ATP熒光檢測法在傳染病防治監督領域中的運用分析

鄭效海 邊廷敏

1.山東省淄博市臨淄區衛生健康執法大隊,山東 淄博 255400;2.山東省淄博市臨淄區疾病預防控制中心,山東 淄博 255400

引言:衛生監督工作綜合性、技術性及科學性等諸多特征共存，在現場實現快速檢測表現出衛生監督執法的高技術性，也是落實執法任務、高效應對緊急公共衛生事件的重要保障。從本質上分析，ATP熒光檢測法隸屬于快速的微生物檢測方法范疇，在上個世紀90年代ATP熒光系統被引入至國內，經20余年的發展歷程，該項技術在環境衛生、食品安全監測等諸多領域中均有應用，取得的成績也是較理想的。

1 ATP檢測原理及其特點分析

該項檢測方法是采用熒光素檢測ATP的含量值，在Mg2+與熒光素酶的催化作用在，熒光素、氧氣會和ATP進行發光反應形成長為560nm熒光，在他類反應物投入過量的情景下，ATP含量越高，發光強度越大，進而通過檢測發光強度值去檢出試樣內ATP含量。

技術的主要優勢特征有：(1)操作過程簡易、快速，能實現在監測場所的即時性檢測；(2)反應敏捷，當下采用的手持式熒光檢測儀的檢測界限通常是10-15mol，能夠符合大部分樣本的現實監測需求，臺式檢測儀的檢測界限更高；(3)該檢測法下的反應簡單、有助于減少操作時的人為誤差，再現性優良，對實驗操作技術沒有提出嚴苛的要求；(4)食用范圍較廣，能夠精確檢測出環境、食品試樣內維生素機及他類有機物殘留情況。

但ATP檢測技術應用階段也暴露出一定不足，主要表現在外界客觀因素容易干擾反應過程、無法鑒定菌種及使用費用較昂貴等方面。

2 ATP檢測法在傳染病防治監督實踐中的應用

2.1醫院感染控制 一旦發生醫院感染事件，一方面會增加國家醫療衛生資源的耗用量，另一方面也會使廣大病患承受更大的痛楚，使患者、社會乃至國家均承受著巨大的經濟損失。大部分醫院感染患者是接觸性感染，醫務人員手、受污染的醫療器械等是主要的傳播媒介。故而，在醫院感染防控階段，加強醫護人員手衛生、器械清洗和消毒質量管理具有很大現實意義。

柯雅娟等[1]采用ATP技術對醫院內外科醫護人員手的衛生質量作出監測評估，并基于比較發現運用ATP檢測方法后有助于提升手術室人員手衛生的依從性。盡管清洗是當下大部分醫療器械實現有效滅菌的關鍵一環，當針對其清洗質量的評估當下尚未形成標準化的測評方法，ATP生物發光技術評估醫療器械清洗前后清潔度改善情況的報道并不多，但有很多醫者陸續研究了該法的應用情況。比如，邢書霞等[2]比較了超聲波清洗器清洗前后細菌總數和標定菌量及RLU值曲線之間形成的相關性以后，獲得了RLU值對數值，將其與實測值比較后，確認兩者沒有形成明顯差異，表明當細菌總數在1.0×102～1.0×102CFU區間內時，可利用ATP法檢出RLU值取代細菌總數，大體上能呈現出清洗前后細菌殘留實況，邢書霞等推薦使用ATP熒光法測評器械清洗效果，若檢出RLU值≤2000，則提示器械清洗效果達標。還有文獻內記載，于兩所英國醫院內觀測63支內鏡使用后的清洗效果，均使用微生物學、ATP檢測，將ATP、微生物含量分別<500RLU/樣品、<103cfu/樣品時設定為合格標志，歷經研究后發現，ATP法檢出的不合格樣品要多于微生物法。

2.2疫源地消毒控制

伴隨SARS、禽流感等傳染病的流行，汶川、蘆山地震等自然地質災害等的發生，不同級別疾控機構陸續建立的背景下，早期有針對性的指導相關單位、群體進行消毒工作，這是早期有效防控傳染病的有效辦法之一。在控制消毒效果質量方面，細菌采樣與培養法檢測是經典法，其對專業知識與技能水平提出較高要求，耗用的時間長、成本也較高。既往有人員試圖使用ATP熒光法控制疫源地消毒質量，比較其和微生物培養法對模擬及疫源地現場消毒處理前后的細菌總數，發現ATP法能更迅速的檢測、測評疫源地物體表層消毒情況[3]。

2.3檢測水內細菌總數

水內細菌總數為水質監測實踐中的常用指標之一，其能直接呈現出水質被細菌的污染程度。國內有人員在標準實驗室內采用既往有人員試圖使用ATP熒光法、常規平皿計數法分別檢測細菌總數，發現檢測結果有較好的線性相關性，據此認定ATP法為一項能快速、便捷、準確檢出菌落總數的技術類型，適用于快速檢測自來水等領域中。還有人員結合現行規范標準采用ATP法監測溫泉水內細菌總數，檢出的溫泉浴池水污染狀況和權威衛生部門作出的測評結果是一致的，其準確度和實驗室細菌培養法作比較相關性范圍是92%～97%[4]。

3 構建游離ATP有效去除體系，改進ATP熒光法

游離ATP的含量是影響ATP技術檢測微生物含量的主要影響因素之一，當下采用的去游離ATP前處理法及酶解ATP法都不能完全去除游離ATP。故而應構建游離ATP有效去除體系，比如將Mg(OH)2添加到菌液內取誘導游離ATP聚沉過程，歷經離心過程將其去除；基于正交實驗對比多種ATP水解酶在去除游離ATP的效果，進而獲取效能最佳的游離ATP去除劑。

雖然既往ATP法在檢測微生物方面表現出較高的靈敏度，但部分情景下依然無法達到衛生學要求。為應對如上情況，實踐中可聯合使用過濾法、前培養法去提高靈敏度。比如，當試驗樣品內固體成分占比較高以及活菌數目偏少時，輔助使用過濾法也不利于完成 ATP測定任務，工作人員可以在較短時間內進行前培養，誘導被檢細菌生長繁殖過程，最后能抵達可用APT法檢測的程度。

4 結束語

和傳統經典檢測技術方法相比較，ATP熒光檢測法在操作簡便性、快捷性及檢測結果精確度等諸多方面均占據優勢，在現場衛生監測領域中表現出較高適用性，特別是在傳染病防治監管中，但當下關于該法應用的相關研究文獻報道并不多。在技術應用階段，我們應重視微生物數目、pH、溫度及游離型APT形成的影響，并思考相關應對措施，進而使用ATP法檢測結果的準確度得到更大保障，為我國衛生行業健康發展提供更強大支持。