慢性乙型肝炎血清標志物和肝功能指標在不同性別患者間的差異分析

方鐘 王叢 黃玉仙 陳良 張毅

研究表明，感染HBV后，男性比女性更容易發展成為慢性肝炎(男性10.7%，女性4.4%)，且男性患者血清HBV DNA高于女性患者[1]。更為嚴重的是男性慢性乙型肝炎患者發展為肝癌的風險較女性患者高5～7倍，這是因為在不同HBV基因型中都普遍存在兩個保守序列，即兩個雄激素反應元件(androgen responsive elements，ARE)，ARE與宿主的雄激素受體(androgen receptor，AR)結合會增強病毒的復制和蛋白表達，而雌激素能負調節HBV復制[2]。不同性別患者，不僅病毒在體內的復制表達存在差異，在免疫反應上也存在差異。B細胞分泌的抗體和CD8+T淋巴細胞均在HBV的清除中發揮重要功能[3-5]。常規的疫苗接種，在女性患者中能獲得較男性更好的免疫應答[6]。也有研究發現，雄性小鼠體內含有更高水平的調節性T細胞(regulatory T cells，Tregs)[7]。

本研究回顧性分析了HBeAg陽性和陰性的慢性乙型肝炎患者外周血中HBV血清學標志物、肝功能等指標的差異，并以HBsAg為參考值，分析與其他臨床指標的相關性。

材料與方法

一、患者一般資料

選取2015年12月至2016年12月在上海市公共衛生臨床中心肝病一科確診為慢性乙型肝炎的患者作為研究對象。納入標準：近6個月內未接受任何抗病毒和免疫治療的患者。排除標準：HCV和HIV共感染的患者，腫瘤或自身免疫性疾病的患者；因其他疾病近6個月服用藥物的患者；妊娠和哺乳期患者。

二、臨床指標的檢測

慢性乙型肝炎患者的外周血經快速血清管采集，未做抗凝處理。采用ELISA法檢測HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc，采用實時定量熒光PCR法檢測HBV DNA(下限為500 IU/mL)，血常規檢測采用全自動血液細胞分析儀BC-3000Plus,肝功能檢測采用全自動生化儀Olympus AU5400。

三、統計學分析

采用GraphPad Prism5軟件進行統計分析。在比較不同自然史的患者資料時，用非參數t檢驗；在分析兩組檢測指標之間的相關性時采用非參數相關性分析，即Spearman相關分析。

結 果

一、不同性別患者HBV血清學標志物

本研究共入組155例慢性乙型肝炎，其中HBeAg陽性感染期患者26例，HBeAg陽性肝炎活動期患者67例，HBeAg陰性感染期患者16例，HBeAg陰性肝炎活動期患者46例。年齡最小17歲，最大60歲，平均38.6歲，男性120例(77.42%)，顯著高于女性患者。不同性別HBeAg陽性和陰性患者HBV血清學標志物比較見表1。

表1 不同性別HBeAg陽性或陰性慢性乙型肝炎患者HBV血清學標志物比較(M)

二、不同性別HBeAg陽性患者HBV血清標志物、肝功能與HBsAg相關性

無論男女患者，其HBsAg與HBeAg和病毒DNA都存在顯著正相關；但是HBsAg無論在HBeAg陽性還是陰性患者中均與抗-HBc沒有相關性。而男女患者ALT、AST和GGT均沒有出現與HBsAg水平有相關性。男性患者HBsAg分別與TBil和PT存在顯著負相關，女性患者HBsAg則與PLT顯著正相關。男女患者都與Alb、Glb和INR等其他指標沒有相關性。見表2。

表2 不同性別HBeAg陽性患者HBV血清學標志物、肝功能指標與HBsAg相關性分析

三、不同性別HBeAg陰性患者HBV血清標志物、肝功能與HBsAg相關性

女性患者抗-HBe與HBsAg正相關，但是男性患者二者沒有相關性；男性患者HBsAg與病毒DNA成顯著正相關，女性患者無相關性；HBsAg在不同性別患者中均沒有顯示出與抗-HBc顯著相關。男性患者ALT、AST和GGT均顯示出與HBsAg呈現正相關，且與AST和GGT存在顯著相關性；女性患者ALT、AST和GGT則與男性相反，呈現負相關趨勢，但差異均無統計學意義。男女患者HBsAg與其他血清學指標相關性趨勢一致，但差異均無統計學意義。見表3。這些結果表明在HBeAg陰性情況下，男性患者的肝臟受損和HBsAg水平變化存在密切關系；而女性患者肝功能受損與HBsAg水平的變化無關或者相關性不大。

表3 不同性別HBeAg陰性患者HBV血清學標志物、肝功能指標與HBsAg相關性分析

討 論

HBV的感染與患者性別密切相關，HBV DNA水平以及肝癌進展都會出現性別的差異[8, 9]。研究表明，男女在HBV功能性受體SLC10A1基因SNP位點上存在顯著差異，增加了男性感染HBV的風險[10]。本研究結果發現男女患者的HBsAg、HBV DNA、ALT、GGT、TBil、Alb、Glb、PT、INR等指標差異均有統計學意義。HBeAg陰性的男性患者HBsAg和HBV DNA水平均顯著高于女性，但在HBeAg陽性患者中不同性別患者HBV血清學標志物差異無統計學意義，這可能與患者年齡有關。HBeAg的血清學轉換通常發生在成年以后，這也是性成熟的時期，而未成年期不同性別患者在性激素表達水平上沒有區別，這與HBV序列中包含雄激素受體結合序列相符合[2]。

HBV對肝細胞的易感性可以通過NTCP基因SNP位點差異來解釋，雄性激素結合位點可以闡明男女患者HBV DNA和HBeAg的差異，但這些差異是否會影響肝功能，仍不清楚。本研究結果發現HBeAg陽性男性患者HBsAg與HBeAg和HBV DNA呈正相關，與TBil、PT呈負相關；女性患者HBsAg也與HBeAg、HBV DNA和PLT呈正相關，與其他指標沒有相關性。而HBeAg陰性時，男性患者HBsAg與HBV DNA、AST和GGT顯著正相關；女性患者的HBsAg則與這些指標的無相關性。HBsAg參與了完整病毒顆粒的包裝，因此HBsAg和HBV DNA通常存在一定相關性。但在HBeAg陰性女性患者體內HBsAg與HBV DNA并不具備相關性，提示女性患者在HBeAg發生血清學轉換后，出現的HBV DNA可能并不需要包裝在完整的HBsAg為外殼的病毒顆粒中。

總之，不同性別患者不僅HBV DNA和蛋白水平不同，在慢性乙型肝炎其他血清學指標中也存在顯著區別。而在HBeAg發生血清學轉換后，參與病毒包裝和致病的HBsAg在男女患者體內可能發揮了不同的作用。