金訶牌雪益康膠囊調(diào)節(jié)血糖作用的實(shí)驗(yàn)研究

袁發(fā)榮，劉有菊，周小蘭，馬文俊，孫躍寧

（金訶藏藥股份有限公司，青海省藏醫(yī)藥研究院，青海 西寧 810003）

金訶牌雪益康膠囊是以白刺果、沙棘果、枸杞子、麥芽、山藥、山楂為主要原料制成的保健食品，具有調(diào)節(jié)血糖的作用。產(chǎn)品精選生長于海拔3000 米左右高原的特色草本植物唐古特白刺果、柴達(dá)木枸杞子、沙棘果等作為原料，采用傳統(tǒng)炮制與現(xiàn)代工藝相結(jié)合的技術(shù)手段精制而成。在本文中，筆者主要是研究為四氧嘧啶致高血糖模型大鼠使用金訶牌雪益康膠囊對其血糖的調(diào)節(jié)作用。

1 材料與方法

1.1 受試樣品

金訶牌雪益康膠囊（內(nèi)容物呈棕褐色），由金訶藏藥股份有限公司提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)動物

SPF 級雄性Wistar 大鼠80 只（購自中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心），其體重為160 ～200 g，合格證書：京動許字99001 號。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

電子天平、Beckman 半自動生化分析儀、四氧嘧啶（購自Sigma-Aldrich 公司）、葡萄糖檢測試劑盒（購自中國生物技術(shù)股份有限公司）。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

將40 只大鼠隨機(jī)分為造模前高劑量組、造模前中劑量組、造模前低劑量組和正常對照組。對正常對照組大鼠進(jìn)行30 d 的正常飼養(yǎng), 在此基礎(chǔ)上經(jīng)口給予造模前低劑量組大鼠、造模前中劑量組大鼠、造模前高劑量組大鼠金訶牌雪益康膠囊（劑量分別為0.6、1.2、1.8 g/kg·bw）30 d。每天為各組大鼠稱量1 次體重，稱量完體重后，使用相應(yīng)劑量的金訶牌雪益康膠囊溶液對造模前低劑量組大鼠、造模前中劑量組大鼠、造模前高劑量組大鼠進(jìn)行灌胃，使用等量的蒸餾水對正常對照組大鼠進(jìn)行灌胃。然后比較飼養(yǎng)的第7 天、第14 天、第28 天各組大鼠的體重。在飼養(yǎng)前和飼養(yǎng)30 d 后，對各組大鼠進(jìn)行空腹血糖檢測（禁食5 h后測定血糖水平），并比較其空腹血糖的水平。將另40 只大鼠隨機(jī)分為造模后高劑量組、造模后中劑量組、造模后低劑量組和模型組。采用四氧嘧啶造模法將這40 只大鼠制備成大鼠高血糖模型。具體的造模方法是：為大鼠禁食16 h 后，為其尾靜脈注射四氧嘧啶60 mg/kg·bw。完成造模后，對模型組大鼠進(jìn)行30 d 的正常飼養(yǎng)，在此基礎(chǔ)上經(jīng)口給予造模后低劑量組、造模后中劑量組、造模后高劑量組大鼠金訶牌雪益康膠囊（劑量分別為0.6、1.2、1.8 g/kg·bw）30 d。每天為各組大鼠稱量1 次體重，稱量完體重后，使用相應(yīng)劑量的金訶牌雪益康膠囊溶液對造模后低劑量組大鼠、造模后中劑量組大鼠、造模后高劑量組大鼠進(jìn)行灌胃，使用等量的蒸餾水對模型組大鼠進(jìn)行灌胃。然后比較飼養(yǎng)的第7 天、第14 天、第28 天各組大鼠的體重。在飼養(yǎng)前和飼養(yǎng)30 d 后，對各組大鼠進(jìn)行空腹血糖檢測，并比較其空腹血糖的水平。在飼養(yǎng)的第24 天，對各組大鼠進(jìn)行糖耐量試驗(yàn)。方法是：為各組大鼠禁食5 h 后，使用金訶牌雪益康膠囊溶液對造模后低劑量組大鼠、造模后中劑量組大鼠、造模后高劑量組大鼠進(jìn)行灌胃（劑量分別為0.6、1.2、1.8 g/kg·bw），使用等量的蒸餾水對模型組大鼠進(jìn)行灌胃。1 h 后，使用50% 的葡萄糖溶液（劑量為2 g/kg·bw）對各組大鼠進(jìn)行灌胃。完成灌胃后即刻、灌胃后1 h、2 h，檢測各組大鼠的血糖水平。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS 19.0 軟件對本次研究中的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)量資料采用t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2 檢驗(yàn)。P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 造模前各組大鼠體重、空腹血糖水平的比較

在飼養(yǎng)的第7 天、第14 天、第28 天，造模前低劑量組大鼠、造模前中劑量組大鼠、造模前高劑量組大鼠和正常對照組大鼠的體重相比，P ＞0.05。在飼養(yǎng)前和飼養(yǎng)30 d 后，造模前低劑量組大鼠、造模前中劑量組大鼠、造模前高劑量組大鼠和正常對照組大鼠的血糖水平相比，P ＞0.05。詳見表1。

2.2 造模后各組大鼠體重、空腹血糖水平的比較

在飼養(yǎng)的第7 天、第14 天、第28 天，造模后低劑量組大鼠、造模后中劑量組大鼠、造模后高劑量組大鼠和模型組大鼠的體重相比，P ＞0.05。在飼養(yǎng)前，造模后低劑量組大鼠、造模后中劑量組大鼠、造模后高劑量組大鼠和模型組大鼠的血糖水平相比，P ＞0.05。在飼養(yǎng)30 d 后，造模后高劑量組大鼠的血糖水平低于造模后低劑量組大鼠、造模后中劑量組大鼠、模型組大鼠，P ＜0.05 ；造模后中劑量組大鼠的血糖水平低于造模后低劑量組大鼠、模型組大鼠，P ＜0.05 ；造模后低劑量組大鼠的血糖水平低于模型組大鼠，P ＜0.05。詳見表2。

2.3 造模后各組大鼠糖耐量試驗(yàn)結(jié)果的比較

進(jìn)行葡萄糖溶液灌胃后1 h、2 h，造模后中劑量組大鼠、造模后高劑量組大鼠的血糖水平均低于模型組大鼠，P ＜0.05。造模后中劑量組大鼠、造模后高劑量組大鼠進(jìn)行葡萄糖溶液灌胃后即刻與灌胃后1 h 血糖水平的差值、灌胃后1 h 與灌胃后2 h 血糖水平的差值均小于模型組大鼠，P ＜0.05。詳見表3、表4。

表1 造模前各組大鼠體重、空腹血糖水平的比較（±s）

表1 造模前各組大鼠體重、空腹血糖水平的比較（±s）

組別 動物只數(shù) 劑量 體重（g） 空腹血糖（mmol/L）飼養(yǎng)的第7 天 飼養(yǎng)的第14 天 飼養(yǎng)的第28 天 飼養(yǎng)前 飼養(yǎng)30 d 后正常對照組 10 179.0±8.9 260.3±12.6 298.3±14.2 5.76±0.35 5.57±0.33造模前低劑量組 10 0.6 g/kg·bw 177.5±7.8 261.4±11.4 299.3±14.0 5.74±0.37 5.54±0.34造模前中劑量組 10 1.2 g/kg·bw 179.3±9.2 262.8±10.6 300.8±11.6 5.72±0.37 5.56±0.35造模前高劑量組 10 1.8 g/kg·bw 178.1±8.1 262.2±10.9 299.8±14.9 5.77±0.30 5.54±0.34

表2 造模后各組大鼠體重、空腹血糖水平的比較（±s）

表2 造模后各組大鼠體重、空腹血糖水平的比較（±s）

組別 動物只數(shù) 劑量 體重（g） 空腹血糖（mmol/L）飼養(yǎng)的第7 天 飼養(yǎng)的第14 天 飼養(yǎng)的第28 天 飼養(yǎng)前 飼養(yǎng)30 d 后模型組 10 180.6±8.3 237.9±10.2 248.4±15.2 20.86±2.65 30.61±3.10造模后低劑量組 10 0.6 g/kg·bw 178.4±8.5 238.0±11.6 252.4.±14.7 21.08±2.61 28.24±2.91造模后中劑量組 10 1.2 g/kg·bw 178.8±9.1 239.1±10.7 256.2±14.1 20.74±2.71 25.08±2.65造模后高劑量組 10 1.8 g/kg·bw 178.4±7.8 240.1±10.1 258.9±11.5 20.86±2.65 20.61±3.10

表3 造模后各組大鼠糖耐量試驗(yàn)結(jié)果的比較（mmol/L，±s）

表3 造模后各組大鼠糖耐量試驗(yàn)結(jié)果的比較（mmol/L，±s）

組別 動物只數(shù) 劑量 血糖水平灌胃后即刻 灌胃后1 h 灌胃后2 h模型組 10 28.25±2.92 34.94±1.37 30.10±2.63造模后低劑量組 10 0.6 g/kg·bw 24.68±2.77 33.02±2.21 26.40±2.33造模后中劑量組 10 1.2 g/kg·bw 21.67±2.14 25.08±2.65 22.40±2.28造模后高劑量組 10 1.8 g/kg·bw 20.16±1.43 24.30±2.63 21.35 ±2.03

表4 造模后各組大鼠進(jìn)行糖耐量試驗(yàn)時血糖變化幅度的比較（mmol/L，±s）

表4 造模后各組大鼠進(jìn)行糖耐量試驗(yàn)時血糖變化幅度的比較（mmol/L，±s）

灌胃后1 h 與灌胃后2 h 血糖水平的差值（血糖下降幅度） 模型組 10 6.68±2.30 4.84±2.01造模后低劑量組 10 0.6 g/kg·bw 8.34±4.18 6.62±3.64造模后中劑量組 10 1.2 g/kg·bw 3.41±1.38 2.68±1.59造模后高劑量組 10 1.8 g/kg·bw 4.14±1.21 2.95±1.21組別 動物只數(shù) 劑量 灌胃后即刻與灌胃后1 h 血糖水平的差值（血糖上升幅度）

3 討論

金訶牌雪益康膠囊配方原料中的白刺果是生長在青海柴達(dá)木盆地的白刺果。白刺果為蒺藜科、白刺屬灌木白刺的果實(shí)。《本草綱目》中說：白刺果“氣味辛、寒、無毒。療丈夫虛損，陽痿精自出，補(bǔ)腎氣，益精髓。”《藏醫(yī)精髓與醫(yī)學(xué)寶典》中說：“白刺果可入藥，健脾胃、滋補(bǔ)強(qiáng)身、舒筋活血，主治肺病和胃病，果核可榨油。”有研究表明，為多種高血糖動物模型使用白刺果均可取得較好的降血糖作用[1]。枸杞中含有枸杞多糖、類胡蘿卜素、甜菜堿、多種維生素及微量元素等。為腎上腺素、四氧嘧啶致高血糖模型小鼠使用枸杞水提取物可顯著降低其血糖水平[2]。沙棘果被譽(yù)為“天然維生素的寶庫”，其中富含多種維生素、黃酮類及多酚類化合物、不飽和脂肪酸、植物甾醇類化合物、微量元素等。有研究表明，沙棘果中的黃酮類化合物可起到清除自由基及抗脂質(zhì)過氧化的作用[3]。麥芽為禾本科植物大麥的成熟果實(shí)經(jīng)發(fā)芽干燥的炮制加工品。其中含有麥芽淀粉酶、轉(zhuǎn)化糖酶、維生素B、脂肪、磷脂、糊精、麥芽糖、葡萄糖等。大劑量的麥芽可起到調(diào)節(jié)血糖、血脂水平、降低血漿游離脂肪酸水平、升高血清瘦素水平等作用[4]。山楂中含有黃酮類化合物、有機(jī)酸、磷脂、維生素等。山楂總黃酮可通過抑制腎組織中TGF-β1和CTGF 的過度表達(dá)來起到保護(hù)腎功能的作用[5]。山藥中含有薯蕷皂苷元、山藥多糖、山藥堿、氧化酶、糖蛋白、多種甾醇類物質(zhì)等。有研究表明，為四氧嘧啶致高血壓模型大鼠使用山藥多糖能降低其血糖水平，且山藥多糖的降糖作用會隨使用劑量的增加而增強(qiáng)[6]。

本研究的結(jié)果表明，為四氧嘧啶致高血糖模型大鼠使用金訶牌雪益康膠囊可顯著降低其血糖水平。