羅維朋比色法和分光光度法對大豆油 成品色澤監控時的應用分析

◎ 苗磊鵬，郭 靜，盧美娟

（中儲糧油脂（新鄭）有限公司，河南 新鄭 451100）

純凈的油脂在液態時是無色的，固態時呈現白色，但常見的各種油料制得的油脂均帶有一定的色澤，它主要來自油料所含的油溶性色素，包括葉綠素、類胡蘿卜素、棉酚等，是油脂中各種色素的綜合體現[1-2]大豆油的現行國家標準雖然將色澤修改為非定量測定的描述性感官測定項目[3]，但其仍然是油脂生產監控的重要質量指標之一。同時，色澤也是消費者選購食用油時的外觀依據，所以，加工企業需要在控制生產的情況下，優化油脂脫色工藝，以此達到成品油色澤國家標準，生產消費者滿意認可的產品。因此，色澤的準確定量檢測在油脂的日常生產監控就顯得非常重要。油脂色澤測定的國標方法為羅維朋比色法，而近年來的大量的文獻資料表明，分光光度法在測定油脂色澤時不僅與羅維朋的測定結果有很好的相關性，而且在結果的連續性和重現性上有很大的優勢，能準確反映油脂色澤的真實情況[4-7]。本文就羅維朋比色法與分光光度法在測定一級大豆油油色澤的應用中進行對比分析，以期為大豆油的生產實踐提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

顏色深淺不一的一級大豆油樣；無水乙醚或石油醚，分析純；正己烷，分析純。

1.2 儀器與設備

Model F型羅維朋比色計（英國羅維朋，配133.4 mm 比色槽）、TU-1810 型紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限公司，配1 cm 比色皿）。

1.3 羅維朋比色法

1.3.1 方法依據

嚴格按照GB/T 22460—2008 規定的步驟進行，采用羅維朋比色法測定，在同一光源下，由透過已知光程的液態油脂樣品的光的顏色與透過標準玻璃色片的光的顏色進行匹配，靠人眼直接觀察比對測定。

1.3.2 實驗測定

在光線柔和的同一實驗室，溫度、濕度相同的環境條件下，3 名化驗員分別對6 個色澤不一的一級大豆油樣品用同一臺羅維朋比色計進行色澤獨立測定，記錄相應結果；剩余樣品由其中一位檢驗員使用同一臺羅維朋比色計測定。

1.4 紫外可見分光光度計法

1.4.1 檢測依據

色澤不同的油品在400 ～800 nm（可見光區）吸光度不同。油品在430 ～480 nm 范圍內有較大吸收的峰呈現紅黃色[7-8]，在620 ～680 nm 范圍內有較大吸收的峰呈現青綠色[4]，所以可以使用分光光度計測定油脂吸光度表示紅黃值、青綠值的大小。

1.4.2 操作步驟

（1）設置參數。光度方式：Abs；掃描波長范圍：400 ～800 nm；掃描速度：快速，間隔1 nm；顯示范 圍：最大1.000，最小0.000。

（2）基線校正。用無水乙醚或石油醚對比色皿進行清洗，確保比色皿干凈，不可粘有其他物質。向1 cm 玻璃比色皿加入正己烷，高度約為比色皿高度的2/3 處，然后將比色皿放入樣品槽中。單擊“基線”，以正己烷為參比進行基線校正。

（3）將油樣倒入干燥、潔凈的1 cm 玻璃比色皿 中，高度約為比色皿高度的2/3 處。比色皿內待測油樣應無氣泡、絮狀物等雜質，開始掃描。

（4）掃描完成后，校正波長。

（5）導出數據，選擇620 ～680 nm、430 ～480 nm 的吸光數據進行積分求和，結果即為所需紅黃值、青綠值。

2 結果與分析

2.1 羅維朋比色計法測定一級大豆油色澤的人員比對

本文選擇了具有良好的操作經驗和顏色辨識能力的檢驗員A、B、C 三人，按文中1.3.2 的規定進行測試并記錄，結果見表1。

表1 羅維朋比色法測定不同一級大豆油樣色澤的人員比對結果表

通過表1 可知，利用羅維朋比色計測定一級大豆油色澤時，不同操作人員對同一油樣，測定結果有偏差。對于普通的一級大豆油，黃色誤差值為1 個單位，紅色誤差值為0.1 個單位；而對于發青發烏的巴西大豆油測定差異較大，黃色誤差值為2 個單位，紅色誤差值為0.2 個單位。

此方法優點是設備結構簡單，操作方便，容易普及，但缺點是操作者必須具有熟練的技巧才能獲得較準確的測定結果，對相同樣品，不同操作者因視覺判斷各異而會得到不一致的結果，標準玻璃色片的顏色會隨著使用時間的延長而逐漸“失準”，羅維朋比色計只能進行間斷性作業，長時間作業會出現視覺疲勞，影響結果的準確性，對于原料油成熟性差，色澤發青、發烏、發蒙的一級豆油采用羅維朋檢測色澤，不同人員檢測結果偏差較大，并且羅維朋比色法對于油脂的色澤也無法用數值表示，油品罐裝后，外觀差，影響消費者選購和企業銷售。

2.2 紫外可見分光光度計法測定結果

由表2 可知，利用紫外分光光度計測定一級大豆油色澤時，無論是色澤透亮油脂還是色澤發青、發烏、發蒙油脂，不同操作人員對同一油樣，測定結果偏差很小，重復性、再現性較高。

表2 紫外分光度法測定不同一級大豆油樣色澤的人員比對結果表

2.3 不同測定方法對一級大豆油色澤測定的紅黃值對比分析

在日常生產監測中，本文選取紫外分光光度計測定色澤紅黃值在1.6～3.5的樣品進行羅維朋色澤測定，測定結果見表3。為直觀分析結果，將表3 中的數據做比對分析圖，見圖1。

表3 不同測定方法對一級大豆油色澤測定的紅黃值表

圖1 兩種檢測方法紅黃值對比圖

由表3 和圖1 可知，羅維朋色澤為（Y 6.0，R 0.6）、（Y 7.0，R 0.7）、（Y 8.0，R 0.8）和（Y 9.0，R 0.9）的油脂，通過紫外分光光度計測定油脂色澤能夠對色澤的描述更精細量化，通過具體數值的差異預判油脂色澤變化趨勢，可以指導生產，對油品質量控制更有效。紫外分光光度計測定能夠對油脂色澤青綠值量化，油樣經羅維朋比色法檢測紅黃值相同，但反應在青綠值上存在差異，且油品感官色澤差異也較大，具體見表4 對羅維朋比色法檢測紅黃值相同的6 個一級大豆油進行紫外分光光度計測定。

表4 不同測定方法對一級大豆油色澤測定的紅黃值表

從表4 可以看到6 個油樣羅維朋比色法測定油樣色澤均為Y 8.0，R 0.8，青綠值依次是0.6、0.8、1.0、1.2、1.4 和1.6，實際生產過程中青綠值較高的3 個樣品（青綠值大于1.0）罐裝后，油樣發青、發烏，透明度差，外觀極差，客戶很難接受，影響產品銷售。

3 結論

通過羅維朋比色法與分光光度法測定油脂色澤分析可知，羅維朋比色法對色澤透亮的油脂能夠快速準確的判定，但對于色澤發青、發烏的樣品，測定結果無法反應油脂的真實情況；對于大量油脂樣品色澤判定，需要耗費大量時間，并且易造成檢驗人員視覺誤差，影響結果判定。為了優化產品質量把控，對此類情況采用分光光度法測定特征波長下吸光度值來表示油脂的色澤，其準確性和重復性都較高。企業在生產過程中根據油品的感官色澤情況，制定相應的內控標準，油品色澤檢測采用羅維朋比色法與分光光度法相結合的方式，可以更加有效地指導生產，避免產品色澤發青發烏的情況產生，提升產品質量和客戶的認可度，提升企業品牌的美譽度。