王小城,周 衛(wèi),林顯明,陳嘉財(cái),張新節(jié)
(湛江國(guó)聯(lián)飼料有限公司,廣東 湛江 524000)
塘鲺魚(yú)學(xué)名胡子鯰,是中國(guó)長(zhǎng)江以南的可人工養(yǎng)殖的淡水魚(yú)類,屬雜食性偏肉食,由于塘鲺魚(yú)肉味鮮美,且在中醫(yī)藥上有一定的功效,因此作為養(yǎng)殖對(duì)象具有很重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值[1]。脂肪是魚(yú)類生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)素,不僅能供應(yīng)機(jī)體生長(zhǎng)所需的能量、必需脂肪酸,還是各組織修補(bǔ)及新組織生長(zhǎng)所需原料。脂肪同時(shí)是脂溶性維生素在體內(nèi)運(yùn)輸和吸收的溶解介質(zhì),是合成某些激素和維生素所需原料[2],且具有節(jié)約飼料蛋白質(zhì)等重要作用[3]。根據(jù)動(dòng)物種類、年齡、營(yíng)養(yǎng)狀況等不同情況,脂質(zhì)可占到體重的1%~50%。飼料中脂肪或必需脂肪酸不足會(huì)影響到魚(yú)類的正常生長(zhǎng),甚至也會(huì)引發(fā)一些代謝性疾病,但飼料中脂肪水平過(guò)高則會(huì)導(dǎo)致魚(yú)類肝臟脂肪的沉積過(guò)量,從而引起生長(zhǎng)緩慢,影響肌肉品質(zhì),甚至降低抗病及抗應(yīng)激能力。魚(yú)類所需的飼料脂肪水平與魚(yú)的種類、生長(zhǎng)階段、飼料組成成分、其他營(yíng)養(yǎng)素水平、生長(zhǎng)環(huán)境等密切相關(guān)[4]。由于塘鲺魚(yú)養(yǎng)殖范圍、消費(fèi)范圍、市場(chǎng)容量均有限,因此相關(guān)的報(bào)道較少,而兩廣地區(qū)是塘鲺魚(yú)的主產(chǎn)區(qū),急需探討塘鲺魚(yú)的營(yíng)養(yǎng)需求,本文旨在探討飼料中脂肪水平對(duì)塘鲺魚(yú)生長(zhǎng)性能、體成分及血清生化指標(biāo)的影響,評(píng)估飼料中脂肪最適添加量,為后續(xù)開(kāi)發(fā)塘鲺魚(yú)高效環(huán)保配合飼料提供理論依據(jù)。
試驗(yàn)所用塘鲺魚(yú)苗來(lái)自茂名市高州國(guó)營(yíng)淡水魚(yú)苗養(yǎng)殖場(chǎng),標(biāo)粗及養(yǎng)殖試驗(yàn)均在湛江國(guó)聯(lián)飼料有限公司科研中心進(jìn)行。
選取600 尾健康活躍、個(gè)體均勻、體重為(31.12±0.1)g 的塘鲺魚(yú),隨機(jī)分為5 組,每組3 個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)(1個(gè)養(yǎng)殖桶)40尾魚(yú),分別投喂脂肪添加水平為0、2%、4%、6%和8%的等氮試驗(yàn)飼料,即0添加組、2%添加組、4%添加組、6%添加組、8%添加組。試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。
養(yǎng)殖桶為400 L 的藍(lán)色無(wú)毒FRP 特種玻璃鋼纖維桶。試驗(yàn)開(kāi)始后定時(shí)定點(diǎn)投喂,2 次·d-1,投喂3 輪·次-1,飽食投喂,日投餌率為魚(yú)體重的6%~8%,具體投喂量根據(jù)魚(yú)攝食情況進(jìn)行調(diào)整。養(yǎng)殖試驗(yàn)期間開(kāi)啟循環(huán)水,每個(gè)循環(huán)系統(tǒng)均含有不同的5 組試驗(yàn)魚(yú),每天記錄投料量,每周徹底換水1 次,養(yǎng)殖桶水溫為25~30 ℃,pH 為 7.2~7.6,氨氮<0.1 mg·L-1,亞硝酸鹽<0.02 mg·L-1,溶氧量>5 mg·L-1,養(yǎng)殖周期為8周。

表1 試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平
1.3.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo)
養(yǎng)殖結(jié)束后禁食24 h,分別撈取各養(yǎng)殖桶試驗(yàn)魚(yú),記錄每桶魚(yú)的尾數(shù)和總重量;每桶隨機(jī)選取6 尾,稱量體重、測(cè)量體長(zhǎng),并迅速解剖,取內(nèi)臟并分離肝臟,分別稱重,剝離腸道并測(cè)量腸道長(zhǎng)度,用于計(jì)算成活率、料肉比、增重率、肥滿度、臟體比、肝體比。
1.3.2 體成分
試驗(yàn)結(jié)束后從每個(gè)養(yǎng)殖桶隨機(jī)選取4 尾全魚(yú)、6 尾魚(yú)的肝臟、6 尾魚(yú)背部肌肉(每尾肌肉約20 g)分別裝入自封袋并做好記錄,-20 ℃保存送回實(shí)驗(yàn)室。按照國(guó)標(biāo)法測(cè)定全魚(yú)的水分、脂肪、蛋白和灰分含量以及肌肉和肝臟的脂肪和水分含量。
1.3.3 血清生化指標(biāo)
試驗(yàn)結(jié)束后,從每個(gè)養(yǎng)殖桶中隨機(jī)抽取6尾魚(yú),使用一次性注射器從塘鲺魚(yú)尾靜脈處采血,置于10 mL離心管中,室溫下靜置30 min,4 000 r·min-1離心10 min,收集血清液,分裝于1.5 mL EP 管中并做好標(biāo)記,-20 ℃保存,備用。
采用全自動(dòng)血液生化指標(biāo)測(cè)試儀測(cè)定生化指標(biāo),BS-190 型全自動(dòng)生化分析儀為深圳邁瑞公司產(chǎn)品;使用試劑為深圳邁瑞全自動(dòng)生化分析儀相配套試劑盒[5],生化指標(biāo)檢測(cè)在中國(guó)科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所完成。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 19.0 軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA),Duncan’s 法進(jìn)行組間多重比較,P<0.05表示差異顯著,試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。
由表2可知,飼料不同脂肪水平對(duì)塘鲺魚(yú)的生長(zhǎng)性能和形態(tài)指標(biāo)均無(wú)顯著差異(P>0.05),2%添加組具有較高的終末體重以及增重率,4%添加組具有最大的成活率。隨著脂肪水平的增加,料肉比和肥滿度逐漸降低,而臟體比和肝體比逐漸上升,但均未達(dá)到顯著水平(P>0.05)。
由表3可知,飼料中脂肪水平不影響塘鲺魚(yú)全魚(yú)的水分和灰分含量(P>0.05),而與0 添加組相比,4%、6%和8%添加組的粗蛋白含量顯著降低(P<0.05),6%和8%添加組的粗脂肪含量顯著升高(P<0.05),8%添加組粗脂肪含量還顯著高于2%和4%添加組(P<0.05)。
由表4可知,飼料脂肪水平對(duì)塘鲺魚(yú)肌肉及肝臟的水分和粗脂肪含量無(wú)顯著差異(P>0.05)。
塘鲺魚(yú)血清生化指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表5。

表2 塘鲺魚(yú)生長(zhǎng)性能、形態(tài)指標(biāo)測(cè)定結(jié)果

表3 塘鲺魚(yú)體成分的測(cè)定結(jié)果 %

表4 塘鲺魚(yú)肌肉和肝臟中水分和脂肪含量 %

表5 塘鲺魚(yú)血清生化指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果
由表5可知,飼料中脂肪水平對(duì)塘鲺魚(yú)血清中葡萄糖、膽固醇、低密度脂蛋白和脂肪酶含量無(wú)顯著影響(P>0.05)。與0添加組相比,8%添加組的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶顯著降低(P<0.05),6%添加組和8%添加組的天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和高密度脂蛋白亦顯著降低(P<0.05),2%添加組的堿性磷酸酶顯著降低(P<0.05),而8%添加組的三酰甘油含量顯著升高(P<0.05),其他各組間均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
脂肪是維持魚(yú)體生命活動(dòng)的必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和重要能量物質(zhì),是影響魚(yú)類組織發(fā)育的重要因素之一[6],飼料中脂肪水平過(guò)低會(huì)抑制魚(yú)類的生長(zhǎng),如王立改等[7]研究表明,與9%和13%的飼料脂肪水平相比,飼料中9%的脂肪水平過(guò)低,會(huì)降低黃姑魚(yú)的增重率和特定生長(zhǎng)率。適當(dāng)提高飼料的脂肪水平能夠有效地促進(jìn)魚(yú)類的生長(zhǎng)、降低餌料系數(shù),陳云飛[8]研究指出提高飼料中的脂肪水平能顯著提高草魚(yú)的增重率和特定生長(zhǎng)率。大量研究表明,隨著飼料中脂肪水平的升高,魚(yú)類的增重率和特定生長(zhǎng)率出現(xiàn)先升高后下降的呈拋物線變化趨勢(shì),如梭魚(yú)[9]、白甲魚(yú)[10]、江黃顙魚(yú)幼魚(yú)[11]、紅白錦鯉[12]、異育銀鯽[13]、羅非魚(yú)[14]、斑石鯛幼魚(yú)[15]、黃鱔[16]等,均提示飼料中適當(dāng)?shù)闹舅侥芴岣唪~(yú)類的生長(zhǎng),過(guò)高或過(guò)低的脂肪水平均不利于魚(yú)類的生長(zhǎng)。在本試驗(yàn)中,飼料中脂肪水平對(duì)塘鲺魚(yú)的成活率、料肉比、增重率均無(wú)顯著影響,隨著飼料脂肪水平的增加,料肉比呈現(xiàn)出逐漸下降的趨勢(shì),臟體比和肝體比呈逐漸上升的趨勢(shì),且在2%脂肪水平時(shí),塘鲺魚(yú)具有較高的終體重和增重率,提示飼料脂肪水平為2%時(shí)塘鲺魚(yú)具有最大的增重率和特定生長(zhǎng)率,這與上述的研究結(jié)果基本一致。但也有研究指出脂肪水平不影響魚(yú)類的增重和蛋白質(zhì)利用率[17],這可能是與飼料的組成如蛋白質(zhì)、碳水化合物水平或種類有關(guān)[18],也有可能受魚(yú)的種類、生長(zhǎng)階段、養(yǎng)殖環(huán)境等影響而不同。
魚(yú)類對(duì)脂肪的利用能力有限,飼料中脂肪過(guò)高會(huì)造成魚(yú)體多個(gè)組織的脂肪沉積[19],在本試驗(yàn)中,隨著飼料脂肪水平的升高,塘鲺魚(yú)的肝體比和臟體比均逐漸升高,李雪菲等[20]對(duì)美國(guó)紅魚(yú)的研究得到了類似的結(jié)論,提示飼料脂肪水平在一定程度上會(huì)影響塘鲺魚(yú)魚(yú)體形態(tài)。
魚(yú)類體成分受飼料成分的影響[21],且魚(yú)體蛋白質(zhì)含量可作為魚(yú)類生長(zhǎng)的一個(gè)最重要的標(biāo)志[22]。有研究表明,飼料中脂肪水平的增加會(huì)降低全魚(yú)蛋白質(zhì)含量,如淡水黑鯛[23]、春鯉魚(yú)[24]、黑尾近紅鲌魚(yú)[25]等。在本試驗(yàn)中,4%、6%和8%脂肪添加量的塘鲺魚(yú)全魚(yú)的蛋白質(zhì)含量顯著降低。但也有研究指出魚(yú)體蛋白質(zhì)含量隨著飼料中脂肪含量的增加而呈現(xiàn)先上升后降的現(xiàn)象[10],這提示提高飼料中脂肪水平在一定程度上影響魚(yú)類蛋白質(zhì)的沉積甚至抑制生長(zhǎng)。本試驗(yàn)數(shù)據(jù)還表明飼料中添加6%和8%的脂肪會(huì)顯著提高塘鲺魚(yú)全魚(yú)粗脂肪的含量,已有大量研究表明梭魚(yú)、點(diǎn)籃子魚(yú)、淡水黑鯛、春鯉魚(yú)等多種魚(yú)類魚(yú)體的脂肪含量會(huì)隨著飼料脂肪水平的增加而增加[23-24,26-28],這是因?yàn)轸~(yú)類從飼料中獲得的脂肪會(huì)經(jīng)過(guò)同化作用后沉積為體脂,因此體脂沉積量與飼料脂肪水平呈正相關(guān)。本試驗(yàn)還提示了隨著飼料脂肪水平的增加,塘鲺魚(yú)的肝臟和肌肉中的脂肪水平不受影響。其他研究也表明飼料脂肪水平不影響肌肉脂肪的沉積[9,26],但也有研究表明飼料脂肪會(huì)增加肌肉中脂肪含量[27],能顯著提高大多數(shù)魚(yú)類肝臟中脂肪含量[26],這可能是因魚(yú)的品類不同而異,或者與添加的油脂種類有關(guān)。
魚(yú)類血清生化指標(biāo)被用來(lái)評(píng)價(jià)魚(yú)類營(yíng)養(yǎng)健康及適應(yīng)環(huán)境的狀況[29]。魚(yú)體在正常情況下,天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶含量較低,只有在肝臟遭受破壞或者損傷時(shí),其血清天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性會(huì)增強(qiáng)[30],因此天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶是判斷魚(yú)體肝臟是否損傷的重要指標(biāo)[21]。趙巧娥等[31]研究表明,鳡幼魚(yú)的血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活力隨著飼料脂肪水平上升而升高,其他研究者在團(tuán)頭魴[32]、白甲魚(yú)[10]、錦鯉幼魚(yú)[12]上的研究均得到類似的結(jié)論,這說(shuō)明飼料脂肪水平的逐漸升高會(huì)導(dǎo)致一些魚(yú)類的肝臟細(xì)胞組織發(fā)生一定的生理病變。本試驗(yàn)的結(jié)果顯示塘鲺魚(yú)血清中的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶含量隨著飼料脂肪水平的升高而逐漸降低,其原因還需要進(jìn)一步試驗(yàn)分析。堿性磷酸酶是一種磷酸單酯水解酶,可直接參與動(dòng)物體內(nèi)磷酸基團(tuán)的轉(zhuǎn)移和代謝,與機(jī)體的鈣磷、蛋白質(zhì)、脂肪等代謝有關(guān)[33],且受到機(jī)體養(yǎng)殖環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)狀況、健康情況和生長(zhǎng)階段等的影響[34]。當(dāng)動(dòng)物的肝臟發(fā)生病變時(shí),血清中堿性磷酸酶的活性會(huì)顯著升高[35]。有研究表明大口黑鱸、白甲魚(yú)幼魚(yú)的堿性磷酸酶活性隨著飼料脂肪水平的升高而升高[10,36],這提示飼料脂肪水平過(guò)高可能會(huì)導(dǎo)致魚(yú)類出現(xiàn)脂肪肝等病變。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,2%添加量的塘鲺魚(yú)堿性磷酸酶水平顯著降低,而其他組無(wú)顯著差異,無(wú)明顯的變化規(guī)律。魚(yú)類血清中三酰甘油含量能反映機(jī)體利用儲(chǔ)存脂肪的能力[37],Ding L.Y.等[38]提出三酰甘油含量的升高意味著動(dòng)物內(nèi)生脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)活躍,是脂肪運(yùn)輸系統(tǒng)對(duì)高脂飼料的應(yīng)答。劉迎隆等[39]對(duì)軍曹魚(yú)的研究結(jié)果顯示血清中的三酰甘油含量隨著飼料脂肪水平的增高而增高,與本式驗(yàn)結(jié)果一致,說(shuō)明飼料中脂肪能提高塘鲺魚(yú)內(nèi)生脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)能力。然而施兆鴻等[40]研究表明,隨飼料脂肪水平的升高褐菖鲉血清中的三酰甘油含量呈下降趨勢(shì),血清中三酰甘油減少意味著三酰甘油轉(zhuǎn)運(yùn)出肝臟受阻,說(shuō)明魚(yú)體肝細(xì)胞或者肝功能受到破壞[41]。高密度脂蛋白的主要作用是將各組織的膽固醇送回肝臟進(jìn)行代謝,臨床上認(rèn)為高密度脂蛋白升高具有積極作用,本試驗(yàn)中塘鲺魚(yú)血清高密度脂蛋白的含量隨著飼料脂肪水平的升高而顯著減少,這可能是因?yàn)楦呙芏戎鞍子欣跈C(jī)體膽固醇的轉(zhuǎn)運(yùn)和清除,而當(dāng)飼料脂肪水平過(guò)高時(shí),肝功能受阻,合成和分泌蛋白質(zhì)的能力不能滿足轉(zhuǎn)運(yùn)膽固醇的需求就會(huì)導(dǎo)致血液中膽固醇含量增加,而高密度脂蛋白膽固醇含量不再上升甚至下降[42]。
由于目前對(duì)塘鲺魚(yú)的探究較少,缺乏相關(guān)的參考資料,在后續(xù)的研究中將會(huì)繼續(xù)探討其他營(yíng)養(yǎng)素的需求以及關(guān)聯(lián)作用,比如蛋白質(zhì)、碳水化合物的需求以及蛋能比,為開(kāi)發(fā)塘鲺魚(yú)高效飼料做理論鋪墊。
通過(guò)本試驗(yàn)可以得到以下結(jié)論:1)飼料中添加0~8%的脂肪對(duì)塘鲺魚(yú)生長(zhǎng)性能影響不顯著,以2%添加量的增重率最大;2)隨著飼料中脂肪量的增加,全魚(yú)脂肪含量顯著增加,蛋白質(zhì)含量顯著降低;3)飼料脂肪水平會(huì)影響塘鲺魚(yú)的脂肪代謝、沉積以及肝臟健康。
綜上所述,推薦在塘鲺魚(yú)飼料中外源油脂(豆油∶魚(yú)油∶磷脂油=2∶1∶1)的添加量為2%,即飼料脂肪終水平為6.52%。