秋末蜜蜂病毒病混合感染診斷實(shí)例

王海洲 郭興啟 趙光棟 王麗君 候俊斌 郭得政 郭慧娟 單文璐 │文

1 山東日照市畜牧獸醫(yī)管理服務(wù)中心，276800；2 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，泰安271000

2020年10 月初，山東省日照市莒縣寨里河鎮(zhèn)、龍山鎮(zhèn)、店子集街道、嶠山鎮(zhèn)等鄉(xiāng)鎮(zhèn)蜂農(nóng)報(bào)告蜂群死亡嚴(yán)重，請(qǐng)求山東省蜂產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)進(jìn)行病因鑒定，經(jīng)團(tuán)隊(duì)成員出診獲得的臨床癥狀和剖檢特征并結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果，診斷為蜜蜂病毒性疾病混合感染，現(xiàn)報(bào)告如下：

一、發(fā)病情況

發(fā)病蜂場(chǎng)多為經(jīng)營(yíng)多年的意大利蜜蜂蜂場(chǎng)，于9月10日左右開(kāi)始出現(xiàn)蜜蜂大量死亡現(xiàn)象，10月1日大面積爆發(fā)，多者20多箱，少者10多箱出現(xiàn)整群死亡（圖1），該地蜂農(nóng)雖有多年飼養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，但缺乏良好的蜂病防疫體系，受傳統(tǒng)飼養(yǎng)習(xí)慣的影響，普遍治螨不徹底，往年是偶爾出現(xiàn)蜜蜂死亡現(xiàn)象，未見(jiàn)2020年如此嚴(yán)重情況。

圖1 發(fā)病蜂群

二、臨床觀察

死亡病蜂一般在上午9～12時(shí)爬出蜂箱1.5m左右，不久死亡，尸體干癟、蜷縮。蜂脾幼蟲不封蓋，死亡幼蟲出現(xiàn)白頭現(xiàn)象，皮狀無(wú)味，有的呈白漿狀。死亡蜜蜂腸道內(nèi)有積糞，直腸內(nèi)有氣泡，蜜囊內(nèi)有積水，無(wú)甜味，味澀。飼喂蘇打片、食母生、抗生素等藥物無(wú)效。

三、初步診斷

2020年10月10 日，山東省蜂產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)環(huán)境與病蟲害崗位專家郭興啟教授一行在調(diào)查莒縣店子集街道大塘坊村蜂農(nóng)張師傅和西屋樓村徐師傅蜂場(chǎng)發(fā)病蜂群，詳細(xì)了解蜂場(chǎng)發(fā)病情況，采集發(fā)病蜂群蜜蜂樣品（圖2），初步判定蜜蜂大量死亡原因?yàn)榉淙呵锛局悟粡氐祝曫B(yǎng)管理不善（秋季氣溫突降），引發(fā)蜜蜂病毒性疾病所致。

圖2 采集發(fā)病蜂群樣品

四、診斷及結(jié)果

分別采集日照市莒縣店子集鎮(zhèn)大塘坊村張師傅蜂場(chǎng)的蜜蜂和西屋樓村徐師傅蜂場(chǎng)的蜜蜂。2020年10月12～13日，分別檢測(cè)克什米爾病毒、慢性麻痹病毒、以色列急性麻痹病毒、歐洲幼蟲腐臭病病原、殘翅病毒和囊狀幼蟲病病毒。檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1和圖3所示。分析發(fā)現(xiàn)，在死蜂中可檢測(cè)到以色列急性麻痹病毒、克什米爾病毒、殘翅病毒以及歐洲幼蟲腐臭病病原4種常見(jiàn)侵染蜜蜂的病原物，這4種蜜蜂病原物在蜜蜂體內(nèi)的含量有差別。

表1 日照市莒縣蜂場(chǎng)蜜蜂病原物檢測(cè)結(jié)果

圖3 病原物檢測(cè)電泳結(jié)果

五、防治建議

2004年，以色列希伯來(lái)大學(xué)的病毒學(xué)家賽拉發(fā)現(xiàn)以色列急性麻痹病毒，感染此病毒的蜂群出現(xiàn)蜂群衰竭失調(diào)現(xiàn)象[1]?？耸裁谞柌《窘?jīng)口傳播給幼蟲[2]，感染個(gè)體產(chǎn)生潛伏性感染成蟲，病毒通常與疾病癥狀不相關(guān)，但與其他寄生物病原可能誘導(dǎo)的疾病狀態(tài)相關(guān)。蜜蜂殘翅病是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一種蜜蜂病毒病，在山東省各地蜂場(chǎng)均有分布，表現(xiàn)為病蜂出房時(shí)翅殘缺，失去飛翔能力。歐洲幼蟲腐臭病的致病菌是蜂房蜜蜂球菌，其余為次生菌，如蜂房芽孢桿菌、變異型蜜蜂鏈球菌等，歐洲幼蟲腐臭病發(fā)生的先決條件是群勢(shì)弱，蜂巢過(guò)于松散，保溫不好，飼料不足，致病菌快速繁殖，促成疾病的爆發(fā)，而強(qiáng)群幼蟲營(yíng)養(yǎng)狀況較好，發(fā)病較輕。建議防治方法如下：

1.及時(shí)清理病死蜂

收集病蜂及死蜂進(jìn)行焚燒或深埋，防止病害進(jìn)一步擴(kuò)散。

2.隔離與消毒

將發(fā)病蜂群選擇遠(yuǎn)離健康蜂群（2km以外）、不容易散播病原體、消毒處理方便的地方進(jìn)行隔離治療。被病蜂群污染的蜂箱、蜂具、工作人員的衣物和蜂場(chǎng)的環(huán)境選用合適的消毒藥進(jìn)行徹底消毒。蜂箱可用1%～2%氫氧化鈉水溶液消毒，空脾用4%的甲醛溶液進(jìn)行密閉消毒。

3.加強(qiáng)保溫，及時(shí)補(bǔ)充優(yōu)質(zhì)飼料

加強(qiáng)蜂群的保暖及補(bǔ)充飼喂工作，當(dāng)蜂群飼料不足時(shí)，要及時(shí)補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（花粉、維生素等）以保證蜂群正常生活需要，提高蜜蜂的抗病能力。

4.藥物防治

（1）用10g蜂膠浸泡于40ml 95%酒精中，6天后過(guò)濾去渣，再加入100ml 50℃熱水中，過(guò)濾。將巢脾脫蜂后噴脾，每脾50ml，每天1次，7次為一個(gè)療程。

（2）使用升華硫。升華硫?qū)Σ》溆序?qū)殺作用，患病蜂群每群每次用10g升華硫，撒在蜂路、框梁或箱底，能夠有效控制麻痹病的發(fā)展。

（3）針對(duì)大肚型為主的病群，用藥的同時(shí)結(jié)合飼喂大黃蘇打片，促進(jìn)蜜蜂的排泄。用法是每群蜂2～3片，噴喂結(jié)合，3天1次，4次為一個(gè)療程。

（4）中草藥。一些中草藥對(duì)病毒病有一定的療效，如半枝蓮（30g）、甘草（8g）、金銀花（30g）等，加適量水煎煮后過(guò)濾，濾液添加到蜜蜂飼料中喂蜂。

六、討論

通過(guò)對(duì)典型發(fā)病蜂場(chǎng)的出診，結(jié)合向蜂農(nóng)詳細(xì)了解蜂場(chǎng)發(fā)病情況，當(dāng)?shù)胤滢r(nóng)秋季扣王斷子治螨不徹底，普遍采用扣王15～16天就放王產(chǎn)子，沒(méi)有等蜂房中的幼蟲化蛹成蜂出盡后，徹底殺死巢內(nèi)螨蟲，再放王產(chǎn)子，造成蜂群螨害嚴(yán)重，秋季蜜源匱乏，蜂群飼喂不足，飼養(yǎng)管理不善，盜蜂嚴(yán)重，蜂群中存在的蜜蜂殘翅病毒可在狄斯瓦螨體內(nèi)大量復(fù)制，繼而進(jìn)一步傳播，狄斯瓦螨的刺吸行為使病毒粒子跨越寄主的生理屏障而直接進(jìn)入蜜蜂血淋巴，狄斯瓦螨的寄生促使蜜蜂殘翅病毒的高毒力毒株在蜂群中優(yōu)勢(shì)擴(kuò)增和盛行，狄斯瓦螨影響蜜蜂個(gè)體發(fā)育與免疫系統(tǒng)等生理機(jī)能，以致降低了蜂群對(duì)病毒的抵抗力，從而造成以色列急性麻痹病毒、克什米爾病毒、殘翅病毒等多種病毒同時(shí)感染蜜蜂，集中爆發(fā)，造成較大損失[3]。蜂農(nóng)養(yǎng)蜂要更新養(yǎng)殖理念，治螨要徹底，要飼養(yǎng)強(qiáng)群，搞好蜂場(chǎng)環(huán)境衛(wèi)生，在蜜源匱乏的季節(jié)，要及時(shí)進(jìn)行飼喂，避免盜蜂的發(fā)生，從而提高蜂群的抗病能力。