試紙法在食品安全快速檢測(cè)中的應(yīng)用研究

◎ 黃 潔，何金珊，陳文杰，邵偉偉

（1.湖北省阿克瑞德檢驗(yàn)檢測(cè)有限公司，湖北 武漢 430070；2.上海百邁博制藥有限公司，上海 201210）

隨著全球工業(yè)生產(chǎn)力的全面釋放，食品工業(yè)發(fā)展迅速，但目前食品安全事件頻發(fā)，食品安全管理成為現(xiàn)階段急需解決的關(guān)鍵難題[1]。為有效防范食品中重金屬和添加劑含量超標(biāo)、農(nóng)獸藥殘留及微生物污染等問(wèn)題，需要對(duì)食品生產(chǎn)、加工及流通進(jìn)行全程監(jiān)控，食品安全分析與檢測(cè)是控制食品污染及監(jiān)督的重要手段，食品中存在許多組分復(fù)雜及干擾雜質(zhì)，快速現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)成為分析食品中特定殘留物及組分的重要措施之一，同樣也成為為研究難點(diǎn)問(wèn)題[2]。依據(jù)我國(guó)目前現(xiàn)行的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，食品安全檢測(cè)需在具備資質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，常見(jiàn)檢測(cè)技術(shù)包括高效液相色譜法、氣相色譜法以及液相色譜法等，這些技術(shù)應(yīng)用范圍廣、選擇性強(qiáng)、可用于多殘留分析及定性定量。但在檢測(cè)期間，由于儀器昂貴，處理復(fù)雜，需要專(zhuān)業(yè)操作人員，且無(wú)法滿足現(xiàn)場(chǎng)食品檢測(cè)的基本需求[3]。大樣本及快速篩查中，試紙法優(yōu)勢(shì)為快捷、便利，被廣泛用于初步篩查中，可保障檢測(cè)準(zhǔn)確率同時(shí)降低檢測(cè)成本，滿足對(duì)檢測(cè)結(jié)果基本要求。食品檢測(cè)領(lǐng)域中，提高試紙法應(yīng)用范圍，減少檢測(cè)環(huán)節(jié)，在節(jié)約資金基礎(chǔ)上提高檢測(cè)質(zhì)量，保障檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性、真實(shí)性成為目前學(xué)者研究重點(diǎn)內(nèi)容[4]。為進(jìn)一步深入探討及分析，文章就試紙法在食品安全快速檢測(cè)進(jìn)展如下總結(jié)。

1 食品分析環(huán)節(jié)試紙法應(yīng)用

隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展，人們對(duì)飲食、生活條件要求逐年提升，市場(chǎng)上食物種類(lèi)繁多，為保障食物口感，延長(zhǎng)保存期限，降低成本，食品生產(chǎn)廠家中食品添加劑超標(biāo)安全問(wèn)題頻發(fā)，影響人們的身體健康。對(duì)相關(guān)部門(mén)而言，其工作職責(zé)為保障食品安全性。但實(shí)際開(kāi)展過(guò)程中面臨著較多問(wèn)題，其中最常見(jiàn)的問(wèn)題是食物成分繁雜難以鑒定含量。眾所周知，食品檢測(cè)過(guò)程中所涉及內(nèi)容過(guò)于復(fù)雜，步驟繁瑣，成本高，短時(shí)間內(nèi)難以完成食品檢測(cè)任務(wù)，保障食品檢測(cè)質(zhì)量，無(wú)法確保相關(guān)行業(yè)長(zhǎng)久發(fā)展。隨著試紙法被廣泛用于食品質(zhì)量檢測(cè)環(huán)節(jié)中，檢測(cè)時(shí)間縮短，整體檢測(cè)準(zhǔn)確率顯著提升，檢測(cè)過(guò)程便捷，檢測(cè)成本較低[5]。目前，試紙法廣泛用于食品檢測(cè)中，如牛奶牛乳、注水肉、蘇丹紅等油溶性非食用色素以及水發(fā)水產(chǎn)品中雙氧水的快速檢測(cè)，均可廣泛應(yīng)用試紙法開(kāi)展檢測(cè)，保障食品檢測(cè)效率，提高檢測(cè)準(zhǔn)確性，并快速獲得檢測(cè)結(jié)果，保障食品檢測(cè)有效性和規(guī)范性。

2 試紙法在食品檢測(cè)中應(yīng)用

2.1 紙層析技術(shù)

紙層析技術(shù)又稱(chēng)為紙色譜法，20世紀(jì)40年代被廣泛用于食品檢測(cè)中，并取得顯著成效，1952年獲得“諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)”。20世紀(jì)末21世紀(jì)初期階段，紙色譜成為分析檢測(cè)領(lǐng)域中一類(lèi)常用技術(shù)，且涉及范圍較廣，包括有機(jī)物檢驗(yàn)至無(wú)機(jī)物檢驗(yàn)，定性發(fā)展至定量檢驗(yàn)[6]。濾紙為紙色譜反應(yīng)載體，將待測(cè)溶液通過(guò)點(diǎn)樣器毛細(xì)滴管添加在紙上，并將有機(jī)溶劑移動(dòng)。伴隨著移動(dòng)，溶液中的水、有機(jī)溶劑、待測(cè)溶液分解，在紙上互相分離形成斑點(diǎn)。定性檢測(cè)下，對(duì)各組分的移動(dòng)距離、已知樣品移動(dòng)距離進(jìn)行比較。

2.2 膠體金免疫層析法

膠體金標(biāo)記已成為目前一種常見(jiàn)的免疫標(biāo)記技術(shù)，被廣泛用于基礎(chǔ)研究以及檢疫檢驗(yàn)中[7]。膠體金免疫層析試紙條技術(shù)用于檢測(cè)大分子類(lèi)蛋白質(zhì)、小分子類(lèi)毒素等，操作簡(jiǎn)單，無(wú)需專(zhuān)業(yè)訓(xùn)練，攜帶方便，被用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。且相比較其他標(biāo)記物，毒性低，安全性高。目前糧油食品及飼養(yǎng)中，極易被黃曲霉毒素等微生物毒素污染，威脅人類(lèi)健康及畜禽生產(chǎn)。檸檬酸三鈉還原劑并制備膠體金，將金標(biāo)黃曲霉素B1單克隆抗體為探針，構(gòu)建膠體金免疫層析檢測(cè)體系，可用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。同時(shí)，對(duì)非法添加劑檢測(cè)使用中，可對(duì)牛奶、奶粉及飼料中三聚氰胺、牛奶新霉素快速檢測(cè)[8]，也可檢測(cè)水產(chǎn)品中獸藥氯霉素、孔雀石綠、硝基呋喃水平。食源性致病菌為食品安全重大隱患之一，如大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、單增李斯特菌等，通過(guò)高靈敏檢測(cè)，可有效阻斷致病菌傳播途徑。膠體金免疫層次試紙條技術(shù)被廣泛用于食品質(zhì)量及食品安全中，其臨床應(yīng)用上，為食品檢測(cè)工具發(fā)展提供合理依據(jù)[9]。

2.3 比色法

基于被測(cè)物質(zhì)自身顏色和添加試劑后所呈現(xiàn)的顏色，通過(guò)對(duì)溶液顏色深度觀察，或使用光度計(jì)測(cè)量，確定溶液中被測(cè)物質(zhì)的濃度。比色法具有直觀、快速及便捷的優(yōu)點(diǎn)，被用于大批樣品檢驗(yàn)中，并發(fā)揮著顯著作用。常見(jiàn)的比色法包括顯色快速、速測(cè)卡等[10]。顯色速測(cè)技術(shù)依據(jù)顯色反應(yīng)顏色變化快速分析目標(biāo)物，不同顯色反應(yīng)適用于不同目標(biāo)物。《食品中過(guò)氧化氫殘留物的測(cè)量鈦鹽比色法》（GB 5009.226—2016） 中，過(guò)氧化氫在酸性溶液中，與鈦離子生成穩(wěn)定橙色絡(luò)合物，吸光度、樣品過(guò)氧化氫含量呈正比[11]。通過(guò)將顯色反應(yīng)底物直接滴注在試紙條上，靚粉乙酸酯水解為乙酸、靚酚，能抑制有機(jī)磷、氨基甲酸脂類(lèi)農(nóng)藥，并改變催化、水解及變色過(guò)程。當(dāng)樣本中含有高劑量有機(jī)磷、氨基甲酸脂類(lèi)農(nóng)藥時(shí)則顯色卡變色，劑量越高，則反應(yīng)越明顯，目前被用于大批量篩選測(cè)試。比色法應(yīng)用期間，其顯色反應(yīng)對(duì)反應(yīng)條件依賴(lài)性較強(qiáng)，且檢測(cè)期間極易受到反應(yīng)條件影響。

2.4 酶聯(lián)免疫吸附法

酶聯(lián)免疫吸附法以酶與抗體、抗體共價(jià)結(jié)合并形成酶標(biāo)記復(fù)合物，與相應(yīng)抗原形成酶標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物，相應(yīng)底物在酶催化下形成有色產(chǎn)物，標(biāo)本中受檢物質(zhì)與顏色深度密切相關(guān)[12]。農(nóng)業(yè)部發(fā)布1025公告-6-2008《動(dòng)物性食品中萊克多巴胺藥物殘留檢測(cè)酶聯(lián)免疫吸附法》快速檢驗(yàn)方法中，萊克多巴胺與包被在微孔條的萊克多巴胺抗原競(jìng)爭(zhēng)酶標(biāo)記的萊克多巴胺抗體，洗板后酶標(biāo)板留下固定在微孔條上的萊克多巴胺抗原、酶標(biāo)萊克多巴胺抗體復(fù)合物，復(fù)合物與樣品萊克多巴胺呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)。經(jīng)底物反應(yīng)顯色后，可得到樣品中萊克多巴胺含量，整體操作簡(jiǎn)單，適用于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)[13]。技術(shù)領(lǐng)域中，被用于乳制品、動(dòng)物源性食品中篩查。由于酶聯(lián)免疫吸附法反應(yīng)時(shí)抗原抗體具有專(zhuān)一性，依據(jù)不同目標(biāo)物，所應(yīng)用檢測(cè)試劑、方法不同，難以廣泛應(yīng)用。同時(shí)，食品加工、前處理過(guò)程中抗原破壞后，則影響到檢測(cè)結(jié)果。

3 結(jié)語(yǔ)

隨著科學(xué)技術(shù)不斷進(jìn)步，食品安全檢驗(yàn)技術(shù)得到快速發(fā)展，整體檢測(cè)時(shí)間縮短，可有效保障食品安全檢測(cè)靈敏度及精確度。但在實(shí)際開(kāi)展中，仍存在一些問(wèn)題和矛盾，如對(duì)食品檢測(cè)期間，前處理步驟繁瑣，整體花費(fèi)時(shí)間較長(zhǎng)，難以滿足對(duì)大批量有害物質(zhì)地篩查。同時(shí)，基于快速檢測(cè)技術(shù)下，一旦存在靈敏度不足的問(wèn)題，將難以滿足對(duì)目標(biāo)衡量殘留檢測(cè)的需求。為此，隨著現(xiàn)代社會(huì)不斷發(fā)展，尋找新的信號(hào)標(biāo)記物，放大檢測(cè)信號(hào)，構(gòu)建新型檢測(cè)模式，提高檢測(cè)性能，已成為當(dāng)前食品檢驗(yàn)過(guò)程中亟待解決的重點(diǎn)難題。同時(shí)，檢測(cè)技術(shù)整體更新緩慢，無(wú)法滿足對(duì)新型食品中有害物質(zhì)檢測(cè)，依據(jù)現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)發(fā)展，無(wú)法滿足多種潛在有害殘留物質(zhì)檢測(cè)。對(duì)科研工作者而言，不斷探索、研究相關(guān)先進(jìn)檢測(cè)技術(shù)及方法，進(jìn)而保障食品安全性，有效構(gòu)建和諧社會(huì)。