ICP-MS法測定中藥材凱里多穗金粟蘭中14種微量元素

孫貴萍，馮樹慧，張衛青，晏 晨

(1.貴州中醫藥大學，貴州 貴陽 550000；2.安順市人民醫院，貴州 安順 561000)

多穗金粟蘭屬于金粟蘭科(Chloranthus multistachys Pei)植物，民間又叫作四塊瓦，性味苦辛，微溫，有小毒；功效為活血散瘀、祛風解毒；可用于治療跌打骨折、腰腿痛、疔腫、感冒、皮膚瘙癢等病癥[1-2]，具有很高的藥用價值。近年來，很多學者對該屬植物的化學成分以及藥理作用做了很多的研究[3-4]，據研究報道，該屬植物中分離得到的一些化合物可以作為K+離子和磷酸二酯酶-4的調節劑[5-6]、抗瘧疾[7]、抗乳腺癌活性[8]、抗炎活性[9]、抗真菌活性、HIV-1的抑制以及神經保護[10]等方面的藥理作用。但有關金粟蘭屬植物中微量元素的研究較少，隨著野生中藥蘊藏量不斷減少，種植品將成為藥材的主要來源，而且，種植的藥材必須考慮微量元素含量。微量元素的研究是現代中藥研究中的重要部分，是中藥歸經以及藥性的物質基礎，中草藥中微量元素的研究能夠從源頭上提高中藥質量，對于道地藥材的形成、后期加工、功效確定、指導中藥最佳配伍等具有重大的意義[11]。此外，中醫中藥起效慢，有些藥需要長期服用，如果中藥中含微量元素不達標，長期服用會中毒，所以，從源頭控制藥材中微量元素至關重要。本實驗采用硝酸處理樣品多穗金粟蘭，經微波消解定容后注入ICP-MS中，對凱里多穗金粟蘭中14種微量元素的含量進行測定。

1 儀器與材料

NexION2000電感耦合等離子體質譜儀(PerkinElmer)、ETHOS UP微波消解儀(北京萊伯泰科儀器股份有限公司)、電子分析天平(AY-120，島津公司)。娃哈哈純凈水(貴陽娃哈哈飲料有限公司)、硝酸(優級純，太倉滬試劑有限公司)、15種混合標準溶液(CL3-19MKBY1,PerkinElmer)。實驗所有藥材經中國科學院昆明植物研究所劉海洋研究員鑒定為金粟蘭屬植物多穗金粟蘭。

2 方法及結果

2.1 樣品預處理 精密稱取多穗金粟蘭的干燥全草藥材50目粉末約0.3 g，將稱取的藥材粉末置于消解罐中，加入10 ml硝酸，將樣品密閉放置過夜，裝入微波消解儀中，按表1中設置的微波消解參數進行消解，消解完成后將藥液濃縮至1～2 ml，轉移至50 ml容量瓶中，用水洗滌3次消解罐，同時將所有洗滌液轉移到容量瓶，定容即得到供試品溶液。

2.2 混合標準溶液的配置 精密吸取各元素的標準溶液適量，用1%的硝酸稀釋至每1 ml分別含0 μg、0.01 μg、0.02 μg、0.04 μg、0.08 μg、0.1 μg、0.2 μg的溶液，置于冰箱冷藏保存。

2.3 儀器工作參數 設定的儀器工作參數見表1。

表1 ICP-MS工作參數

2.4 方法學驗證

2.4.1 回歸方程及相關參數 在儀器設定的參數下對不同濃度的標準溶液進行測定，以溶液濃度(μg)為橫坐標(x)，被測元素每一濃度測得的3次濃度與內標物讀數比值的平均值(CPS)值為縱坐標(y)得出各元素的標準曲線。除不加樣品外，按照“2.1樣品預處理”進行操作，制備空白溶液，連續測定11次，3倍響應值的標準偏差比上相應元素標準曲線，所得到的斜率視為每個元素的檢出限[12-13]。得出每個元素的標準曲線及相關系數、檢出限等，結果見表2。

2.4.2 精密度實驗 取配置的混合標準品鉛(0.02 μg/ml)，在選定測試條件下平行測定(n=6)。每種元素含量都在標準曲線的線性范圍，各元素的相對標準偏差(RSD%)均小于4.0%，實驗數據可知儀器精密度較好，達到實驗要求，結果見表2。

2.4.3 重復性實驗 研究的藥材多穗金粟蘭樣品按“2.1樣品預處理”方法進行操作，平行6份，測得每個元素的含量，并分別計算每個元素的相對標準偏差(RSD%)。各元素重復性的RSD值均小于5.0%，符合痕量分析以及實驗的要求，結果見表2。

表2 14種元素的測定結果

2.4.4 樣品含量測定結果及回收率試驗 精密稱取供試品6份，稱樣量每份約0.1 g，分別加混合對照品溶液，供試品溶液制備方法參照“2.1”，并將樣品溶液進行測定。實驗測得多穗金粟蘭中微量元素含量較大的為Cu、Pb、Cr、Ni元素，Be、Mo、Ag、Sn、Sb、Tl等含量均低于1 mg/kg；14種元素的回收率范圍在84%～120%，符合痕量分析以及實驗的要求。結果見表3。

表3 多穗金素蘭中微量元素含量測定結果及回收率

3 討論

本實驗中多穗金粟蘭的樣品采用微波消解進行處理，具有處理效果好以及樣品澄清等優點。利用ICP-MS法對凱里多穗金粟蘭中重金屬及微量元素的含量進行測定，此法具有較高靈敏度、檢出限高、分析速度快以及線性范圍寬等特點，且該法簡便、可靠，可操作性強。

本實驗可以大致了解凱里多穗金粟蘭中上述14種微量元素的含量，對于個別元素含量過高的原因是因為土壤中含量過高，還是藥材本身對這幾種元素吸收較強導致，具體原因還需要做進一步研究。此外，多穗金粟蘭的不同藥用部位含重金屬的量還需要做進一步研究。