新型鴨呼腸孤病毒卵黃抗體被動免疫持續期試驗

李 倩，陳丕坤，宋 揚

（哈藥集團生物疫苗有限公司，哈爾濱 150069）

新型鴨呼腸孤病毒（Novel duck reovirus，NDRV）病又稱鴨壞死性肝炎。NDRV在血清學上完全不同于之前的番鴨呼腸孤病毒，造成鴨一種以肝臟不規則壞死、出血斑/點和心肌出血為主要特征的傳染性疾病[1]，番鴨、半番鴨、麻鴨和北京鴨等均可發病，發病無明顯季節性，發病鴨一般為3～25 日齡，鴨的日齡愈小，發病率和死亡率愈高[2]。NDRV的感染嚴重損害鴨的免疫器官，造成免疫抑制，導致其他傳染病的繼發[3]。鴨呼腸孤病毒病最先于2005 年在我國的福建、浙江和廣東等地鴨群中出現和流行，后蔓延至全國，近年來由于該病的肆虐給我國養鴨業造成較大的經濟損失，現地急需有效疫苗或抗體對該病進行防控。為了控制該病的發生，使用卵黃抗體做緊急預防接種有較大的實踐意義。但使用卵黃抗體時，卵黃抗體在機體內的被動免疫期是決定卵黃抗體免疫程序的決定性因素。為此，本試驗對哈藥集團生物疫苗有限公司試制的新型鴨呼腸孤病毒卵黃抗體進行雛鴨接種后不同時間攻毒與抗體保護效果的相關性研究，以確定新型鴨呼腸孤病毒卵黃抗體在雛鴨體內的被動免疫持續期。

1 材料

1.1 卵黃抗體

新型鴨呼腸孤病毒卵黃抗體，由哈藥集團生物疫苗有限公司試制，批號分別為202001、202002、202003。

1.2 檢驗用強毒

新型鴨呼腸孤病毒檢驗用強毒，由哈藥集團生物疫苗有限公司制備、鑒定、保管和供應，批號為20202，病毒含量為107.17TCID50/0.1 mL，規格為2.0 mL·瓶-1。

1.3 易感雛鴨

1日齡健康雛鴨，購自海城市凱丹畜禽養殖專業合作社。

2 方法

選取1日齡易感雛鴨40只作為抗體試驗組，于頸部皮下注射卵黃抗體，1.0 mL·只-1；同時設同批次同日齡易感雛鴨各40 只作為攻毒對照組，肌肉注射生理鹽水，1.0 mL·只-1；取同批次同日齡易感雛鴨10只，不注射任何藥品作為健康對照組。在抗體注射后1、3、5、7 d 分別從抗體試驗組和攻毒對照組雛鴨中隨機抽取10 只，肌肉注射新型鴨呼腸孤病毒攻毒，0.1 mL·只-（1含106.0TCID50），各組鴨同條件下隔離飼養觀察10 d。觀察期結束后剖殺全部雛鴨檢查肝臟和脾臟病變情況，以攻毒對照組至少80%雛鴨出現呼腸孤病毒感染導致的肝臟或脾臟有典型壞死癥狀為試驗成立，計算抗體保護率[抗體保護率=（總數-發病數）/總數]。共計進行3 批抗體試驗。

3 結果與分析

1日齡易感雛鴨注射卵黃抗體后不同時間攻擊新型鴨呼腸孤病毒強毒，攻毒后觀察10 d。卵黃抗體對雛鴨的攻毒保護情況見表1～2。

表1 新型鴨呼腸孤病毒卵黃抗體被動免疫持續期試驗結果

表2 新型鴨呼腸孤病毒卵黃抗體被動免疫持續期試驗統計結果

由表1～2 可知，3 批卵黃抗體注射的1 日齡易感雛鴨，注射后1～5 d，抗體對雛鴨的保護率為93.3%～100%；注射后7 d的攻毒保護率為53.3%；各時間點攻毒對照組鴨均90%～100%發病。

剖檢抗體試驗組及攻毒對照組發病雛鴨，可見肝臟和脾臟均呈典型的壞死及出血性病理變化；抗體試驗組存活雛鴨剖檢無病理變化；健康對照組雛鴨均100%健活，剖檢無病理變化。

4 討 論

卵黃抗體注射動物機體后，抗體在體內能持續存在一段時間，并產生被動免疫保護作用。本試驗用哈藥集團生物疫苗有限公司制備的新型鴨呼腸孤病毒卵黃抗體注射雛鴨，并于注射后不同時間注射新型鴨呼腸孤病毒強毒，觀察卵黃抗體對雛鴨的保護效果，從而確定卵黃抗體的被動免疫持續期。試驗結果顯示，接種抗體后1～5 d，抗體對1日齡雛鴨的攻毒保護率均在90%以上；注射后第7天的攻毒保護率為53.3%；各時間點攻毒對照組雛鴨90%～100%發病，剖檢抗體試驗組及攻毒對照組發病雛鴨，發現肝臟和脾臟均呈典型的壞死及出血性病理變化；抗體試驗組存活雛鴨剖檢無病理變化；健康對照組雛鴨均100%健活，剖檢無病理變化。試驗結果表明，注射卵黃抗體后5 d，抗體仍能對雛鴨產生良好地保護作用，而7 d后抗體保護作用大幅減弱。

5 結 論

哈藥集團生物疫苗有限公司制備的新型鴨呼腸孤病毒卵黃抗體被動免疫保護期為5 d。