兔病毒性出血癥及其診斷與防控

李雪源

（青海大學農牧學院 810016）

我國作為全球首位的養兔大國，兔存欄量居于世界第一。我國同樣也是兔病毒性出血癥病毒廣泛流行的地區之一，該病首次暴發于我國，并在短時間內對我國養兔業造成了毀滅性的打擊。雖目前，通過各種手段該疫病已經得到有效防控，但在2020年5月份我國四川省暴發了由新的兔病毒性出血癥病毒亞型所引起的非典型兔瘟，根據國外研究人員的研究結果發現目前采用的商品化兔瘟疫苗無法對該亞型提供完全保護，并有取代其他亞型的趨勢。

1 自然歷史及流行病學

在上世紀80年代，歐洲地區兔群由于一種未知名病毒感染導致大批量死亡，該病的特征是對，家兔和野兔中都具有極高的致死性和高度傳染性，這個病毒就是兔病毒性出血癥病毒(Rabbit haemorrhagic disease virus ，RHDV)。該病原第一次有記錄的暴發是于1984年的我國江蘇省，不到一年的時間便引起全國范圍超過十四億家兔的死亡，對我國養兔業造成了極大的損失。該病隨后于1986年在意大利暴發，并從意大利傳播到歐洲的其他國家和地區。到目前，該病原廣泛存在于全球的多個國家和地區并呈現地方流行性。

由于該病毒是無囊膜的單股正鏈RNA病毒，對外界環境具有較高的地方能力。因此RHDV致死的兔尸體是該病的主要傳染源。該病可以通過口、鼻等呼吸系統器官及消化系統器官傳播，且吸血昆蟲也是其重要的傳播媒介。健康動物可通過接觸感染動物以及病毒粒子污染的食物、水源、飼料及籠具器械等感染該病原。

2 臨床癥狀及病理變化

該病的潛伏期較短，通常為1～3d，大多數感染兔在體溫升高后的12～36h內便死亡，根據臨床癥狀的不同，可將該病分為急性型、亞急性型和慢性型三種類型，其中急性型最為常見。其中急性感染兔由于病程較短死亡較快，并不表現出明顯的臨床癥狀。部分能夠見到厭食、不喜動、結膜充血，并有角弓反張、麻痹和共濟失調等臨床癥狀。亞急性型感染家兔表現出類似但較弱的臨床癥狀，且大多數存活。

由于肝、肺和脾等實質臟器是該病原的主要靶器官，因此剖檢后主要的病理變化是由于細胞凋亡引起的急性肝炎和脾腫大，以及由于彌散性血管內凝血導致的包括肺、心、腎等多臟器的出血、淤血及堵塞。同時，疾病過程中伴隨有肝臟和腎臟的B淋巴細胞和T淋巴細胞的衰竭會導致免疫損傷并導致2～3d內死亡。

3 疾病診斷

臨床生產中，主要通過對發病兔的臨床癥狀和剖檢后的病理變化對該病進行鑒別診斷，同時，由于該病原具有良好的中和人“O”型紅細胞的能力，因此可以通過血凝及血凝抑制試驗對發病病原進行進一步鑒定。由于分子生物學及免疫學的快速發展，大量的研究人員研發了多種分子生物學及免疫學的檢測方法。其中最主要的就是基于該病原主要結構蛋白VP60的PCR及熒光定量PCR檢測方法以檢測病原的核酸。同時，也有研究人員通過表達純化結構蛋白VP60以及制備該蛋白的單克隆及多克隆抗體，從而建立了間接ELISA及雙抗夾心ELISA檢測方法以檢測該病原及其刺激機體產生的抗體。

4 基因多樣性

過去的研究人員認為該病原僅存在一個血清型，并根據病原的結構蛋白VP60的核苷酸序列將其分為了6個不同的基因型——G1～G6，不同亞型病原之間具有較好的交叉免疫原性，因此基于一種亞型制備的疫苗可以為其他亞型提供較強的保護。但是在2010年法國地區暴發了由新的變異亞型所引起的非典型兔瘟，新的變異亞型與傳統的亞型所引起的臨床癥狀及病理變化均相似，但死亡率較低，但該亞型病原可以突破傳統兔瘟疫苗所提供的免疫保護力，引起免疫后兔的死亡，因此該亞型被研究人員認定為一種新的血清型，并命名為RHDVb/RHDV2。

5 經典兔瘟與新型兔瘟病毒的差異

雖然經典兔瘟和新型兔瘟病毒所引起的病理變化和臨床癥狀相似，但是其潛伏期、致死率、宿主范圍及年齡特異性有顯著差異。新型兔瘟的潛伏期較經典兔瘟的更長，可達3～5d；經典兔瘟的致死率較高，可到80%～90%，而新型兔瘟的致死率差異較大，可達5%～70%；經典兔瘟的宿主范圍較窄，能夠感染Oryctolagus cuniculus和Lepus granatensis兩個品種的兔子，新型兔瘟的宿主范圍明顯擴大，可以感染包括Oryctolagus cuniculus、Lepus capensis、L. Corsicanus和L. europaeus在內的多個品種的兔子；經典兔瘟僅能夠感染8周齡以上的成年兔，而新型兔瘟對2～3周齡的幼年兔同樣易感；最為重要的一個差異是經典兔瘟和新型兔瘟的免疫原性存在差異，因此基于經典兔瘟的疫苗無法提供針對新型兔瘟的完全保護，這對兔瘟疫情的防控帶來了新的嚴峻考驗。

6 兔瘟病毒的防控

對于病毒感染后處于亞臨床或無臨床癥狀的兔子，可是注射高免血清從而進行緊急被動免疫，高免血清可以中和病毒粒子從而減少對靶器官的攻擊，以提供短期保護，避免家兔死亡。然而生產中很難能夠及時發現無臨床癥狀的感染動物，然而到目前為止研究人員并沒有發現有效方法，可以治愈RHDV感染的兔子，因此生物安全防控和免疫預防如接種疫苗等措施仍然是預防和控制該病的最重要手段。

為了有效的防控該病，需加強飼養管理和安全防控。合理密度養殖，合理規劃養殖地點，進行集約化養殖和自繁自養的管理模式，以防外來引種可能帶來的污染。保證飼料和飲水充足，禁止使用霉變和污染的水源喂養兔子。保證適當的光照和通風，避免兔子產生應激反應。定期對圈舍和飼養器械進行消毒，平時做好病毒的凈化和清除工作，對育肥家兔盡可能采用全進全出的飼養模式。

目前，常用的商品化兔瘟疫苗除了單價兔病毒性出血癥滅活疫苗外，還有兔病毒性出血癥-兔多殺性巴氏桿菌二價滅活疫苗及兔病毒性出血癥-兔多殺性巴氏桿菌-兔產氣莢膜梭菌三價滅活疫苗。除了常規的滅活苗以外，研究人員還研發了大量的亞單位疫苗，此類疫苗無散毒的潛在風險，更為安全，目前我國已上市的有基于桿狀病毒-昆蟲細胞表達系統研發的兔病毒性出血癥亞單位疫苗，同樣可以為兔子提供較強的保護力。免疫時，需要合理檢測母源抗體水平，以減少母源抗體對免疫帶來的影響，首免應在2月齡后，也可斷奶后進行首免然后在2月齡時進行加強免疫，對種兔應每隔3～4個月進行加強免疫，以維持較高的抗體水平。

7 總結

雖近年來由于合理的免疫和安全防控，兔瘟疫情在我國較少發生，但隨著我國新的變異亞型出現，研究人員和養殖戶仍然需要提高防范意識。相關部門及研究人員仍需對我國的主要流行毒株進行長期監測，以合理地調整疫苗毒株和免疫規程，從而更好地指導養殖戶生產應用。