全自動血凝分析儀性能驗證及結果比對

劉英杰，夏西燕

1.山東大學齊魯醫院檢驗科，山東濟南 250012；2.濟南職業護理學院免疫教研室，山東濟南 250102

目前，血凝分析儀在各級醫院得到廣泛應用，實驗室常規檢測凝血四項包括凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶時間(TT)和纖維蛋白原(FIB)。按照美國國家臨床實驗室標準化協會(NCCLS)有關文件的要求[1-2]，本研究對實驗室新引進的一臺同品牌不同型號全自動血凝分析儀進行了性能驗證，內容包括重復性、穩定性、線性、攜帶污染率和可比性,并與已在臨床使用的全自動血凝分析儀進行比對分析,以滿足臨床對檢驗結果準確性和一致性的要求。

1 材料與方法

1.1標本來源 (1)校準品，正常水平定值質控物和異常水平定值質控物均由原廠提供；(2)門診及住院標本枸櫞酸鈉1∶9抗凝血，3 000 r/min離心10 min，收集正常和異常血漿40份。

1．2儀器與試劑 2臺全自動血凝分析儀，一臺為新投入臨床使用的實驗儀器 (STA-R Max)，另一臺為參比儀器(STA-R Evolution)；2臺全自動血凝分析儀均使用原裝配套的相同校準品、質控品及試劑。

2 結 果

2.1實驗儀器批內精密度驗證 正常和異常2份混合質控品2 h內使用實驗儀器檢測PT、APTT、FIB、TT各20次，根據CV計算出其批內CV(即批內精密度),見表1。批內CV均小于目標CV，批內精密度符合要求。

2.2實驗儀器批間精密度驗證 正常和異常2份混合質控品連續測定10 d，每天測定PT、APTT、FIB、TT各2次，2次之間的時間間隔不少于2 h，根據CV計算出其批間CV(即批間精密度),見表2。批間CV均小于目標CV，批間精密度符合要求。

表1 實驗儀器批內精密度

表2 實驗儀器批間精密度

2.3實驗儀器線性關系分析 6份不同比例水平梯度的FIB標本，每份標本用實驗儀器檢測4次，檢測結果均值與理論值之間線性回歸方程為Y=0.992 9X-0．093 7(P>0．05)，截距與0之間比較差異無統計學意義(P>0．05)，直線斜率與1之間比較差異無統計學意義(P>0．05)，則線性回歸方程與Y=X之間比較差異無統計學意義(P>0．05)。實驗儀器FIB的檢測值與理論值線性擬合度高，見圖1。

圖1 實驗儀器FIB的檢測值與理論值之間的線性回歸分析

2.4攜帶污染率結果 根據攜帶污染率=(L1 -L3 )/(H3-L3)×100%，實驗儀器攜帶污染率為0．17%，低于要求(2.00%以下)，因此攜帶污染率合格。

2.52臺全自動血凝分析儀凝血四項檢測結果、相關性分析及相對偏差與規定偏差比較

2.5.12臺全自動血凝分析儀凝血四項檢測結果比較 40份新鮮血漿(包括正常和異常標本)分別在2臺全自動血凝分析儀上平行檢測PT、APTT、FIB、TT水平，2臺全自動血凝分析儀凝血四項檢測結果比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 2臺全自動血凝分析儀凝血四項結果比較

2.5.22臺全自動血凝分析儀相關性分析 2臺全自動血凝分析儀凝血四項檢測結果的散點圖分布顯示出2臺儀器之間的線性關系良好，PT、APTT、FIB和TT的測定結果r值分別為0.989 6、0.984 0、0.995 1和0.961 9,均大于0.95,符合要求。見圖2。

注：A表示PT;B表示APTT;C表示FIB；D表示TT。

2.5.32臺全自動血凝分析儀相對偏差與規定偏差比較 參照美國臨床實驗室改進修正法規(CLIA′88)規定，以相對偏差小于CLIA′88規定的允許誤差1/2(PT:±7.5%；APTT:±7.5%；FIB:±10%；TT:±7.5%)作為臨床可接受標準。結果顯示2臺儀器檢測PT、APTT、FIB、TT相對偏差分別為1.91%、2.73%、0.29%、1.51%，在允許誤差范圍內，可以接受，見表4。

表4 2臺全自動血凝分析儀相對偏差

3 討 論

全自動血凝分析儀是檢測凝血功能的重要儀器，在臨床上得到廣泛應用，很多臨床實驗室擁有相同或不同品牌便攜式、半自動、全自動血凝分析儀[4]。《醫療機構臨床實驗室管理辦法》[5]要求醫療機構臨床實驗室應當將尚未開展室間質量評價的臨床檢驗項目與其他臨床實驗室的同類項目進行比對，或者用其他方法驗證其結果的可靠性。對新儀器進行性能驗證及與實驗室正在使用的其他儀器比對是保證結果準確、一致的關鍵[6-8]。國內外已有許多研究報道關于血凝分析儀的性能驗證及比對分析[9-15]，對新投入使用的全自動血凝分析儀進行了性能驗證，并與臨床在用、性能穩定、參加國家衛生健康委員會臨床檢驗中心室間質評合格的血凝分析儀為參比儀器進行結果比對。

根據EP-5A文件要求[1]，取正常及異常值混合質控血漿在新儀器上檢測PT、APTT、FIB、TT，驗證新投入使用的全自動血凝分析儀精密度，其批間精密度和批內精密度均小于目標CV，說明精密度良好。實驗結果顯示,實驗儀器攜帶污染率低和線性良好。不同全自動凝血儀檢測的原理、試劑、標本、操作要求及環境等許多因素存在差異，結果必然存在差異，對比時如果結果差異超過允許范圍的應采取相應的校準和改進措施，以保持不同檢測系統上檢測結果具有可比性[3，12]。根據EP9-A2文件[2]要求對2臺全自動血凝分析儀進行PT、APTT、FIB、TT結果比對，凝血四項檢測結果差異無統計學意義(P>0.05)，相對偏差小于CLIA′88規定的允許誤差1/2，相關性分析認為2個檢測系統的誤差仍然在臨床可接受范圍內，說明2個檢測系統PT、APTT、FIB、TT 檢測結果相關性很好，結果之間具有較好的一致性。

綜上所述，新的全自動血凝分析儀性能良好，測定結果在臨床可接受范圍內，可用于臨床標本檢測。為保證檢測結果的穩定性和持續一致性，必需定期進行儀器的性能驗證和相同檢測項目不同檢測儀器之間的結果比對，確保實驗室內檢測結果的一致性，為臨床提供穩定且準確的檢測結果。