血清纖維蛋白膠凝素-3在2型糖尿病患者合并頸動脈粥樣硬化中的應用價值

宗揚勇

江蘇省如皋市中醫院檢驗科，江蘇如皋 226500

糖尿病(DM)是最常見的慢性內分泌疾病，其中2型糖尿病(T2DM)是由患者胰島素分泌不足或胰島素抵抗引起的[1]，會對人體糖代謝方式產生影響。T2DM會影響人體的許多重要臟器，如心臟、血管、眼和腎臟等[2]，T2DM患者的主要死亡原因是心血管疾病。T2DM患者的高血糖狀態參與了微血管病變的發生、發展過程，大大增加了患者心臟病、腦卒中、高血壓和動脈粥樣硬化的風險[3]。頸動脈粥樣硬化(CAA)通常發生于T2DM患者動脈粥樣硬化的早期階段，且頸動脈內膜中層厚度(CIMT)常用于評估患者動脈粥樣硬化的程度，同時也是評價T2DM患者大血管病變的重要指標。人類血清纖維蛋白膠凝素-3(Ficolin-3)是凝集素補體激活途徑中分泌模式識別蛋白Ficolin家族的成員之一。Ficolin-3主要由膽管上皮細胞和肝細胞合成并釋放于膽汁中，隨后進入血液循環，血清Ficolin-3的平均水平約為18 μg/mL[4]。Ficolin-3可參與病原體識別及激活人甘露聚糖結合凝集素相關絲氨酸蛋白酶(MASP)的補體途徑[5]。有研究發現，慢性CAA患者血清Ficolin-3水平降低，Ficolin-3可作為血管性疾病的生物標志物[6]。本研究探討了T2DM患者血清Ficolin-3水平與CAA的相關性，分析了血清Ficolin-3對T2DM患者合并CAA的預測價值，以期為T2DM患者早期并發癥的篩查提供依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年1月至2019年1月在本院內分泌科住院的初次診斷為T2DM的患者112例，根據是否合并CAA分為單純T2DM組(64例)和T2DM合并CAA組(48例)。另選取同期健康體檢者120例為對照組。納入標準：(1)T2DM診斷符合《中國2型糖尿病防治指南(2013年版)》[7]的相關標準；(2)精神正常；(3)自愿參加本研究。排除標準：(1)1型糖尿病或繼發性糖尿病；(2)合并心臟疾病、肝膽疾病、腎臟疾病、惡性腫瘤等。本研究經本院醫學倫理委員會批準，所有研究對象均簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1基本資料收集 在電子病歷系統中獲取所有研究對象年齡、性別、身高、體質量、體質量指數(BMI)、吸煙史、飲酒史、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)等一般資料。

1.2.2CIMT檢測及CAA嚴重程度評估 采用日本東芝公司生產的SSA-660A高分辨率B型超聲診斷儀及匹配的12 MHz血管專用探頭對處于安靜狀態下的研究對象進行CIMT檢測及CAA嚴重程度評估。3次測量研究對象左側和右側頸總動脈分叉遠端1.0 cm處的內膜中層厚度，計算CIMT平均值。CIMT正常為平均CIMT<1.0 mm；CIMT增厚為平均CIMT≥1.0 mm；斑塊為血管內壁出現比鄰近區域厚100%的腔內突出物。CAA嚴重程度分級：0級為CIMT無增厚且內膜光滑；1級為CIMT無增厚，內膜不光滑，但無斑塊形成；2級為1.0 mm≤CIMT≤1.2 mm，無斑塊形成；3級為存在1個斑塊；4級為存在2個及以上的斑塊。

1.2.3生化指標檢測 于清晨空腹抽取研究對象靜脈血至一次性真空采血管中，并在2 h內完成生化指標檢測。糖化血紅蛋白(HbA1c)使用美國貝克曼庫爾特公司生產的AU5800全自動生化分析儀及配套試劑進行檢測；丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、清蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)均采用德國西門子公司生產的ADVIA2400全自動生化分析儀及配套試劑進行檢測。

1.2.4血清Ficolin-3水平檢測 采用美國R&D Systems公司生產的酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒檢測血清Ficolin-3水平，操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。

2 結 果

2.1基本資料、生化指標及血清Ficolin-3水平在3組間比較 與對照組比較，單純T2DM組、T2DM合并CAA組HbA1c、TC、TG水平升高，血清Ficolin-3水平降低，差異均有統計學意義(P<0.05)。其余各指標在3組間比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 基本資料、生化指標及血清Ficolin-3水平在3組間比較

2.2不同CIMT及CAA嚴重程度者血清Ficolin-3水平比較 根據CIMT檢測結果，將全部研究對象分為CIMT正常141例、CIMT增厚59例和斑塊32例，對應的血清Ficolin-3水平分別為(18.95±5.02)、(17.32±5.74)、(16.36±4.86)μg/mL，兩兩比較，差異均有統計學意義(P<0.05)。將全部研究對象按CAA嚴重程度分為0級106例，1級35例，2級59例，3級23例，4級9例，對應的血清Ficolin-3水平分別為(18.97±5.56)、(18.33±4.89)、(17.06±5.17)、(16.21±5.32)、(16.06±4.11)μg/mL，隨著CAA嚴重程度分級升高，血清Ficolin-3水平逐漸降低，差異均有統計學意義(P<0.05)。

2.3T2DM患者合并CAA的危險因素分析 單因素Logistic回歸分析結果顯示，年齡、性別、體質量、BMI、飲酒≥10年、吸煙≥10年、HbA1c、TC、TG、HDL-C、LDL-C、Ficolin-3水平是T2DM患者合并CAA的影響因素(P<0.05)。多因素Logistic回歸分析結果顯示，飲酒≥10年、吸煙≥10年、BMI、HbA1c、LDL-C水平升高是T2DM患者合并CAA的獨立危險因素(P<0.05)，血清Ficolin-3、HDL-C水平升高是T2DM患者合并CAA的獨立保護因素(P<0.05)。見表2。

表2 T2DM患者合并CAA的危險因素分析

續表2 T2DM患者合并CAA的危險因素分析

2.4血清Ficolin-3對 T2DM患者合并CAA的診斷價值 ROC曲線分析結果顯示，血清Ficolin-3診斷T2DM患者合并CAA的曲線下面積(AUC)為0.599,最佳截斷值為17.40 μg/mL，靈敏度為70.83%，特異度為50.97%，約登指數為0.218。見圖1。

圖1 血清Ficolin-3診斷T2DM患者合并CAA的ROC曲線

3 討 論

動脈粥樣硬化引起的動脈狹窄和阻塞會導致組織或器官血液供應不足，引起組織或器官缺血、缺氧、壞死。已有較多研究表明，T2DM是動脈粥樣硬化發生、發展過程中的高危因素[8-9]。正常血管內皮可通過產生一氧化氮(NO)保持血流的穩定性，NO還可使血管壁的平滑肌松弛，防止紅細胞黏附于血管壁[10]。在血糖升高和胰島素抵抗的情況下，血管內皮細胞產生的NO減少，收縮血管物質增多，促進了動脈粥樣硬化的形成[11]。有研究證實，胰島素抵抗在動脈粥樣硬化進展中起著重要作用[12]。頸動脈為腦組織主要的供血血管，CAA的發生可導致大腦血液供應減少，引發腦卒中。因此，早期發現和治療CAA對T2DM患者至關重要。

通過多因素Logistic回歸分析發現，飲酒≥10年、吸煙≥10年、BMI、HbA1c、LDL-C水平升高是T2DM患者合并CAA的獨立危險因素(P<0.05)，血清Ficolin-3、HDL-C水平升高是T2DM患者合并CAA的獨立保護因素(P<0.05)，這與以往研究結果相符[8-11]。動脈粥樣硬化形成的基本機制包括血管內皮功能障礙、泡沫細胞形成、脂質沉積及血管壁的免疫活化[11]。而肥胖、酒精、尼古丁、血糖、脂蛋白等均可促進或直接參與脂質沉積，從而形成斑塊。在本研究中，單純T2DM組與T2DM合并CAA組血清Ficolin-3水平均低于對照組；此外，隨著CAA嚴重程度的升高，血清Ficolin-3水平逐漸降低。Ficolin-3是FCN3基因的表達產物，可在肝臟和肺組織中合成，同時也可在其他多種組織中誘導表達[5]。在先天免疫的補體系統中，血清Ficolin-3已被證明是水平最高且最有效的識別分子，可通過調理作用、白細胞的化學吸引和細胞活化，以及激活先天免疫和適應性免疫參與宿主對微生物的防御反應[13]。有文獻報道，血清Ficolin-3還可通過暴露宿主組織中隱藏的配體，參與死亡細胞和細胞碎片的清除[14]。有研究在腦卒中急性期患者中觀察到了血清Ficolin-3水平下降[15]。在CAA的發生過程中，脂肪、膽固醇、鈣和其他物質的沉積物聚積在動脈血管內壁，形成血凝塊，這些血凝塊會阻塞血液流動或破裂后進入血液循環；CAA的斑塊主要包括膽固醇結晶、泡沫細胞、無定型壞死組織、淋巴細胞等，而血清Ficolin-3水平下降可能導致上述物質的清除減少，引起CAA的形成。進一步分析血清Ficolin-3對T2DM患者合并CAA的診斷價值，結果顯示，其AUC為0.599，最佳截斷值為17.40 μg/mL，靈敏度為70.83%，特異度為50.97%，說明血清Ficolin-3對T2DM患者合并CAA具有一定的診斷價值，可用于臨床輔助診斷。

綜上所述，T2DM及T2DM合并CAA患者血清Ficolin-3水平較健康體檢者明顯降低，且血清Ficolin-3水平隨著CAA的嚴重程度升高而逐漸降低。血清Ficolin-3水平升高是T2DM患者合并CAA的獨立保護因素，且其還對T2DM患者合并CAA具有一定的診斷價值。