TCT 聯合HR-HPV DNA 檢測在宮頸癌及癌前病變篩查中的應用

張冬燕

（河南科技大學第二附屬醫院 體檢科， 河南 洛陽471000）

宮頸癌是臨床常見婦科惡性腫瘤之一， 發病率在女性惡性腫瘤中居第二位， 但其是唯一可以防治的癌癥。 因此， 早篩查、早診治對于宮頸癌及癌前病變患者具有重要的臨床意義［1］。 當前， 宮頸液基薄層細胞學 （TCT） 檢查是針對宮頸病變的主要篩查手段， 但仍然存在漏診以及誤診的風險［2］。 相關研究［3－4］表明， 宮頸轉化區被人乳頭瘤病毒 （HPV） 感染是造成宮頸癌的最主要原因， 輔助進行高危型人乳頭瘤病毒基因 （HR－HPV DNA） 檢測， 可進一步提高診斷準確率。 基于此， 本研究旨在探討TCT 聯合HR－HPV DNA 檢測在宮頸癌及癌前病變篩查中的應用價值， 現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2016 年2 月至2017 年2 月在我院行宮頸病變篩查的受檢者70 例， 其中未婚者30 例， 已婚者40 例；年齡20 ～64 歲， 平均 （45.31 ± 4.33） 歲。

1.2 入選標準納入標準： 有性生活史； 子宮完整； 無放療以及化療史。 排除標準： 近期接受宮頸病變藥物治療者； 合并非宮頸組織的其他惡性腫瘤者； 6 個月內給予免疫調節劑或免疫抑制劑者； 7 d 內有陰道給藥史者； 免疫功能缺陷者； 嚴重傳染性疾病者。

1.3 方法①所有受檢者均先行TCT 檢查： 使用專門制作的一次性宮頸刷采集受檢者宮頸外口、 宮頸管處的脫落細胞， 然后將其放于甲醛保存液中并多次進行充分漂洗， 將漂洗后的脫落細胞放在全自動制片機進行人工制片處理， 處理后進行人工巴氏染色， 并放于光學顯微鏡下進行觀察分析， 最后參考中國醫學科學院腫瘤醫院制定的Bethesda 法進行分類： 無上皮內病變或惡性病變、 意義不明的不典型鱗狀上皮細胞、 傾向高度病變的不典型鱗狀上皮細胞、 低級別鱗狀上皮內病變、 高級別鱗狀上皮內病變和宮頸癌。 將意義不明的不典型鱗狀上皮細胞及其以上病變判斷為篩檢陽性。 ②對不同類型的宮頸病變進行HRHPV DNA 檢測， 具體操作如下： 使用廣州安必平醫藥科技有限公司生產的檢測試劑盒以及珠海黑馬醫學儀器有限公司生產的基因擴增PCR 儀、 佛山達安醫療設備有限公司的全自動核酸分子雜交儀， 嚴格按照產品說明書進行操作。 對16 種高危HPV 進 行 檢 測： HPV16、 HPV18、 HPV31、 HPV33、 HPV35、HPV45、 HPV51、 HPV52、 HPV53、 HPV56、 HPV58、 HPV59、HPV66、 HPV68、 HPV73、 HPV82。 判斷標準： 1 種HPV DNA≥1.0 ng／L 即為檢測陽性。 在完成TCT 及HR－HPV DNA 篩查當天通過陰道鏡對患者進行宮頸病變組織多點病理活檢， 必要時采取宮頸錐切， 在常規病理制片、 蘇木精－伊紅染色法染色、盲法閱片后做出診斷， 并以此為金標準。

1.4 評價指標以病理活檢結果作為 “金標準”， 分析TCT 聯合HR－HPV DNA 檢測篩查宮頸病變的準確度、 靈敏度、 特異度及與病理活檢結果的一致性。

1.5 統計學處理采用SPSS 20.0 統計學軟件處理數據。 計數資料以百分數和例數表示； 進行Kappa 一致性檢驗， Kappa＜0.4，一致性較差； 0.4≤Kappa＜0.75， 一致性一般； Kappa≥0.75，一致性較好。 P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 病理活檢結果70 例受檢者中， 經病理活檢確診宮頸低級別鱗狀上皮內病變35 例， 宮頸高級別鱗狀上皮內病變20 例，宮頸癌15 例。

2.2 TCT 聯合HR-HPV DNA 檢測的診斷效能TCT 聯合HRHPV DNA 檢測篩查宮頸癌及癌前病變的準確度為91.43% （64／70）， 靈敏度為92.73% （51／55）， 特異度為86.67% （13／15）。見表1。

表1 TCT 聯合HR-HPV DNA 檢測的結果 （例）

2.3 一致性檢驗經Kappa 一致性檢驗， TCT 聯合HR－HPV DNA 檢測結果和病理活檢結果的一致性較好 （Kappa ＝0.757，P ＝0.000）。

3 討論

宮頸病變的高危因素包括高危型HPV 持續感染史、 性傳播性疾病史、 長期使用免疫抑制劑類藥物或患有免疫抑制性疾病史等， 其中最為主要的原因是宮頸以及黏膜被HPV 感染［5］。宮頸癌并不是程度不同的單一病理性改變， 而是在宮頸浸潤性癌產生之前， 存在著很長時間的癌前病變［6］， 并且根據病情的不斷進展出現明顯差異的病變反應， 具體表現為低級別鱗狀上皮內病變以及高級別鱗狀上皮內病變。 既往， 宮頸癌在老年患者中較為常發， 但是當前宮頸癌逐漸呈現低齡化發展的趨勢，嚴重損害女性患者的生理以及心理健康。 因此， 尋求準確度、靈敏度、 特異度均高的檢測方法對宮頸癌以及癌前病變進行篩查， 并根據篩查結果采取針對性治療措施臨床意義重大。

TCT 是用來判斷宮頸細胞是否有病變的一種檢查方法， 基于脫落細胞制片技術進行檢測， 只需要采集較少的樣本細胞，可減少細胞的重疊率， 呈現出較為清晰的結構圖像， 通過對細胞核的異型性、 細胞質的形態或者染色情況進行分析， 進而對上皮細胞的病變程度進行評估［7］。 但是TCT 取樣過程中會存在病變部位宮頸上皮細胞的漏取， 并且觀察TCT 形態學時會受到檢查者主觀判斷的影響， 降低TCT 檢查的準確性［8－9］。 而針對TCT 檢查提示有低級別鱗狀上皮細胞內病變或者高級別鱗狀上皮內病變的人群， 需要進一步做HR－HPV DNA 篩查。 HRHPV DNA 檢測是對宮頸上皮細胞HPV DNA 的擴增情況進行評估， 進而判斷HPV 感染程度， 通過HR－HPV DNA 檢測柱狀上皮細胞的高危病毒基因， 可以有效避免檢測環境以及溫度對檢測結果的影響， 有較高的可靠性； 另外， 在進行HR－HPV DNA 檢測時， 在較低的基礎性細胞濃度要求下就能實現對HPV 病毒的擴增， 對病毒載量進行有效評估， 上皮細胞感染程度的評估準確性較高［10－11］。 本研究結果顯示， TCT 聯合HRHPV DNA 檢測篩查宮頸癌及癌前病變的準確度、 靈敏度、 特異度均較高； 且經Kappa 一致性檢驗， TCT 聯合HR－HPV DNA 檢測結果和病理活檢結果的一致性較好， 表明TCT 聯合HR－HPV DNA 檢測篩查宮頸癌及癌前病變的價值較高。

綜上所述， TCT 聯合HR－HPV DNA 檢測能有效篩查宮頸癌及癌前病變， 臨床應用價值較高。