腎癌患者血清Cripto- 1、Kim- 1水平的變化及其臨床意義

莫海霞，劉承鋒，龍其善

(1. 深圳市龍華區人民醫院 社康科，廣東 深圳 518000； 2. 深圳市人民醫院龍華分院 泌尿外科，廣東 深圳 518000)

腎細胞癌簡稱為腎癌,起源于腎小管或集合管上皮細胞的惡性腫瘤,占成人腎臟惡性腫瘤的80%～90%[1]。手術是腎癌治療的主要方法，但約30%腎癌患者在初次就診時已發生遠處轉移[2]。因此，及時有效地對腎癌進行早期診斷，對指導患者的臨床治療及改善預后有重要意義。畸胎瘤衍生生長因子-1(Cripto- 1)，是糖基磷脂酰肌醇錨定的信號蛋白家族的成員。Cripto- l可剌激細胞增殖、遷移、存活、上皮間充質轉變 (EMT) 和血管生成以調節胚胎發育、組織穩態和腫瘤發生[3]。Cripto- 1在多種腫瘤組織中表達水平升高[4- 5]。腎損傷分子- 1(Kim- 1)是TIM蛋白家族的成員，參與調節先天和適應性免疫。Kim- 1是一種Ⅰ型跨膜蛋白，具有N端Ig樣外部結構域和細胞質信號結構域，是反映各種腎臟疾病的損傷及恢復過程的可靠生物學標志物[6]。狼瘡性腎炎患者的血清Kim- 1水平明顯升高，可作為評估患者病情嚴重程度及監測病情的活動性指標[7]。因此，本研究觀察腎癌患者血清Cripto- 1、Kim- 1水平，分析血清Cripto- 1、Kim- 1在腎癌診斷中的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2019年1月收治的108例腎癌患者(實驗組)，其中男68例，女40例；年齡35～70歲，平均(58.45±5.68)歲；腫瘤分期Ⅰ期25例，Ⅱ期35例，Ⅲ期32，Ⅳ期16例；Fuhrman分級Ⅰ級20例，Ⅱ級42例，Ⅲ級28例，Ⅳ級18例。同期，另選體檢60例健康志愿者(對照組)，其中男30例，女30例；年齡36～70歲，平均(53.75±4.89)歲。兩組受試者的年齡、性別相比，差異均無統計學意義(P>0.05)。本研究獲得醫院醫學倫理委員會的批準，所有受試者均簽署知情同意書。

1.2 納入和排除標準

納入標準：(1) 經病理診斷為腎癌；(2) 均為初始治療；(3) 術前均未行放療、化療及手術治療；(4) 臨床資料完整；(5) 均簽署知情同意書。排除標準：(1) 合并其他器官惡性腫瘤者；(2) 存在全身感染性疾病者；(3) 存在高血壓、冠心病及自身免疫性疾病者；(4) 合并其他腎臟器質性疾病者。

1.3 方法

1.3.1 血清Cripto- 1、Kim- 1檢測 采集對照組體檢時和實驗組患者入院后空腹狀態下外周靜脈血5 ml，以1 500 r·min-1離心10 min，收集上清液，-80 ℃保存待測。采用酶聯免疫吸附法檢測患者血清Cripto- 1、Kim- 1水平。Cripto- 1 ELISA試劑盒購自美國R&D公司，Kim- 1 ELISA試劑盒購自上海恒遠生物科技有限公司。所有操作均按照說明書嚴格進行。同時，實驗組患者于術后10 d再次檢測血清Cripto- 1、Kim- 1水平，方法同上。

1.3.2 臨床資料收集 收集腎癌患者的臨床病理資料，包括性別、年齡、腫瘤直徑、腫瘤分期、Fuhrman分級、有無淋巴結及遠處轉移等。

1.4 統計學處理

采用SPSS 20.0統計軟件進行數據分析。正態分布的計量資料以均數±標準差表示，組間比較采用t檢驗；計數資料采用百分比表示，組間比較采用卡方檢驗。繪制受試者工作特征(ROC)曲線并計算Cripto- 1、Kim- 1診斷腎癌的敏感度、特異度及ROC曲線下面積(AUC)。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組血清Cripto- 1、Kim- 1水平的比較

實驗組患者血清Cripto- 1、Kim- 1水平分別高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1。

2.2 實驗組手術前后血清Cripto- 1、Kim- 1水平的比較

實驗組患者術后的血清Cripto- 1、Kim- 1水平分別低于術前，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表2。

2.3 不同臨床病理特征腎癌患者的血清Cripto- 1、Kim- 1水平的比較

腎癌腫瘤直徑>4 cm、腫瘤分期Ⅲ～Ⅳ期、Fuhrman分級Ⅲ～Ⅳ級、有淋巴結轉移及遠處轉移的血清Cripto- 1、Kim- 1水平分別與腎癌腫瘤直徑≤4 cm、腫瘤分期Ⅰ～Ⅱ期、Fuhrman分級Ⅰ～Ⅱ級、無淋巴結轉移及遠處轉移相比，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表1 兩組血清Cripto- 1、Kim- 1水平的比較

表2 實驗組患者術前、術后血清Cripto- 1、Kim- 1水平的比較

表3 不同臨床病理特征腎癌患者的血清Cripto- 1、Kim- 1水平的比較

2.4 腎癌患者血清Cripto- 1、Kim- 1的ROC曲線分析

Cripto- 1預測診斷腎癌的AUC為0.795(95%CI為0.699～0.891，P<0.001)，敏感度和特異度分別為0.813和0.782；Kim- 1的AUC為0.782(95%CI為0.683～0.881，P<0.001)，敏感度和特異度分別為0.786和0.753；Cripto- 1與Kim- 1聯合檢測的AUC為0.854(95%CI為0.772～0.936，P<0.001)，敏感度和特異度分別為0.896和0.824。見表4和圖1。

表4 血清Cripto- 1、Kim- 1診斷腎癌的診斷效果比較

圖1 血清Cripto- 1、Kim- 1診斷腎癌的ROC 曲線

3 討 論

腎癌是腎實質最為常見的一種惡性腫瘤,其起病隱匿，癥狀不明顯，多數患者就診時已處于腫瘤的中晚期，往往錯過了最佳的治療時機，患者的生存預后較差。目前，隨著人們生活習慣的改變，腎癌的發病率逐年遞增，且呈現出年輕化趨勢，若不及時治療，將嚴重影響患者的生命安全。根治性腎切除是腎癌治療的主要方法之一，但是對中晚期的腎癌患者來說,即便是將原發病灶切除，術后也很容易出現腫瘤復發以及轉移，嚴重影響患者生存[8]。因此，尋找一種能早期篩查診斷腎癌的生物學標志物對改善腎癌患者的預后尤為重要。

Cripto- 1是EGF- CFC蛋白家族成員之一，參與細胞黏附和信號轉導。同時，Cripto- 1作為一種癌基因, 在腫瘤的發生、侵襲和轉移過程中起重要作用。Cripto- 1可通過激活PI3K/Akt/GSK- 3βc- Src和ras/raf/MAPK信號通路,促進細胞增殖、遷移和浸潤[9]。同時，Cripto- 1還可通過與激活素、生長因子β配體和受體形成復合物, 抑制激活素和TGF- β信號傳導, 促進腫瘤細胞存活和增殖[10]。EMT在腫瘤的浸潤與轉移過程中具有重要作用，Cripto- 1可能通過調控EMT促進大腸癌細胞的侵襲與轉移[11]。Cripto- l在多種惡性腫瘤(如肝癌[12]、鼻咽癌[13]等)中呈高表達，且與患者病情的發生發展、生存預后密切相關。Kim- 1是一種38.7 kDa的Ⅰ型跨膜糖蛋白，其由含有黏蛋白結構域和6個半胱氨酸Ig樣結構域的胞外節段以及含有酪氨酸激酶磷酸化基序的胞質節段組成。Kim- 1在正常肝、脾、腎微量表達,而在受損后再生的近曲小管上皮細胞中表達增強,在缺血- 再灌注損傷、造影劑腎損傷、中毒性腎損傷及膿毒癥腎損傷時血清Kim- 1水平明顯升高[14]。HAVCR/Kim- 1表達增強是腎惡性腫瘤生長及血管生成的重要機制[15]。葛啟斌等[16]報道，腎腫瘤患者的血清Kim- 1水平明顯升高，與腫瘤的臨床分期有關,可作為腎腫瘤的診斷標志物。

本研究結果顯示，實驗組患者血清Cripto- 1、Kim- 1水平分別高于對照組，實驗組患者術后血清Cripto- 1、Kim- 1水平分別低于術前，不同腫瘤直徑、腫瘤分期、Fuhrman分級、有無淋巴結及遠處轉移腎癌患者的血清Cripto- 1、Kim- 1水平相比差異均有統計學意義，提示血清Cripto- 1、Kim- 1可能參與腎癌發生發展的過程，也說明通過對腎癌患者血清 Cripto- 1、Kim- 1水平的動態監測可間接判斷患者腫瘤生長情況，為臨床更準確判斷患者病情提供參考。Kushlinskii等[15]報道,腎癌患者血清Kim- 1水平明顯升高，與患者腫瘤直徑、腫瘤分期、腫瘤病理分級有關，血清Kim- 1對腎癌早期診斷有較高敏感性。本研究發現，血清Cripto- 1、Kim- 1聯合檢測預測診斷腎癌的AUC高于血清Cripto- 1、Kim- 1單獨檢測，說明兩項聯合檢測對腎癌的診斷價值更高，與既往報道[17- 18]相似。

綜上所述，血清Cripto- 1、Kim- 1在腎癌患者中表達升高，血清Cripto- 1、Kim- 1水平與腎癌患者的腫瘤直徑、腫瘤分期、Fuhrman分級、有無淋巴結及遠處轉移有關，聯合檢測血清Cripto- 1和Kim- 1對腎癌診斷有較高臨床參考價值。但是，本研究也存在一定局限性，尚須大樣本、多中心進行進一步研究。