微柱凝膠技術(shù)在新生兒溶血病中的應(yīng)用效果

劉潔

吉林省人民醫(yī)院 ,吉林 長(zhǎng)春 130000

新生兒溶血病(Hemolytic Disease of Newborn，HDN)是一種較常見的新生兒疾病，主要由于母嬰血型不合導(dǎo)致。微柱凝膠技術(shù)(Microcolumn Gel Technology，MGT)是一種新型的、高效的新生兒溶血病檢測(cè)手段，在全世界范圍內(nèi)擁有廣泛的使用面和不俗的臨床實(shí)用口碑[1]。本次研究根據(jù)本院近年來(lái)進(jìn)行新生兒溶血病疾病診斷的幼兒的相關(guān)臨床治療數(shù)據(jù)，對(duì)微柱凝膠技術(shù)對(duì)其診斷效果進(jìn)行分析和說(shuō)明。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1基本資料 本次研究所涉及資料均來(lái)自2018年2月-2020年9月在我院進(jìn)行新生兒溶血病檢測(cè)的新生兒的相關(guān)醫(yī)療數(shù)據(jù)，共1720人。隨機(jī)分為常規(guī)檢測(cè)組和凝膠檢測(cè)組，每組各860人。其中常規(guī)檢測(cè)組有女童302人，男童558人；出生時(shí)間1～16d，平均出生時(shí)間(4.27±1.38)d。凝膠檢測(cè)組有女童327人，男童533人；出生時(shí)間1～15d，平均出生時(shí)間(4.62±1.62)d。全部人員均排除嚴(yán)重臟器疾病以及心血管、腦血管、神經(jīng)系統(tǒng)疾病和精神疾病者。病患及其家屬對(duì)研究過(guò)程和治療藥物有明確認(rèn)知，并在研究認(rèn)同書上簽字，院內(nèi)倫理委員會(huì)在研究同意書上簽字。對(duì)比兩組病患基本臨床數(shù)據(jù)不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05，具有研究意義。

1.2檢測(cè)方法 常規(guī)檢測(cè)組采用常規(guī)檢測(cè)手段，主要步驟，對(duì)母嬰進(jìn)行血樣采集，制作4-5mL的EDTA-K2抗凝血樣本，確定母嬰的ABO血型及Rh血型。而后將母嬰血液樣本進(jìn)行常規(guī)DTA(直接抗人球蛋白檢驗(yàn))，確定新生兒溶血病發(fā)生情況。

凝膠檢測(cè)組采用微柱凝膠技術(shù)，主要步驟，首先確定母嬰的ABO血型及Rh血型。

①抗人球蛋白檢驗(yàn)，使用一張微柱凝膠抗人球蛋白卡，標(biāo)記陰性、陽(yáng)性和待檢分區(qū)。將需檢驗(yàn)的紅細(xì)胞樣本使用生理鹽水制作成濃度為0.8%的懸浮液，抽50μL液體于標(biāo)記管內(nèi)。分別選50μL陰性和陽(yáng)性標(biāo)本液放于試管中，設(shè)置為對(duì)照組，并馬上使用BYL血型血清進(jìn)行5min的離心機(jī)離心，轉(zhuǎn)速和時(shí)間分別設(shè)定為2min的900r/min，3min的1500r/min。對(duì)比結(jié)果可以以肉眼進(jìn)行評(píng)定，陽(yáng)性表現(xiàn)為紅細(xì)胞凝集在膠表層或膠中層。

②血清游離抗體檢驗(yàn)，使用一張微柱凝膠抗人球蛋白卡，對(duì)該卡前三個(gè)孔分別做Ac、Bc、Oc標(biāo)記，在該三孔內(nèi)分別滴入50μL的 A、B、O紅細(xì)胞，之后再滴入50μL需檢查血清。

③熱放散法檢驗(yàn)，即紅細(xì)胞抗體釋放及釋放檢驗(yàn)，使用一張微柱凝膠抗人球蛋白卡，對(duì)該卡前三個(gè)孔分別做Ac、Bc、Oc標(biāo)記，在該三孔內(nèi)分別滴入50μL的 A、B、O紅細(xì)胞。在各標(biāo)記處滴入50μL放散液。將該蛋白卡放入孵育器，溫度為37℃，時(shí)間為15min。而后進(jìn)行5min的BYL血型血清分離，時(shí)間為5min，分別為2min的900r/min，3min的1500r/min。對(duì)陽(yáng)性結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)同①。

1.3評(píng)定標(biāo)準(zhǔn) 本次研究設(shè)計(jì)評(píng)價(jià)指標(biāo)為對(duì)比兩組新生兒溶血病檢出情況。對(duì)新生兒溶血病的判定為①②③項(xiàng)檢驗(yàn)結(jié)果均為陽(yáng)性即為新生兒患有新生兒溶血病。若三項(xiàng)結(jié)果并不同時(shí)為陽(yáng)性，醫(yī)生則應(yīng)該以兒童具體臨床病癥、表現(xiàn)、DTA、抗體游離檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行綜合性分析和確診。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0對(duì)納入患者資料展開分析，計(jì)量值用±表示，計(jì)數(shù)值用卡方檢驗(yàn)，P<0.05，有差異。

2 結(jié) 果

常規(guī)檢測(cè)組860名患兒經(jīng)血液學(xué)檢測(cè)確診新生兒溶血病患兒638人，常規(guī)檢測(cè)出新生兒溶血病患兒492人，準(zhǔn)確率為77.12%。凝膠檢測(cè)組860名患兒經(jīng)血液學(xué)檢測(cè)確診新生兒溶血病患兒661人，凝膠檢測(cè)出新生兒溶血病患兒635人，準(zhǔn)確率為96.07%。對(duì)比兩組新生兒溶血病檢驗(yàn)準(zhǔn)確率，凝膠檢測(cè)組明顯好于常規(guī)檢測(cè)組，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05。

3 討 論

新生兒溶血病會(huì)導(dǎo)致多種疾病，如黃疸、貧血、核黃疸等，嚴(yán)重者會(huì)致使新生兒死亡[2]。有效的新生兒溶血病診斷手段能夠及時(shí)確定新生兒的疾病狀態(tài)，并及早地進(jìn)行治療干預(yù)，從而提升新生兒的健康程度和新生兒溶血病的治療效果。微柱凝膠技術(shù)是一種新型的、高效的新生兒溶血病檢測(cè)手段，在檢測(cè)中需注意陽(yáng)性和陰性對(duì)照物的制作，從而提升檢測(cè)準(zhǔn)確率[3][4]。使用生理鹽水對(duì)O型Rh陽(yáng)性紅細(xì)胞沖洗3次，做成濃度為0.5-1.0%的紅細(xì)胞懸浮液，為陰性對(duì)照物。使用2份1:32抗體效價(jià)的IgG抗-D血清和1份O型Rh陽(yáng)性紅細(xì)胞進(jìn)行融合，進(jìn)行30min的37℃水浴孵育，再使用生理鹽水沖洗3次，做成濃度為0.5-1.0%的紅細(xì)胞懸浮液，為陽(yáng)性對(duì)照物[5]。另外，在熱放散法檢驗(yàn)時(shí)需注意對(duì)的配置，使用生理鹽水對(duì)需檢驗(yàn)人員血紅細(xì)胞進(jìn)行三次沖洗，制成懸浮液，取500μL懸浮液與500μL生理鹽水進(jìn)行混合，以滅活的AB型血清或清蛋白為最佳。將混合液加入試管，進(jìn)行10min的水浴，溫度設(shè)為56 ℃，不斷振搖。而后取出試管放于56℃熱套管中，進(jìn)行5min2000r/min的離心操作，取樣上清液，為放散液。本次研究中對(duì)比兩組新生兒溶血病檢驗(yàn)準(zhǔn)確率，凝膠檢測(cè)組明顯好于常規(guī)檢測(cè)組，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05。

總而言之，微柱凝膠技術(shù)是一種新型高效的新生兒溶血病診斷手段，具有操作便捷、診斷準(zhǔn)確率高、特異性好等優(yōu)點(diǎn)，可以普遍應(yīng)用于臨床新生兒疾病診斷和篩查之中。