不同年齡妊娠晚期孕婦GBS感染流行現狀及其與BV之間的相關性分析

李寶花，劉小君，詹禧奎

1.中國科學院大學深圳醫院(光明)檢驗科，廣東深圳 518106；2.中山大學附屬第八醫院(深圳福田)檢驗科，廣東深圳 518033

B族鏈球菌(GBS)是一種革蘭陽性兼性厭氧β-溶血性鏈球菌，屬于條件致病菌，常定植于直腸、泌尿道及生殖道[1]。一般情況下，GBS感染不會引起疾病，但妊娠晚期孕婦感染時，可引起宮腔內感染、胎膜早破、產褥感染及產后子宮內膜炎，也可引起新生兒敗血癥、感染性肺炎及腦膜炎，嚴重影響孕婦及胎兒的身體健康[2-3]。加強妊娠晚期孕婦產前GBS感染情況篩查，并對GBS感染者及時采取有效的治療措施，能有效降低圍生期孕婦感染和減少新生兒發病風險，對提高母嬰預后、生活質量和身體健康具有重要的臨床意義。

有研究表明，隨著孕婦年齡不斷增加、免疫力下降、抗菌藥物的濫用及微生態紊亂不斷惡化等因素的影響，GBS感染呈不斷上升趨勢，且不同地區因生活環境、工作壓力、氣候、飲食、生活及衛生習慣等諸多因素的不同，GBS感染率存在很大差異[4-5]。本研究對深圳市光明區妊娠晚期孕婦GBS感染情況及其與細菌性陰道炎(BV)的相關性進行了調查分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年5月至2019年10月在中國科學院大學深圳醫院(光明)產科進行產前檢查的妊娠晚期孕婦(包括初產婦和經產婦)共計2 176例作為研究對象，年齡19～45歲，平均(32.09±12.85)歲，孕周35～37周，所有孕婦孕周都經末次月經及早孕B超核對確認，且近期無抗菌藥物使用史。參照文獻[6]，按不同年齡分為≤25歲(472例)、>25～35歲(1 099例)及>35歲(605例)3個年齡段。本研究經孕婦及家屬知情同意并簽署知情同意書。

1.2標本采集 參照文獻[7]推薦的取材方法，將無菌棉拭子插入陰道口1/3處旋轉1周采集陰道黏膜分泌物2支，一支用于GBS測定，另一支用于BV檢測。孕婦取樣前1周未使用任何抗菌藥物、乳劑/膏劑、除臭噴劑、潤滑油、栓劑及洗液。標本采集后及時送檢，不能及時檢測的標本室溫下保存不應超過1 d，4～8 ℃冰箱內保存不超過6 d。

1.3方法

1.3.1GBS檢測 采用熒光定量聚合酶鏈反應(PCR)對GBS核酸進行檢測。(1)核酸提取：取含有陰道分泌物的生理鹽水1.0 mL于離心機內13 000 r/min離心10 min，棄去上清液，于沉淀物中加入無菌生理鹽水1.0 mL充分混勻，13 000 r/min離心5min，棄去上清液，然后于沉淀物中加入50 μL脫氧核糖核酸(DNA)提取液充分混勻，于99～100 ℃水溫箱內加熱10 min，最后13 000 r/min離心10 min，吸取上清液為待測核酸溶液。(2)PCR反應體系：總反應體積為40 μL，其中DNA提取液5 μL，加PCR mix液至40 μL，混勻進行PCR擴增。(3)PCR擴增條件：95 ℃預變性5 min，然后以95 ℃變性15 s，60 ℃延伸35 s，反復循環45次，最后采用熒光PCR分析儀于60 ℃時檢測羧基熒光素(FAM)通道的熒光信號。所有操作均嚴格按照試劑和儀器操作說明書進行。

1.3.2GBS結果判讀 標本的FAM Ct值≤33，且有較好的對數增長曲線，同時內參的FAM Ct值<40，判定結果為陽性；標本的FAM Ct值≥40或為“No Ct”，同時內參的FAM Ct值<40，判定結果為陰性；若33<標本的FAM Ct值<40，結果處于灰區，需復查或重新采樣檢測。

1.3.3BV檢測 采用唾液酸酶法對陰道分泌物進行BV檢測。將取樣棉拭子浸入測試管溶液中，輕輕攪動混勻，隨后將帶有棉拭子端的測試管置于37 ℃干熱恒溫儀溫育10 min，然后于測試管內加入顯色劑2滴，輕搖混勻于3 min內觀察測試管內溶液顏色，超過判讀時間結果無效。

1.3.4BV檢測結果判斷 根據顯色情況進行BV結果判讀，測試管內溶液呈無色或黃色者為陰性；呈綠黃色者為弱陽性，呈藍色者為陽性，呈深藍色者為強陽性。

1.4統計學處理 采用SPSS22.0統計軟件分析處理數據。計數資料以頻數、率表示，組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1妊娠晚期孕婦GBS和BV檢出情況 2 176例妊娠晚期孕婦中，GBS陽性247例，陽性率為11.35%(247/2 176)；BV陽性394例，陽性率為18.11%(394/2 176)，BV中弱陽性、陽性和強陽性的構成比分別為21.83%(86/394)、52.28%(206/394)和25.89%(102/394)。

2.2不同年齡段妊娠晚期孕婦GBS陽性率比較 3個年齡段妊娠晚期孕婦GBS陽性率比較，差異有統計學意義(P<0.05)；>35歲妊娠晚期孕婦的GBS陽性率高于>25～35歲和≤25歲2個年齡段妊娠晚期孕婦，>25～35歲妊娠晚期孕婦的GBS陽性率高于≤25歲妊娠晚期孕婦，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 不同年齡段妊娠晚期孕婦GBS陽性率比較

2.3不同BV結果的妊娠晚期孕婦的GBS陽性率比較 不同BV結果的妊娠晚期孕婦GBS陽性率比較，差異有統計學意義(P<0.05)；394例BV陽性的妊娠晚期孕婦的GBS總陽性率[34.01%(134/394)]，高于BV陰性的妊娠晚期孕婦的GBS陽性率[6.34%(113/1 782)]，差異有統計學意義(P<0.05)，且GBS陽性率隨BV陽性程度的加重而升高，不同BV陽性程度的妊娠晚期孕婦的GBS陽性率比較，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 不同BV結果的妊娠晚期孕婦的GBS陽性率比較(%)

3 討 論

GBS是一種可導致圍生期母胎感染的條件致病菌，20%～30%的孕婦泌尿和生殖道中均有GBS定植。一般情況下定植的GBS對身體是無害的，但當機體內環境紊亂和/或微生態平衡遭到破壞時，可引起人體機會性感染，從而引起人類多種疾病[8]。婦女妊娠期間由于體內雌激素、孕激素水平及陰道上皮細胞糖原量明顯升高，陰道內乳酸桿菌分解糖原產生的乳酸增多，陰道內GBS大量生長繁殖，導致陰道內微生態平衡紊亂，加上孕婦陰道黏膜充血水腫，故容易發生GBS感染[9]。大量研究表明，近年來GBS作為條件病原菌所導致的圍生期感染呈不斷上升趨勢，且妊娠晚期孕婦GBS感染可通過上行感染引起產褥感染、胎膜早破、早產及死胎,分娩時也可導致新生兒肺炎、腦膜炎及敗血癥等疾病[1-4]，嚴重影響孕婦、胎兒及新生兒的身體健康。

有研究表明，不同國家、地區和種族妊娠晚期孕婦GBS感染率因檢測方法、采樣部位和時間、生活水平、生活工作壓力、孕婦年齡、生活環境及陰道細菌感染情況等諸多因素的不同而存在很大差別。如亞洲妊娠晚期孕婦GBS感染率約為7%，歐洲約為16%，非洲約為24%，美洲和大洋洲約為22%，亞洲地區孕婦GBS感染率明顯低于歐美和非洲國家，存在明顯的地區差異[10]。同時，據文獻[11]報道，我國妊娠晚期孕婦GBS感染率為5%～15%，且不同地區差異也很大。本研究顯示，深圳市光明區妊娠晚期孕婦GBS感染率為11.35%,高于長沙地區的7.4%[10]，而與陜西地區的12.88%[12]基本一致，但低于山西地區的17.9%[6],且GBS感染率隨孕婦年齡增大而升高，這可能除了與年齡大的孕婦相應的激素水平及抵抗力下降有關外，還可能與年齡大的孕婦激素變化較大及免疫功能減弱，易引發下生殖道感染等有關[9]。

妊娠期婦女除了生理激素和陰道微生態的構成發生變化外，陰道前庭腺體和陰道分泌物增加，以及濕潤的外陰等諸多條件均有利于細菌的生長和繁殖。因此，妊娠婦女更容易發生各種陰道感染，其中BV是常見的生殖道感染之一，表現為乳酸桿菌減少，而陰道加特納菌、普雷沃菌及動彎桿菌等細菌明顯增加。近年來，由于生活環境的改變及工作壓力的增大，使不少女性處于亞健康狀態，這樣就容易導致BV。有研究表明，妊娠期合并BV的孕婦GBS感染率明顯升高。本研究顯示，BV陽性的妊娠晚期孕婦GBS感染率明顯高于BV陰性的孕婦，且隨著BV陽性強度的加重而增加，與有關報道基本一致[12]，這可能與BV感染會抑制陰道內乳酸桿菌的生長，分解乳糖能力下降，乳酸生成量降低，導致陰道pH值上升，進而造成陰道內微生態平衡被破壞，各種細菌大量繁殖，更有利于GBS等條件致病菌生長和繁殖等有關。

綜上所述，深圳市光明區妊娠晚期孕婦GBS感染率處于國內中等水平，且與孕婦年齡、BV有密切關系，同時不同地區GBS感染率存在很大差異。因此，加強不同地區妊娠晚期孕婦GBS感染篩查，對GBS感染的孕婦采取及時有效的治療措施，對降低孕婦圍生期感染及新生兒肺炎、腦膜炎的發病率具有重要的臨床意義。