔣維東等[25]的報道顯示，綿羊感染的球蟲種類存在地理分布差異，但同一飼養條件和環境中，不同品種綿羊球蟲感染種類分布差異不大。目前需要做進一步分子流行病學調查和動物感染試驗，來揭示羊與不同種類球蟲之間是否存在宿主-球蟲的特異性和抗性關系。

3.4 不同性別羊腸道寄生蟲感染情況

本次調查顯示，母羊羊腸道寄生蟲總感染率為88.52%(239/270)，公羊為63.64%(35/55)，差異極顯著。母羊球蟲感染率為77.78%(210/270)，公羊為30.91%(17/55)，差異極顯著。景紀春等[10]報道，湖羊母羊和公羊的寄生蟲總感染率分別為97.44%和97.52%，二者無顯著差異。Mohamaden等[26]報道，埃及蘇伊士地區球蟲感染率雌性羊為65.22%(105/161)，雄性羊為47.5%(57/120)，差異極顯著。這與本次結果相一致，顯示了公羊對球蟲具有更強的抵抗力。公母羊線蟲的感染率沒有顯著差異，但雄性感染率略低于雌性，這與Haile等[2]的報道一致。但也有研究認為，母羊比公羊對線蟲更有更強的抵抗力[27]。線蟲感染與羊的性別是否存在相關性還需進一步研究確認。絳蟲感染率在雌雄間差異顯著，但目前相關報道較少。阿米巴感染率在雌雄間無顯著差異。

4 總結

總之，本次研究發現我國羊腸道寄生蟲感染率高，混合感染情況普遍，這與國外羊腸道寄生蟲感染情況相一致。腸道寄生蟲的流行給羊養殖業帶來重大的潛在經濟損失，是養殖場需要關注和亟待解決的問題。本調查結果為羊場腸道寄生蟲的精準防控提供了基礎數據。