貴陽地區規?；i場主要疫病免疫效果評估

張 海，藺俐仲，鄧珊珊，徐春志，袁 林，楊 源，劉 艷，李照偉

（1.貴陽市動物疫病預防控制中心，貴州 貴陽 550081；2.貴陽市草地站，貴州 貴陽 550081；3.貴陽市清鎮市農業農村局，貴州 貴陽 551400；4.貴陽市息烽縣農業農村局，貴州 貴陽 550300；5.貴州省動物疫病預防控制中心，貴州 貴陽 550081）

隨著生豬養殖規?；牟粩喟l展，在生豬養殖生產過程中影響豬群生長的疾病因素主要分為病毒性、細菌性和寄生蟲，其中病毒性動物疫病最為常見且影響最大。在病毒性疾病中豬瘟、豬口蹄疫、豬藍耳病、豬偽狂犬病已經成為規模化豬場重點防控的動物疫病。口蹄疫（FMD）主要感染牛、豬等偶蹄類動物，感染后的典型臨床特征為口舌黏膜、蹄部皮膚形成水皰、糜爛或潰瘍病灶，傳播迅速、發病率高，可引起幼畜死亡、成年畜生產性能下降[1]。被世界動物衛生組織列為A類傳染病動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。豬瘟（CSF）是由豬瘟病毒（CSFV）引起的一種急性、熱性、高度接觸性的傳染病，也被稱為“爛腸瘟”[2]。世界動物衛生組織將其定為A類傳染病，我國將其列為一類動物傳染病。豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起豬以繁殖障礙為主的動物傳染病，也稱為豬藍耳病，我國將其列為二類動物傳染病[3]。豬偽狂犬病（PR）是由豬偽狂犬病病毒（PRV）引起的多種家畜和野生動物以發熱、奇癢（豬除外）及腦脊髓炎為主要癥狀的一種急性傳染病[4]。世界動物衛生組織將其定為B類傳染病，我國將其列為二類動物傳染病。

本試驗通過ELISA（酶聯免疫吸附試驗）方法，對貴陽市6個規模化豬場采集的576份血清樣本，進行豬瘟病毒、豬藍耳病病毒、豬偽狂犬病病毒gE蛋白、豬偽狂犬病病毒gB蛋白、豬O型口蹄疫病毒和豬A型口蹄疫病毒免疫抗體檢測。旨在了解貴陽地區動物疫病的免疫效果，以期為貴陽市規?；i場防控策略的制定提供參考數據。

1 材料與方法

1.1 血清樣本

于2019年6—12月采集貴陽市6個規?；i場豬血清樣本576份病料。將6個規模化豬場依次編號為A～F，分別采集血清樣本326份、40份、65份、30份、25份、90份。

1.2 免疫程序

豬瘟：仔豬28日齡首免，35、56日齡分別免疫1次，頸部肌肉注射，1頭份/次；母豬每年4月、8月、12月15日各免疫1次，頸部肌肉注射，免疫劑量均為1頭份/次。豬藍耳?。鹤胸i15日齡（活疫苗）首免、35日齡（滅活苗）二免，1頭份/次；母豬妊娠50 d后進行聯合免疫，活疫苗2頭份，滅活苗2 mL，母豬產后14 d（活疫苗）二免，免疫劑量為2頭份。偽狂犬病：仔豬65日齡活疫苗免疫1頭份；母豬妊娠30 d（活疫苗）、90 d（滅活苗）各免疫1次，免疫劑量活疫苗為1頭份/次，2 mL/次?？谔阋撸鹤胸i50日齡疫苗（滅活苗）1 mL、70日齡疫苗（滅活苗）2 mL；母豬每年3月、6月、9月、12月各免疫1次滅活苗，免疫劑量均為2 mL/次。

1.3 檢測試劑盒

豬O型口蹄疫病毒血清抗體ELISA檢測試劑盒（液相阻斷）、豬A型口蹄疫病毒血清抗體ELISA檢測試劑盒（液相阻斷）購自深圳市康百得生物科技有限公司；豬瘟病毒、豬藍耳病病毒、豬偽狂犬病病毒gB蛋白、豬偽狂犬病病毒gE蛋白血清抗體ELISA檢測試劑盒均購自無錫優聯生物技術有限公司。

1.4 血清抗體檢測及結果判斷

豬群為150日齡到200日齡的后備母豬，在相應豬場疫苗免疫28 d后，無菌采集凝集血，分離血清。采用血清抗體ELISA檢測試劑盒對A～F號豬場共576份血清樣本進行豬瘟病毒和豬藍耳病病毒抗體檢測，對B、C、D號豬場135份血清樣本進行豬O型口蹄疫病毒抗體檢測，對B、C號豬場105份血清樣本進行豬A型口蹄疫病毒抗體檢測，對A、C、E號豬場的416份血清樣本進行豬偽狂犬病病毒gB蛋白抗體檢測，對A、B、C、E、F號豬場的546份血清樣本進行豬偽狂犬病病毒gE蛋白抗體檢測。檢測結果判斷參照試劑盒說明書進行判斷血清樣本的陰、陽性。

1.5 數據統計與分析

運用SPSS軟件和Excel軟件對血清抗體的檢測結果進行統計和分析，計算樣本的陰、陽性和離散度，離散度等于標準差（STDEV）比上平均數（AVERAGE）。

2 結果與分析

2.1 不同豬場豬瘟抗體的檢測

從貴陽市6個規?；i場共采集576份血清樣本，采用ELISA進行檢測豬瘟病毒血清抗體，結果見表1。

表1 不同豬場豬瘟病毒抗體ELISA檢測結果

由表1可知，6個規模化豬場豬瘟抗體的平均抗體陽性率為94.62%，豬場A、B、C、D的抗體陽性率大于平均抗體陽性率，豬場E和F的抗體陽性率低于平均抗體陽性率，其中豬場E的抗體陽性率遠低于農業農村部要求的70%。豬場A和C的抗體離散度相對較大，免疫水平相對不整齊。

2.2 不同豬場豬藍耳病抗體的檢測

從貴陽市6個規模化豬場共采集576份血清樣本，采用ELISA進行檢測豬藍耳病病毒血清抗體，結果見表2。

表2 不同豬場豬藍耳病病毒抗體ELISA檢測結果

由表2可知，6個規模化豬場豬藍耳病抗體的平均抗體陽性率為86.46%，豬場A、C、D的抗體陽性率大于平均抗體陽性率，豬場B、E、F的抗體陽性率低于平均抗體陽性率，其中豬場E、F的抗體陽性率低于農業農村部要求的70%。豬場B、D、F的抗體離散度相對較小，免疫水平相對比較整齊。

2.3 不同豬場豬偽狂犬病病毒gE抗體的檢測

從貴陽市5個規?；i場共采集546份血清樣本，采用ELISA進行檢測豬偽狂犬病病毒gE蛋白血清抗體，結果見表3。

表3 不同豬場豬偽狂犬病病毒gE抗體ELISA檢測結果

由表3可知，在對5個規?；i場豬偽狂犬病病毒gE抗體的檢測中，豬場B出現了27份陽性樣本，陽性率為67.50%（27/40）；豬場C出現了13份陽性樣本，陽性率為20.00%（13/65）；豬場F出現了4份陽性樣本，陽性率為4.44%（4/90）。豬場A、E未檢測出血清抗體陽性樣本。

2.4 不同豬場豬偽狂犬病病毒gB抗體的檢測

從貴陽市3個規?；i場共采集416份血清樣本，采用ELISA進行檢測豬偽狂犬病病毒gB血清抗體，結果見表4。

表4 不同豬場豬偽狂犬病病毒gB抗體ELISA檢測結果

由表4可知，豬場A、C、E的豬偽狂犬病病毒gB血清抗體均大于農業農村部要求的70%的抗體陽性率，其中豬場C的抗體合格率最高達到了100%（65/65），其次是豬場A抗體合格率為99.69%（325/326），最低的是豬場E抗體合格率為76.00%（19/25）。

2.5 不同豬場豬O型口蹄疫抗體的檢測

從貴陽市3個規?；i場共采集135份血清樣本，采用ELISA進行檢測豬O型口蹄疫血清抗體，結果見表5。

表5 不同豬場豬O型口蹄疫抗體ELISA檢測結果

由表5可知，對來自豬場B、C、D的135份血清樣本進行豬O型口蹄疫抗體檢測，豬場B和豬場C的抗體陽性率分別為97.50%（39/40）和100%（65/65），均大于農業農村部要求的70%的抗體陽性率；其中豬場D的抗體陽性率為66.67%（20/30）未達到農業農村部要求的70%的抗體陽性率。豬場B和豬場C的抗體陽性率均達到了95%以上且離散度相對比較低，整體免疫情況較好。

2.6 不同豬場豬A型口蹄疫抗體的檢測

從貴陽市2個規?；i場共采集105份血清樣本，采用ELISA進行檢測豬A型口蹄疫血清抗體，結果見表6。

表6 不同豬場豬A型口蹄疫抗體ELISA檢測結果

由表6可知，對來自豬場B、C的105份血清樣本進行豬A型口蹄疫抗體檢測，豬場B和豬場C的抗體陽性率分別為92.50%（37/40）和100%（65/65），均大于農業農村部要求的70%的抗體陽性率。

3 討論

本研究對貴陽市部分地區6個規?；i場進行了豬瘟病毒、豬藍耳病病毒、豬偽狂犬病病毒gB蛋白、豬O型口蹄疫病毒和豬A型口蹄疫病毒免疫抗體和豬偽狂犬病病毒gE蛋白感染抗體調查，結果顯示免疫抗體陽性率分別為94.62%、86.46%、98.32%、91.85%和97.14%，感染偽狂犬病gE抗體陽性率為8.06%。說明貴陽市規?；i場豬瘟、豬藍耳病、豬偽狂犬病、豬O型口蹄疫和豬A型口蹄疫免疫抗體總體水平比較高，但是仍然有個別養殖場存在豬瘟、豬藍耳病和豬O型口蹄疫免疫不合格，部分豬場存在豬偽狂犬病野毒感染的情況。

豬口蹄疫是我國強制免疫的病種，各級政府和動物防疫部門對該病都非常的重視。祖立闖等[5]統計了2007—2017年中國知網中發表的54篇針對我國不同地區的免疫抗體監測文獻，其中有47篇文獻報道的豬口蹄疫免疫抗體合格率≥70%，即有87.04%（47/54）的文獻報道達到了國家強制免疫方案的要求，甚至有部分地區的免疫抗體合格率達到了95.0%，表明我國豬口蹄疫疫苗免疫狀況整體較好。呂翠等[6]對2017年來源于全國25個?。ㄊ校?，448個豬場共13 449份血清進行了主要動物疫病的抗體檢測，其中豬瘟抗體平均抗體合格率為80.3%，偽狂犬病野毒平均帶毒率33.44%，偽狂犬病gB抗體平均合格率為92.86%，豬藍耳病平均抗體合格率為78.05%。從以上數據并結合本試驗的抗體檢測結果，分析可知豬口蹄疫、豬瘟、豬藍耳病、豬偽狂犬病的總體免疫水平都達到了國家農業農村部的要求，但是豬偽狂犬病野毒感染仍然很嚴峻，需要引起動物防疫部門和養殖場的高度重視，做好相關防控工作。

自2017年來，豬瘟和豬高致病性藍耳病退出國家強制免疫病種，貴陽市根據區域動物疫病防控的實際情況，仍然將豬瘟列為強制免疫的動物疫病[7]。豬口蹄疫、豬瘟、豬藍耳病、豬偽狂犬病對養豬業的影響非常大，尤其是在生豬養殖高度密集的規模化豬場，豬只一旦發病后果極為嚴重。豬場需要根據實際情況，制定適合自身的免疫程序，做好免疫抗體監測，加強免疫抗體評估。同時還應該做好豬藍耳病和豬圓環病毒病等免疫抑制病的檢測、選擇適宜該地區流行的毒株核酸同源性較高的疫苗進行免疫，以避免疫苗免疫效果不好或免疫失敗。目前是非洲豬瘟防控的關鍵時期，養殖場應重視豬場生物安全防護措施，嚴格執行生物安全規程，適時開展動物疫病凈化工作。