揭陽地區兒童肺炎支原體感染情況的研究

陳奕穎 陳宋欽 陳華宏

1.廣東省揭陽市人民醫院檢驗科，廣東揭陽 522000；2.廣東省揭陽市人民醫院病理科，廣東揭陽 522000

肺炎支原體（mycoplasma pneumonia，MP）不同于普通的細菌和病毒，其是目前已知的能獨立生活的最小微生物，是中國兒童社區獲得性肺炎（Community-acquired pneumonia，CAP）的重要病原之一[1]。MP主要通過呼吸道傳播，在人群聚集地可出現暴發流行。兒童感染MP后，除出現呼吸道癥狀外，還可導致心肌炎、腦炎、腎炎等多種肺外并發癥以及肺壞死[2]，嚴重影響兒童健康。近年來，MP感染率明顯上升[3]，且文獻報道不同地區MP感染流行病學特征存在顯著差異[4]，而揭陽地區兒童MP的感染情況未見文獻報道。本研究通過對2873例呼吸道感染患兒的MP-RNA檢測結果進行回顧性分析，探討分析揭陽地區兒童MP的感染情況及流行病學特點，為臨床診治MP感染提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年7月至2019年6月揭陽市人民醫院收治的呼吸道感染兒童2873例為研究對象。納入標準：①年齡0～14歲；②以發熱、咳嗽等呼吸道癥狀為首發癥狀；③均符合《諸福棠實用兒科學（8版）》[5]中關于小兒呼吸道感染疾病的相關診斷標準。按患兒發育不同階段將其分為：嬰兒組（＜1歲，1070例）、幼兒組（1～＜3歲，896例）、學齡前組（3～＜6歲，607例）、學齡組（6～14歲，300例）。

1.2 儀器與試劑

廈門天中達生物科技有限公司生產的化學發光檢測儀TZD-CL-200S，杭州奧盛儀器有限公司生產的迷你金屬浴，以及武漢中幟生物科技股份有限公司生產的肺炎支原體/肺炎衣原體核酸檢測試劑盒（雙擴增法）。

1.3 檢測方法

所有患兒于入院24 h內無菌采集咽試子標本（或肺泡灌洗液），置于保存液中立即送檢。向標本中加入20 μl細胞裂解液，旋渦震蕩30 s，室溫裂解15 min；往17 μl擴增反應液中加入2 μl裂解后的樣本，然后進行T7核酸擴增和多生物素信號放大的相關操作。根據待測樣本與陰性質控物的相對光單位比值R進行結果判讀：比值R＞1.0判斷為陽性，比值R≤1.0判斷為陰性。所有操作過程均嚴格按照試劑盒說明書且保證質控在控的情況下進行。

1.4 統計學處理

應用SPSS 22.0統計學軟件對本研究數據進行分析，計量資料以（x±s）表示，符合正態分布的多組間資料比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗，不符合正態分布的資料采用獨立樣本的秩和檢驗，計數資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 MP感染總體情況

2873例呼吸道感染患兒中，檢出MP感染患兒186例，總感染陽性率為6.47%。

2.2 不同性別患兒MP感染情況比較

2873例患兒中共檢測男性患兒1804例，陽性116例，陽性率為6.43%；檢測女性患兒1069例，陽性70例，陽性率為6.55%。不同性別的患兒間MP檢出率比較，差異無統計學意義（χ2=0.015，P＞0.05）。

2.3 不同年齡患兒MP感染情況比較

6～14歲學齡組患兒MP檢出率最高，其次是學齡前組；且隨著年齡的增長，MP檢出率呈增高趨勢；各年齡組間MP檢出率比較，差異有統計學意義（χ2=152.372，P＜0.01）。見表1。

表1 不同年齡患兒MP感染陽性比較

2.4 不同季節患兒MP感染情況比較

根據廣東地區的季節特點，按陽歷月份將各季節劃分如下：春季（3～5月）；夏季（6～8月）；秋季（9～11月）；冬季（12月至次年2月）。春季的MP檢出率最高，其次是夏季；春夏季間患兒MP檢出率比較，差異無統計學意義（χ2=0.074，P＞0.05）；秋冬季間患兒MP檢出率比較，差異無統計學意義（χ2=0.003，P＞0.05）；夏秋季間患兒MP檢出率比較，差異有統計學意義（χ2=6.049，P＜0.05）；而春秋季、春冬季、夏冬季間患兒的MP檢出率比較，差異有統計學意義（χ2=8.133，P＜0.01；χ2=10.429，P＜0.01；χ2=7.583，P＜0.01）。見表2。

表2 不同季節患兒MP-RNA檢測結果

3 討論

肺炎支原體是人類支原體肺炎的病原體，鑒于MP無細胞壁的特殊結構特點，大環內酯類抗生素已成為治療兒童MP感染的首選藥物，但近年研究發現，MP對大環內酯類藥物的耐藥情況日益嚴重，難治性MP肺炎的病例也逐年增加。而如何快速地診斷和治療MP感染是防止MP耐藥和暴發流行的關鍵。血清學特異性抗體檢測（MP-Ab）是目前臨床上最常用的檢測方法，但也存在諸多的影響因素，如疾病病程、個體免疫狀態差異等[6]。PCR技術的應用，與傳統的血清學方法相比，敏感性、特異性和準確性更高，且不受患兒免疫狀態的影響，有利于MP感染的早期診斷[7]。但MP-DNA的檢測與MP的存活狀態無關，陽性結果無法提示是否是現癥感染。本研究所采用的雙擴增技術，以RNA恒溫擴增法為基礎，將T7核酸擴增和多生物素信號放大技術相結合，對樣本中MP的RNA進行檢測，是一種全新的核酸檢測技術。RNA僅存在于活菌中，MP死亡后RNA快速降解，因此采用此方法進行MP的檢測，如果陽性提示MP近期感染，而不是既往感染[8-9]。該方法具有更高的敏感性和特異性，且所需時間短，是目前能夠比較準確地反應MP感染狀態的檢測方法。

最近幾年各地呼吸道感染兒童MP檢出率各不相同且差異大[10-11]，但以此次揭陽地區的MP檢出率最低，可能與標本取材、標本類型、取樣時間、檢測方法和選擇的檢測對象有關。MP感染是否存在性別差異，到目前為止尚無統一說法。各地區不同性別間兒童MP檢出率各不相同，本研究顯示，男性患兒MP感染率為6.43%，女性患兒MP感染率為6.55%，差異無統計學意義（P＞0.05）。MP感染可發生于兒童各年齡段，國內外報道均顯示，MP感染發病的高峰期為學齡前期和學齡期兒童[12-13]，本研究結果顯示，揭陽地區學齡組呼吸道感染兒童MP檢出率明顯高于其他年齡組，其次是學齡前組；且MP檢出率隨著年齡的增長呈增高趨勢；各年齡組間差異有統計學意義（P＜0.05）；此結論與上述文獻報道一致。學校群體的生活環境和免疫力低下是導致學齡組、學齡前組兒童MP感染高發的主要原因。在季節分布方面，MP感染全年均有散發，由于地域的不同，流行季節也可能存在差異[14]。本研究結果顯示，春季呼吸道感染兒童MP的檢出率最高，其次是夏季，與其他文獻的報道不太一致[15-16]。由于該項目開展時間不長，現有的實驗數據只能說明春季是本年份MP感染的高發季節。至于流行季節的統計，筆者將會進一步追蹤報道。

綜上所述，本研究分析了揭陽地區呼吸道感染兒童MP感染情況和流行現狀，對高危人群及高發季節常規進行MP-RNA檢測，更早期地診斷MP感染，可有效避免MP感染的漏診、誤診，防止抗生素的濫用；對MP感染兒童采取必要的隔離措施，可有效地防止MP在學校等兒童聚集地的暴發流行。