榛葉莢蒾化學成分的研究

馮丹萍 范 敏

大理大學藥學院，云南 大理 671000

莢蒾屬(Viburnum)為忍冬科(Caprifoliaceae)一大屬，全球約有200種，包括灌木和喬木，主要分布于北半球溫帶和亞熱帶地區。我國共有74種，廣泛分布于全國各省區，以西南部種類最多。該屬多種植物在民間作為傳統藥物使用，用于咳嗽、痢疾、風濕性關節炎、類風濕性關節炎以及腫脹等多種疾病的治療[1]。《全國中草藥匯編》中記載，莢蒾屬植物有祛風清熱、祛瘀消腫、散瘀活血之功效。已有研究[2]表明該屬植物中的化學成分類型多樣，富含二萜類、三萜類、環烯醚萜類、單萜類、倍半萜類、黃酮類和木脂素類等成分，其中多個化合物具有良好的抗腫瘤和抗氧化活性，尤其vibsanin型的二萜具有良好的抗腫瘤活性[3]。基于此，近年來莢蒾屬植物多樣的藥理活性及其獨特的化學成分引起科研工作者的密切關注。榛葉莢蒾ViburnumcorylifoliumJ. D. Hooker et Thomson為落葉灌木，分布于四川、廣西東北部、貴州、湖北西部、陜西南部及印度東北部等地[4]。國內外對該植物化學成分的研究報道較少，截止目前，僅本課題組前期從中發現了6個化合物[5]。為進一步探索榛葉莢蒾的化學成分，以便為利用該植物資源提供物質基礎指導，本課題組對其甲醇提取物進行了系統研究，共分離鑒定出8個化合物，包括2個三萜、2個黃酮及3個酚酸類化合物。

1 儀器和材料

1D和2DNMR在Bruker AM-400，DRX-500及Bruker Avance III 600核磁共振儀上測定，TMS作為內標，δ為ppm,J為Hz。拌樣及柱層析用硅膠(100～200，200～300 目)，為青島海洋化工廠生產；反相填充材料RP-18為40～60 μm, Merk公司生產；MCI填充材料為MCI-gel CHP-20P；MPLC 采用EZ Purifier System 液相色譜儀(pump manager P03, detector modules P02, and fraction collector P01)。HPLC分析儀器為安捷倫1200型高效液相色譜儀，譜柱為Agilent 公司的Zorbax SB-C18 column (5 μm, 10 mm × 250 mm)。半制備色譜柱為Agilent 公司的Zorbax SB-C18, 9.4 mm × 25 cm column。顯色劑為7%濃硫酸的乙醇溶液，噴灑后適當加熱。

榛葉莢蒾V.corylifoliumJ. D. Hooker et Thomson地上部分于2017年6月采自云南省文山州，并由中國科學院昆明植物所成曉研究員鑒定。植物標本存放于大理大學生藥學教研室。

2 提取與分離

干燥的榛葉莢蒾地上部分7.5 kg，粉碎后用甲醇在室溫下冷浸提取三次，每次24 h，合并提取液，減壓蒸餾除去有機溶劑后得粗提物，將該粗提物分配于水中，用乙酸乙酯萃取三次，得188 g浸膏。此浸膏經MPLC(MCI gel)柱層析分離，采用甲醇-水(10%→100%)系統進行梯度洗脫，減壓濃縮后得到5個餾分純化，得到化合物1(26 mg)和5(16 mg)。餾分II經過多次正相硅膠柱層析、半制備高壓液相、以及Sephadex LH-20(純甲醇)分離得化合物3(3 mg)，4(58 mg)和6(6 mg)。餾分III經過反復正硅膠柱層析及Sephadex LH-20(氯仿/甲醇，1∶1)分離得到化合物2(18 mg)，7(7 mg)和8(2 mg)。

3 結構鑒定

化合物1: 無色晶體，分子式C30H50O2，ESI-MSm/z: 465[M+Na]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δH4.77 (1H, s, H-26a), 4.50 (1H, s, H-26b), 3.16 (1H, m, H-3), 0.92 (3H, s, Me-23), 0.69 (3H, s, Me-24), 0.58 (3H, s, Me-24);13C NMR (100 MHz, CDCl3): δC36.8 (t, C-1/C-20), 27.1 (t, C-2/C-19), 78.2 (d, C-3/C-21), 38.9 (s, C-4/C-22), 57.1 (d, C-5/C-17), 22.1 (C-6/C-16), 38.7 (t, C-7/C-15), 148.2 (s, C-8/C-14), 54.5 (d, C-9/C-13), 38.9 (s, C-10/C-18), 23.7 (t, C-11/C-12), 27.8 (q, Me-23/Me-30), 15.0 (q, Me-24/Me-29), 14.1 (q, M-25/Me-28), 106.2 (d, C-26/ C-27)。以上數據與文獻[6]一致，鑒定該化合物為α-芒柄花醇。

化合物2: 白色無定形粉末，分子式C29H52O3，ESI-MSm/z: 449[M+H]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δH4.03 (1H, m, H-3a), 3.30 (s, H-6a), 1.01 (3H, s, Me-19), 0.87 (3H, d,J= 6.5 Hz, Me-21), 0.82 (3H, d,J= 6.9, Me-27), 0.80 (3H, t,J= 7.1, 7.1 Hz, Me-24), 0.78 (3H, d,J= 6.9, 26-Me), 0.59 (3H, s, Me-18);13C NMR (100 MHz, CDCl3): δC36.0 (t, C-1), 30.2 (t, C-2), 67.1 (d, C-3), 24.0 (t, C-4), 75.7 (s, C-5), 75.3 (d, C-6), 25.8 (t, C-7), 45.3 (d, C-8), 55.9 (d, C-9), 37.8 (s, C-10), 28.8 (t, C-11), 39.9 (t, C-12), 42.4 (s, C-13), 56.0 (d, C-14), 30.2 (t, C-15), 32.1 (t, C-16), 45.7 (d, C-17), 11.9 (q, C-18), 19.6 (q, C-19), 28.3 (d, C-20), 18.8 (q, C-21), 33.5 (t, C-22), 34.6 (t, C-23), 39.9 (d, C-24), 21.0 (t, C-25), 11.8 (q, C-26), 22.8 (d, C-27), 16.4 (q, C-28), 18.5 (q, C-29)。以上數據與文獻[7]一致，鑒定該化合物為sitostane-3β-5α-6β-triol。

化合物3: 黃色無定形粉末，分子式C21H20O11，ESI-MSm/z: 471[M+Na]+。1H NMR (500 MHz, C5D5N): δH13.3 (1H, s, HO-5), 8.43 (2H, d,J= 8.6 Hz, H-2′/H-6′), 6.70 (2H, br s, H-3′/H-5′), 6.37 (1H, d,J= 3.0 Hz, H-6), 5.77 (m, H-1 glc);13C NMR (125 MHz, C5D5N): δC157.5 (s, C-2), 135.5 (s, C-3), 178.8(s, C-4), 105.3 (s, C-4a), 162.9 (s, C-5), 99.9 (d, C-6), 166.0 (s, C-7), 94.7 (d, C-8), 157.6 (s, C-8a), 122.0 (s, C-1′), 131.9 (d, C-2′/C-6′), 116.1 (d, C-3′/5′), 161.7 (s, C-4'), 104.2 (d, C-1 glc), 76.2 (d, C-2 glc), 78.6 (d, C-3 glc), 71.6 (d, C-4 glc), 79.0 (d, C-5 glc), 62.8 (t, C-6 glc)。以上數據與文獻[8]一致，鑒定該化合物為山奈酚3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物4: 黃色無定形粉末，分子式C21H20O11，ESI-MSm/z: 471[M+Na]+。1H NMR (400 MHz, C5D5N): δH13.3 (1H, s, H-5), 5.46 (1H, s, aromatic proton), 1.45 (d,J= 5.6 Hz, Me-6′);13C NMR (100 MHz, C5D5N): δC157.8 (s, C-2), 135.3 (s, C-3), 179.2 (s, C-4), 105.5 (s, C-4a), 163.0 (s, C-5), 99.8 (d, C-6), 165.9 (s, C-7), 94.7 (d, C-8), 158.3 (s, C-8a), 117.2 (s, C-1′), 116.2 (d, C-2′), 147.4 (s, C-3′), 150.7 (s, C-4′), 116.6 (d, C-5′), 122.4 (d, C-6′) 100.0 (d, C-1 rha), 72.3 (d, C-2 rha), 72.7 (d, C-3 rha), 73.5 (d, C-4 rha), 72.2 (d, C-5 rha), 18.5 (q, C-6 rha)。以上數據與文獻[9]一致，鑒定該化合物為槲皮素-3-O-鼠李糖苷。

化合物5: 無色油狀物，分子式 C20H24O7，ESI-MSm/z: 399[M+Na]+。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δH6.97 (1H, d,J= 3.2 Hz, H-2), 6.83 (2H, d,J= 7.9 Hz, H-6), 6.67 (1H, d,J= 8.1 Hz, H-6′), 4.73 (1H, s, H-7), 3.90 (2H, d,J= 10.1 Hz, H-9);13C NMR (125 MHz, CDCl3): δC129.5 (s, C-1), 108.0 (d, C-2), 146.8 (s, C-3), 145.6 (s, C-4), 114.4 (d, C-5), 118.4 (d, C-6), 86.7 (d, C-7), 80.6 (s, C-8), 61.9 (t, C-9), 131.7 (s, C-1′), 110.9 (d, C-2′), 146.8 (s, C-3′), 144.2 (s, C-4′), 114.8 (d, C-5′), 121.4 (d, C-6′), 33.3 (t, C-7′), 50.2 (d, C-8′), 70.8 (t, C-9′)。以上數據與文獻[10]一致，鑒定該化合物為berchemol。

化合物6: 黃色無定形粉末，分子式C18H30O3，ESI-MSm/z: 295[M+H]+。1H NMR (400 MHz, C5D5N): δH7.78 (1H, dd,J= 15.5, 11.4 Hz, H-11), 6.34 (1H, d,J=15.5 Hz, H-12), 6.23 (1H, d,J= 11.4 Hz, H-10), 5.88 (1H, dt,J= 10.8, 7.6 Hz, H-9), 2.60 (1H, t, 2H, H-8), 2.50 (1H, m, H-14), 2.23 (1H, m, H-2), 1.74 (m, H-17), 1.64 (m, H-15), 1.26 (m, 2H, H-4, 5, 6, 7, 16), 0.78 (t, 3H,J= 6.6, H-18);13C NMR (100 MHz, C5D5N): δC179.8 (s, C-1), 33.3 (t, C-2), 25.8 (t, C-3), 31.7-29.2 (t, C-4,5,6,7,16), 28.5 (t, C-8), 142.7 (d, C-9), 127.5 (d, C-10), 137.1 (d, C-11), 130.3 (d, C-12), 200.4 (s, C-13), 41.31 (t, C-14), 24.6 (t, C-15), 22.8 (t, C-17), 14.2 (q, C-18)。以上數據與文獻[11]一致，鑒定該化合物為(9E,11Z)-13-oxo-9,11-octadecadienoic acid。

化合物7: 白色針晶，分子式C8H8O5，ESI-MSm/z: 207[M+Na]+。1H NMR (600 MHz, C5D5N): δH7.22 (2H, s, H-2/H-6), 3.62 (3H, s, H-Me);13C NMR (150 MHz, C5D5N): δC121.5 (s, C-1), 110.6 (d, C-2/C-6), 148.1 (s, C-3/C-5), 141.6 (s, C-4), 169.4 (s, C-4a), 162.9 (s, C=O), 52.1 (q, C-Me)。以上數據與文獻[12]一致，鑒定該化合物為沒食子酸甲酯。

化合物8: 白色無定形粉末，分子式 C9H10O3，ESI-MSm/z: 189 [M + Na]+。1H NMR (400 MHz, CD3COCD3): δH12.70 (1H, s, H-OH), 7.62 (1H, d,J= 9.0 Hz, H-6), 6.45 (1H, dd,J= 9.0, 2.5 Hz, H-5), 6.40 (1H, d,J= 2.5 Hz, H-3), 3.83 (3H, s, H-COMe), 2.55 (3H, s, H-Me);13C NMR (100 MHz, CD3COCD3): δC114.5 (s, C-1), 166.9 (s, C-2), 101.3 (d, C-3), 165.9 (s, C-4), 107.9 (d, C-5), 133.5 (d, C-6), 203.8 (s, C-1′), 55.9 (d, C-OMe), 26.2 (q, C-COMe)。以上數據與文獻[13]一致，鑒定該化合物為丹皮酚。

4 結論

莢蒾屬植物資源豐富，具有顯著的抗腫瘤[14]、抗氧化[15]、抗炎[16]、抗菌殺蟲[17]、降血糖[18]等生物活性。迄今為止，從該屬植物中已報道了140多種化學成分[19]，但目前僅對珊瑚樹、歐洲莢蒾、地中海莢蒾、南方莢蒾等少數幾種植物的提取物或單體進行了藥理作用研究，對榛葉莢蒾的化學成分研究較少，從中分離到的7-deacetyl suspensolide A aglycone具有較好的抗炎活性[5]。因此從榛葉莢蒾中尋找和發現抗炎活性成分，對該植物資源的研究和開發具有重要意義。

本實驗從榛葉莢蒾中分離得到8個已知化合物，其中食子酸甲酯(7)和丹皮酚(8)具有較好的抗炎活性[20-21]。進一步文獻調研發現，雖然從莢蒾屬植物中分離得到的化學成分種類豐富，但僅對其中的少部分成分進行了藥理活性研究，為了豐富對莢蒾屬的進一步認識，有必要對榛葉莢蒾中分離的化合物進行活性研究，以期為該屬植物的開發與利用提供依據。