白藜蘆醇對(duì)多柔比星引起的心臟毒性保護(hù)作用研究進(jìn)展

吳文英，李文娟，李 露，尹術(shù)華，趙文輝，姚于飛,

（1.南昌大學(xué) 食品科學(xué)與技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西 南昌 330047；2.江西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，江西 南昌 330006）

邁入21世紀(jì)，由于食品供給的富余，疾病模式已發(fā)生轉(zhuǎn)變，心血管疾病和腫瘤已經(jīng)成為危害全球健康的主要疾病[1]。值得注意的是，相比于普通健康人群，有心血管既往病史和家族史的患者，腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)更高[2]。眾所周知，手術(shù)、化療和放療作為腫瘤治療的三大“常規(guī)武器”，在抑制/殺死腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，也存在對(duì)患者正常細(xì)胞損傷的不良反應(yīng)，導(dǎo)致腫瘤臨床治療風(fēng)險(xiǎn)高、患者預(yù)后差[3]。多柔比星（doxorubicin，DOX）是典型的廣譜高效抗腫瘤藥物。DOX與心肌組織的親和力明顯高于其他組織，導(dǎo)致其在心肌細(xì)胞中積聚，呈現(xiàn)劑量依賴性的靶向心肌毒性，這極大地限制了DOX在臨床治療中的使用劑量[4]。迄今為止，化學(xué)合成藥物或方法不能完全地預(yù)防DOX引起的心臟毒性反應(yīng)[5]。

越來越多的數(shù)據(jù)顯示，食源性組分已成為抗腫瘤藥物研發(fā)中的重要分支[6]。盡管大部分食源性組分的抗腫瘤活性遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于化療藥物，但作為膳食補(bǔ)充，降低腫瘤化療毒副作用的聯(lián)合治療模式是腫瘤治療研究的重要方向。在這些食源性組分中，白藜蘆醇的心肌保護(hù)作用較為顯著[7]。早在1940年，科研人員就已從毛葉藜蘆根部分離得到白藜蘆醇[8]，但此后卻未能得到人們足夠的重視，直到“法國悖論”現(xiàn)象的出現(xiàn)，才逐漸引起了關(guān)注。所謂的“法國悖論”與法國人飲用葡萄酒，攝入大量白藜蘆醇有直接關(guān)系。因此，白藜蘆醇在相關(guān)的心肌保護(hù)研究中倍受青睞，被證實(shí)對(duì)心血管系統(tǒng)具有較好防護(hù)作用。近年來發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇對(duì)DOX造成的心肌損傷有一定的保護(hù)作用[7]。鑒于此，本文對(duì)DOX誘導(dǎo)的心肌損傷及白藜蘆醇的心肌保護(hù)作用進(jìn)行綜述，旨在為進(jìn)一步研究白藜蘆醇抗DOX心肌毒性及尋找相關(guān)新天然產(chǎn)物提供參考并拓展研究思路。

1 多柔比星的毒副作用

DOX雖然在對(duì)抗癌癥方面起到了重要的作用，但是其對(duì)機(jī)體正常組織造成的嚴(yán)重?fù)p傷也是眾所周知的，其對(duì)心臟、肝臟、腎臟以及睪丸等造成損傷：1）心臟毒性是DOX的主要毒副作用，長期使用甚至可導(dǎo)致致死性心肌損傷，極大程度地限制其在臨床上的應(yīng)用[9]。DOX誘導(dǎo)的心臟毒性表現(xiàn)涉及多種不同的作用機(jī)制，例如氧化應(yīng)激、鈣超載和細(xì)胞凋亡等。2）肝臟毒性是DOX的另一重要毒副作用。作為人體最大的代謝器官，肝臟在新陳代謝中起著至關(guān)重要的作用，而DOX也很容易損壞肝臟[10]。據(jù)報(bào)道，40%接受DOX治療的患者承受著藥物引起的肝臟損傷帶來的痛苦[11]。3）DOX在嚙齒動(dòng)物模型中表現(xiàn)出腎毒性，導(dǎo)致大鼠腎臟受損，包括腎小球毛細(xì)血管通透性增加和腎小球萎縮[12]。4）DOX的骨髓毒性為骨髓抑制，主要表現(xiàn)為白細(xì)胞、血小板減少，甚至大部分患者會(huì)出現(xiàn)罕見的貧血。此外，DOX對(duì)大鼠腸黏膜屏障有損害作用[13]。5）其他：DOX的細(xì)胞毒性反應(yīng)之一為藥物溢出血管外而引起的組織潰瘍及壞死，引起皮炎、色素沉積，此外，大多數(shù)患者還出現(xiàn)脫發(fā)[14]。DOX可引起食欲減退，并對(duì)胰腺組織產(chǎn)生氧化應(yīng)激、纖維化和細(xì)胞死亡等有害影響[15]。

2 DOX介導(dǎo)的心臟毒性

DOX在體內(nèi)代謝時(shí)產(chǎn)生了一種稱為7-deoxyaglycone的代謝產(chǎn)物（圖1A），這種代謝產(chǎn)物對(duì)脂類有高度的親和力[16]。由于心肌細(xì)胞線粒體內(nèi)膜含有相對(duì)較多的心肌磷脂，因此，DOX進(jìn)入心臟后易在心肌細(xì)胞線粒體中蓄積，導(dǎo)致心臟毒性。DOX引起的急性心臟毒性主要出現(xiàn)在用藥早期，具體表現(xiàn)為心律失常、心功能紊亂、心肌肥大、早期心臟纖維化，這可能是導(dǎo)致左心室功能受損的重要機(jī)制[17]；長期用藥可能導(dǎo)致不可逆的慢性中毒，DOX進(jìn)入機(jī)體后，除了作用于腫瘤細(xì)胞，心臟作為其毒副作用的靶向器官易受到攻擊，造成鐵紊亂、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞自噬和鈣超載。此外，DOX蓄積于心肌細(xì)胞的線粒體中，然后在電子傳遞鏈上產(chǎn)生過量的活性氧自由基，這些活性氧自由基使線粒體出現(xiàn)氧化損傷，這些表現(xiàn)可形成促凋亡信號(hào)誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡，從而產(chǎn)生嚴(yán)重的心臟毒性，臨床上表現(xiàn)為各種心律不齊、心室功能損傷（圖1B）[18]。DOX的心臟毒性已經(jīng)嚴(yán)重地限制了其在臨床上的應(yīng)用，所以尋找降低DOX心臟毒性的方法很有必要。

圖 1 DOX及其代謝產(chǎn)物7-deoxyaglycone的結(jié)構(gòu)與其介導(dǎo)的心臟毒性Fig. 1 Structures of DOX and its metabolite 7-deoxyaglycone and mechanism of cardiotoxicity caused by DOX

3 白藜蘆醇對(duì)DOX心臟毒性的保護(hù)作用

白藜蘆醇化學(xué)名為3,4,5-三羥基二苯乙烯，分子式為C14H12O3，是一種羥基二苯乙烯類化合物，屬于單寧質(zhì)多酚[19]。它在植物界分布較廣，存在于花生、葡萄、虎杖和桑葚等多種植物中。自然界中的白藜蘆醇有順式、反式白藜蘆醇和順式、反式白藜蘆醇苷4 種存在形式。而植物中白藜蘆醇主要以反式構(gòu)象存在，且反式白藜蘆醇苷的含量要遠(yuǎn)高于反式白藜蘆醇的含量。白藜蘆醇的純品為無色針狀結(jié)晶，熔點(diǎn)256～257 ℃、升華點(diǎn)261 ℃，難溶于水，對(duì)光不穩(wěn)定，易溶于丙酮、乙醚等有機(jī)溶劑。白藜蘆醇具有廣泛的生理藥理學(xué)作用，其中主要包括抗炎、抗腫瘤、抗氧化應(yīng)激損傷、保護(hù)心腦血管、抑制血小板聚集、調(diào)節(jié)血脂以及防止動(dòng)脈粥樣硬化等[20]。由于其具有這些顯著的特點(diǎn)，因而在最近幾年，白藜蘆醇在相關(guān)的活性功能研究中備受關(guān)注。目前研究較為成熟的是白藜蘆醇的心血管系統(tǒng)保護(hù)作用，其對(duì)DOX造成的心肌損傷有一定的保護(hù)作用。有報(bào)道稱白藜蘆醇與DOX聯(lián)合使用可預(yù)防DOX誘導(dǎo)的心臟毒性，并可在體內(nèi)和體外對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生協(xié)同作用，可逆轉(zhuǎn)DOX長期服用產(chǎn)生的耐藥性[21]。白藜蘆醇在對(duì)抗多藥耐藥方面也顯示出良好的作用，在輔助治療中與5-氟嘧啶等聯(lián)合使用，白藜蘆醇具有增加癌細(xì)胞化學(xué)敏感性的附加或協(xié)同作用[22]。白藜蘆醇可降低多藥耐藥風(fēng)險(xiǎn)，輔助藥物療效，被認(rèn)為是一種多靶點(diǎn)、應(yīng)用前景廣的抗癌藥物，在癌癥預(yù)防和治療中都有重要作用[23]。研究已證實(shí)，聯(lián)合應(yīng)用白藜蘆醇和DOX是提高DOX療效的有效策略，可促進(jìn)DOX在細(xì)胞內(nèi)的積累，降低腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥性，并可改善DOX心臟毒性[24]。

4 白藜蘆醇的抗DOX心臟毒性的作用機(jī)制

由于DOX的靶向心肌毒性作用，目前有關(guān)DOX毒副作用中，心肌損傷的研究最為廣泛。然而，盡管多年來研究方法已大幅改善，但仍不清楚DOX引起的心臟毒性的具體機(jī)制。現(xiàn)階段普遍認(rèn)為，活性氧簇（reactive oxygen species，ROS）和脂質(zhì)過氧化引起的氧化應(yīng)激增加、鈣超載、線粒體損傷和細(xì)胞凋亡等在DOX心臟毒性產(chǎn)生中起著重要作用。當(dāng)前主要的機(jī)制或假說有氧化應(yīng)激、鈣失調(diào)、線粒體損傷、細(xì)胞凋亡等[25-26]，這些因素之間相互聯(lián)系、互為因果，形成惡性循環(huán)，共同加速心臟毒性的發(fā)展。白藜蘆抗DOX的心臟毒性機(jī)制復(fù)雜，涉及多種信號(hào)通路，主要包括抑制自由基生成、鈣超載、線粒體功能障礙、凋亡和自噬等。白藜蘆醇對(duì)DOX心臟毒性的抑制涉及多種機(jī)制，以下簡要作出幾點(diǎn)歸納。

4.1 白藜蘆醇抑制DOX介導(dǎo)的心肌氧化應(yīng)激

關(guān)于DOX心臟毒性作用的機(jī)制，Chen Yumin等[27]認(rèn)為，當(dāng)細(xì)胞抗氧化系統(tǒng)的自由基清除作用與ROS生成之間處于失衡狀態(tài)時(shí)，就會(huì)產(chǎn)生氧化應(yīng)激。煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate，NADPH）氧化酶在氧化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和DOX誘發(fā)的心肌病的進(jìn)展中起重要作用[28]。DOX進(jìn)入心肌細(xì)胞后，DOX中醌結(jié)構(gòu)部分被還原為半醌，半醌自由基轉(zhuǎn)換為C環(huán)。經(jīng)過一系列電子傳遞過程生成超氧陰離子自由基（O2-·）、過氧化氫（H2O2）和羥自由基（·OH）等（圖2）。此外，研究證明蒽環(huán)類藥物對(duì)鐵的親和力非常高，蒽環(huán)類藥物能與鐵生成蒽環(huán)類-鐵復(fù)合物，這個(gè)復(fù)合物還原氧產(chǎn)生ROS，隨后導(dǎo)致游離自由基的生成[23]。這些自由基可以引起線粒體、微粒體脂質(zhì)過氧化，對(duì)多種細(xì)胞產(chǎn)生強(qiáng)烈的損傷作用（氧化應(yīng)激）[29]。氧化應(yīng)激使細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，降低膜的流動(dòng)性，增加通透性，從而影響細(xì)胞膜的生物調(diào)節(jié)功能及離子轉(zhuǎn)運(yùn)功能，導(dǎo)致心臟內(nèi)多種亞細(xì)胞變化，包括心肌細(xì)胞支架結(jié)構(gòu)完整性的喪失，同時(shí)其還能降低抵抗自由基毒性水平的抗氧化劑濃度，造成心肌細(xì)胞損傷[26]。白藜蘆醇通過減少ROS生成、增加Mn-SOD和沉默信息調(diào)節(jié)因子1（silence information regulator 1，SIRT1）活性以及線粒體膜電位的極化來改善線粒體功能[8]；同時(shí)，白藜蘆醇可以抑制NADPH和5’-二磷酸腺苷-Fe3+-依賴的脂質(zhì)過氧化；最后白藜蘆醇顯著上調(diào)核因子E2相關(guān)因子2靶基因NADPH的轉(zhuǎn)錄：醌氧化還原酶1、谷氨酰胺半胱氨酸合成酶、血紅素氧合酶-1，可減輕細(xì)胞氧化應(yīng)激[30]；此外，白藜蘆醇（20 mg/kgmb）連續(xù)作用大鼠6 周，大鼠心肌脂質(zhì)過氧化作用降低，且增加了心臟的抗氧化性，為白藜蘆醇對(duì)DOX氧化應(yīng)激的保護(hù)作用提供了新的證據(jù)[31]。

圖 2 DOX在電子傳遞鏈上的代謝過程Fig. 2 Metabolic process of DOX in the electron transport chain

4.2 白藜蘆醇抑制DOX介導(dǎo)的心肌鈣超載

正常情況下，胞內(nèi)Ca2+濃度顯著低于胞外Ca2+濃度，胞內(nèi)Ca2+主要儲(chǔ)存于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體。心肌損傷伴隨著Ca2+從細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器的釋放或跨細(xì)胞膜的進(jìn)入導(dǎo)致Ca2+超負(fù)荷[32-33]。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中有兩種類型的Ca2+釋放通道：Ryanodine受體（ryanodine receptors，RYRs）和三磷酸肌醇受體（inositol 1,4,5-trisphosphate receptors，InsP3Rs）通道，Ca2+可以通過激活RYRs或InsP3Rs來進(jìn)一步促進(jìn)Ca2+的釋放，這一過程稱為Ca2+誘導(dǎo)的Ca2+釋放[34]。因此，細(xì)胞質(zhì)的Ca2+超載可能觸發(fā)Ca2+的釋放，最終誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和凋亡。同時(shí)DOX還能刺激線粒體將Ca2+釋放至胞漿，加重鈣超載[35]。Catanzaro等[36]報(bào)道，白藜蘆醇通過穩(wěn)定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，保護(hù)H9c2細(xì)胞免受氧化還原酶誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，并顯著促進(jìn)SIRT1的激活，從而導(dǎo)致心臟細(xì)胞存活。白藜蘆醇被證實(shí)能夠通過上調(diào)SIRT1介導(dǎo)的去乙酰化來抑制氧化還原誘導(dǎo)的心臟毒性，從而改善心肌細(xì)胞的鈣循環(huán)[37]。鈣穩(wěn)態(tài)的紊亂是一種參與氧化還原作用的機(jī)制。DOX的主要代謝物通過改變肌漿網(wǎng)的固鈣能力來改變肌漿網(wǎng)干擾肌漿網(wǎng)Ca2+-ATPase（sarcoplasmic reticulum Ca2+-ATPase，SERCA）2功能，刺激肌漿網(wǎng)釋放鈣[38]。DOX引起的S100A1的下調(diào)，進(jìn)而降低了大鼠SERCA2a的表達(dá)[39]，相比之下，白藜蘆醇處理后S100A1的上調(diào)顯著提高SERCA2a活性，這可能是心臟狀況改善的原因，白藜蘆醇主要通過SIRT1轉(zhuǎn)錄途徑影響SERCA2a表達(dá)，SIRT1是通過調(diào)節(jié)SERCA2a啟動(dòng)子活性參與心臟收縮力，S100A1增強(qiáng)Ca2+瞬態(tài)，通過抑制舒張期Ca2+超載，減少肌漿網(wǎng) Ca2+滲漏，從而調(diào)節(jié)心臟功能[34]。

4.3 白藜蘆醇抑制DOX介導(dǎo)的心肌線粒體損傷

線粒體存在于除紅細(xì)胞外的所有細(xì)胞中，維持著細(xì)胞內(nèi)鈣和氧化還原反應(yīng)的平衡，線粒體是受蒽環(huán)類藥物影響最大的細(xì)胞器[40]，原因之一就是蒽環(huán)類藥物與線粒體內(nèi)膜的心磷脂幾乎不可逆地形成一種復(fù)合物。而電子傳遞鏈的蛋白質(zhì)正常工作時(shí)需要結(jié)合磷脂，但由于蒽環(huán)類藥物破壞磷脂蛋白，因此會(huì)抑制呼吸鏈，導(dǎo)致線粒體代謝功能的下降[18]。線粒體是產(chǎn)生ROS的關(guān)鍵場所，使線粒體極易受到ROS的攻擊，導(dǎo)致線粒體內(nèi)外膜發(fā)生脂質(zhì)過氧化損傷[41]。此外，DOX可誘導(dǎo)線粒體DNA損傷[42]和線粒體Ca2+紊亂[43]等，H9c2細(xì)胞模型實(shí)驗(yàn)表明，白藜蘆醇可以通過抑制細(xì)胞損傷、穩(wěn)定線粒體、激活SIRT1通路來預(yù)防DOX誘導(dǎo)的心臟毒性[44]。白藜蘆醇可增強(qiáng)大鼠心肌抗氧化性，防止氧化應(yīng)激反應(yīng)[45]。因此，白藜蘆醇在抑制DOX介導(dǎo)的心肌線粒體損傷、維持線粒體穩(wěn)定性方面起著重要的作用[46]。

4.4 白藜蘆醇抑制DOX介導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡

體外心肌細(xì)胞5 μmol/L DOX和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在20 mg/kgmbDOX作用下，可導(dǎo)致心肌細(xì)胞的大量凋亡。DOX引起的細(xì)胞調(diào)亡與Bcl-2、Bax蛋白的表達(dá)上調(diào)和p53上調(diào)凋亡調(diào)控因子α的表達(dá)下調(diào)有關(guān)，并激活Caspases-9和Caspases-3和多腺苷二磷酸核糖聚合酶[47]。DOX誘導(dǎo)小鼠心臟衰竭并激活了MEK1/2-ERK1/2級(jí)聯(lián)反應(yīng)，增加了心肌細(xì)胞H9c2細(xì)胞的ERK1/2磷酸化[48]。在正常細(xì)胞中p53蛋白含量較低，當(dāng)DNA損傷時(shí)，p53在氨基和羧基末端結(jié)構(gòu)域的多個(gè)殘基上被幾種不同的蛋白激酶磷酸化，導(dǎo)致p53在細(xì)胞質(zhì)中積累和p53的反式激活，p53依賴的細(xì)胞凋亡涉及許多靶基因，包括絲裂原活化蛋白激酶家族和Bcl-2家族蛋白。Bcl-2家族由促凋亡蛋白（Bax、Bak、Bid和Bad）和抗凋亡蛋白（Bcl-2和Bcl-xL）組成，p53的表達(dá)量增加與Bcl-2的下調(diào)和Bax的上調(diào)相關(guān)。凋亡信號(hào)級(jí)聯(lián)導(dǎo)致Bcl-2和Bax的比例明顯降低，p53可與Bcl-xL蛋白結(jié)合，引起p53和Bcl-2蛋白的構(gòu)象改變，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡[34]。SIRT1表達(dá)的下調(diào)與氧化還原酶誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡有關(guān)，研究表明，在DOX處理后，SIRT1的表達(dá)降低，同時(shí)觀察到白藜蘆醇預(yù)處理增加了SIRT1的表達(dá)，顯著減弱了DOX誘導(dǎo)的凋亡[49]。此外，5 μmol/L DOX作用H9c2細(xì)胞24 h建立DOX毒性模型，DOX可上調(diào)H9c2細(xì)胞中p53和Bax的表達(dá)，下調(diào)Bcl-2的表達(dá)，白藜蘆醇增加細(xì)胞活力，還可以通過增加腺苷酸活化蛋白激酶磷酸化和減少p53表達(dá)來保護(hù)大鼠H9c2心肌細(xì)胞免受DOX誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，降低凋亡率[50]。因此，白藜蘆醇可抑制DOX介導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡。

4.5 白藜蘆醇調(diào)控DOX介導(dǎo)的心肌自噬失調(diào)

自噬被認(rèn)為是一個(gè)吞噬自身細(xì)胞質(zhì)蛋白或細(xì)胞器的過程，該過程是細(xì)胞質(zhì)成分（例如老化的蛋白質(zhì)和細(xì)胞器）的回收和降解。最近的研究表明自噬細(xì)胞死亡可能在DOX誘導(dǎo)的心肌功能障礙中起重要作用。研究表明，DOX處理后顯著抑制了心肌細(xì)胞核中自噬小泡的形成，且自噬相關(guān)蛋白LC3-II/LC-I的比例增加，表明DOX處理H9c2細(xì)胞自噬水平受損[4]。此外，DOX誘導(dǎo)的自噬與線粒體損害密切相關(guān)。總地來說，線粒體可以被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡、壞死和自噬過程的連接點(diǎn)。心肌自噬被認(rèn)為是一把“雙刃劍”，根據(jù)損傷類型和持續(xù)時(shí)間以及自噬活性的水平，自噬能在不利環(huán)境中提高腫瘤細(xì)胞對(duì)應(yīng)激的耐受能力，維持其生存；自噬又能在腫瘤發(fā)展的不同階段抑制其產(chǎn)生和轉(zhuǎn)移，甚至成為某些凋亡缺陷腫瘤細(xì)胞的死亡途徑[51]。白藜蘆醇對(duì)自噬的調(diào)控具有雙向性，已被證明既可以促進(jìn)自噬[52]，也可在某些特定情況下抑制自噬[53]。當(dāng)DOX觸發(fā)心肌細(xì)胞自噬時(shí)，白藜蘆醇通過抑制自噬來減弱心臟毒性，這可能是白藜蘆醇通過抑制核糖體蛋白S6激酶1的表達(dá)來抑制自噬[54]。當(dāng)DOX降低心肌細(xì)胞自噬時(shí)，白藜蘆醇可恢復(fù)受損的自噬功能，增加自噬[55]。此外，白藜蘆醇還能減輕糖尿病小鼠心肌細(xì)胞凋亡和氧化應(yīng)激損傷，通過SIRT1/Foxo1/Rab7軸恢復(fù)受損的自噬通量[56]。因此，白藜蘆醇可能恢復(fù)DOX誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞自噬的失調(diào)。

4.6 白藜蘆醇抑制DOX介導(dǎo)的心肌炎癥反應(yīng)

Toll樣受體（Toll-like receptors，TLR）是先天免疫應(yīng)答的關(guān)鍵組成部分，是炎癥反應(yīng)的重要早期信號(hào)，DOX誘導(dǎo)后巨噬細(xì)胞浸潤明顯增強(qiáng)，單核細(xì)胞趨化因子1（monocyte chemoattractant protein 1，MCP-1）和細(xì)胞間黏附分子1（intercellular cell adhesion molecule-1，ICAM1）的表達(dá)增加[52]。促炎細(xì)胞因子白細(xì)胞介素1β（interleukin 1β，IL-1β）、白細(xì)胞介素6（interleukin-6，IL-6）、腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor α，TNF-α）和環(huán)氧化酶2（cyclooxygenase 2，COX2）表達(dá)增加，而抗炎性細(xì)胞因子白細(xì)胞介素10（interleukin-10，IL-10）表達(dá)受到DOX的抑制。炎性小體核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3，NLRP3）可調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞IL-10的產(chǎn)生，并有助于緩解DOX誘導(dǎo)的心臟毒性的病理生理過程，對(duì)抗NLRP3介導(dǎo)IL-1β相關(guān)的炎癥反應(yīng)。炎癥因子IL-1β受體激活與核因子κB（nuclear factor κB，NF-κB）通路的激活呈正相關(guān)，NF-κB信號(hào)通路誘導(dǎo)產(chǎn)生的促炎因子、趨化因子、黏附因子以及產(chǎn)生次級(jí)炎癥介質(zhì)的酶COX2、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）和誘生型一氧化氮合酶（inducible NOS，iNOS）。研究表明，促炎介質(zhì)NO和iNOS水平增加，NF-κB p65表達(dá)增加，繼而產(chǎn)生的炎癥反應(yīng)參與DOX介導(dǎo)的心臟毒性[53]。研究報(bào)道，白藜蘆醇可通過降低心肌TNF-α水平，下調(diào)TLR-4和iNOS蛋白表達(dá)，從而發(fā)揮抗炎作用。對(duì)NF-κB炎癥通路研究發(fā)現(xiàn)，白藜蘆醇可促進(jìn)NF-κB脫乙酰作用，抑制NF-κB炎癥通路，減少炎性細(xì)胞因子IL-6、iNOS和TNF-α的產(chǎn)生[56]。此外，白藜蘆醇是一種有效的化學(xué)增敏劑，可通過NF-κB和信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活蛋白途徑發(fā)揮作用[57]。

4.7 白藜蘆醇抑制DOX介導(dǎo)的心肌纖維化

DOX心臟毒性的作用機(jī)制復(fù)雜，具體關(guān)鍵性靶向作用機(jī)制尚不明確，但DOX介導(dǎo)的心肌損傷最終后果是導(dǎo)致心肌細(xì)胞凋亡和壞死，繼而心肌細(xì)胞被纖維組織取代，形成心肌纖維化[58]。研究表明，經(jīng)20 mg/kgmbDOX處理后，大鼠左室心肌出現(xiàn)大量心肌碎裂和肌原纖維溶解，白藜蘆醇可改善DOX誘導(dǎo)的心肌纖維化，DOX不僅上調(diào)了轉(zhuǎn)化生長因子1β基因的表達(dá)，還增加了纖維化標(biāo)志物的含量，誘導(dǎo)了大量膠原纖維在左室組織沉積，而DOX與白藜蘆醇的結(jié)合改善了纖維化效應(yīng)[57]。同時(shí)，白藜蘆醇對(duì)醋酸去氧皮質(zhì)酮處理大鼠的心血管重構(gòu)也有抗纖維化作用。白藜蘆醇和DOX的組合顯著減弱了DOX誘導(dǎo)的心臟毒性，并上調(diào)了血管內(nèi)皮生長因子B（vascular endothelial growth factor B，VEGF-B），白藜蘆醇減弱了siRNA對(duì)VEGF-B的抑制作用，從而對(duì)DOX處理的心肌細(xì)胞起保護(hù)作用，表明白藜蘆醇通過上調(diào)VEGF-B減輕了DOX誘導(dǎo)的心臟毒性[8]。

5 結(jié) 語

天然產(chǎn)物尤其是食源性活性成分，已成為當(dāng)代社會(huì)營養(yǎng)保健和健康管理的選擇趨勢，有著巨大的發(fā)展?jié)摿涂臻g。我國食材資源豐富，有著悠久的養(yǎng)生歷史，在心肌保護(hù)功能性食品的研發(fā)方面有一定的優(yōu)勢和獨(dú)特之處。DOX劑量依賴性的心肌毒性，其作用機(jī)制多樣，天然產(chǎn)物活性成分白藜蘆醇可通過抗氧化應(yīng)激、調(diào)節(jié)心肌細(xì)胞鈣超載、抑制細(xì)胞自噬及凋亡、減輕線粒體損傷等多靶點(diǎn)效應(yīng)，防治和減輕DOX引起的心臟毒性反應(yīng)。因此天然產(chǎn)物有效成分白藜蘆醇與DOX聯(lián)用，可為抗腫瘤藥物心肌毒性作用的營養(yǎng)干預(yù)與治療提供新的參考，二者聯(lián)合應(yīng)用可作為一種新策略降低化療藥物帶來的毒副作用，改善患者腫瘤治療的預(yù)后，提高生活質(zhì)量。然而目前，白藜蘆醇的心肌保護(hù)作用機(jī)理尚不明確，如白藜蘆醇對(duì)S100A1蛋白的調(diào)控機(jī)制仍需要進(jìn)一步的研究。此外，未來的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，可通過白藜蘆醇在惡性腫瘤動(dòng)物模型中作用及其與其他化療藥物比較研究，探尋白藜蘆醇營養(yǎng)干預(yù)與臨床應(yīng)用的可能。最后，關(guān)于白藜蘆醇對(duì)DOX誘導(dǎo)的心肌保護(hù)作用大多在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)階段，其在臨床上研究尚淺。因此將白藜蘆醇開發(fā)成為有效的手段，用以保護(hù)成千上萬的癌癥患者在接受化療時(shí)對(duì)抗非靶向引起的心臟毒副作用，并挖掘其潛在效用，值得進(jìn)一步研究。