犬瘟熱病毒YD株的分離鑒定及其H基因序列分析

張建普，馬麗利，周利鋒*

(1.河南省偃師市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所,河南 偃師 471900;2.上海啟盛生物科技有限公司，上海 201203)

犬瘟熱(canine distemper，CD)是由犬瘟熱病毒(canine distemper virus，CDV)引起的急性、高度接觸性傳染病。CDV屬于副黏病毒科、麻疹病毒屬，宿主范圍廣，可感染犬科、鼬科、浣熊科及多種野生動(dòng)物，主要侵害易感動(dòng)物的呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)，是當(dāng)前養(yǎng)犬業(yè)和毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)危害最大的病原之一[1]。19世紀(jì)60年代以來(lái)，CDV弱毒疫苗的使用使該病得到了控制，但是近年來(lái)，世界各地相繼出現(xiàn)了犬瘟熱的暴發(fā)[2-6]。隨著毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)和寵物產(chǎn)業(yè)在我國(guó)的不斷發(fā)展，犬瘟熱在各地毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)和寵物養(yǎng)殖場(chǎng)也常有發(fā)生，給我國(guó)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)造成了經(jīng)濟(jì)損失。CDV是單股負(fù)鏈RNA病毒，基因組全長(zhǎng)15 690 nt，編碼核衣殼蛋白(N)、磷蛋白(P)、基質(zhì)膜蛋白(M)、融合蛋白(F)、血凝素蛋白(H)、大蛋白(L)蛋白。其中H蛋白是CDV囊膜糖蛋白，對(duì)病毒本身和宿主都非常關(guān)鍵。病毒感染的起始階段需要借助H蛋白和宿主細(xì)胞受體結(jié)合來(lái)吸附于宿主細(xì)胞上；宿主針對(duì)H蛋白產(chǎn)生的保護(hù)性免疫反應(yīng)可以阻止CDV的感染[7]。另外，H基因在6個(gè)基因中變異率最高，因此成為研究CDV變異情況的主要目的基因[8]。本試驗(yàn)從江蘇疑似犬瘟熱病犬的脾、肺和腸系膜淋巴結(jié)混合病料中成功分離了1株病毒，經(jīng)鑒定該病毒為CDV強(qiáng)毒株，并對(duì)其H基因全長(zhǎng)序列進(jìn)行了分析。

1 材料與方法

1.1 病料

江蘇某動(dòng)物醫(yī)院疑似犬瘟熱病犬，采集其脾、肺和淋巴結(jié)。

1.2 細(xì)胞及主要試劑

表達(dá)犬淋巴細(xì)胞信號(hào)活性分子(SLAM，CD150)的Vero-SLAM細(xì)胞系由本實(shí)驗(yàn)室保存。……