森林腦炎致雙相情感障礙患者的血清細胞因子水平研究

孫偉

(呼倫貝爾市精神衛生中心，內蒙古 牙克石 022150)

0 引言

森林腦炎，即蜱傳腦炎(Tick-borne encephalitis, TBE)，因TBE 病毒攻擊機體中樞神經系統引起，通常表現出發熱、眩暈、頭痛和精神紊亂等癥狀。TBE 病毒屬于黃病毒屬，黃病毒科，共包括三個亞型，即歐洲亞型(TBEV-Eu)、西伯利亞亞型(TBEV-Sib)和遠東亞型(TBEV-FE)，其中TBEV-FE 亞型主要經全溝硬蜱進行傳播，流行于我國北部地區。雖然森林腦炎可以通過接種疫苗進行預防，但過去十幾年，各地該病的發病率始終保持增長，相關研究一直是國內外的重要課題。其中雙相情感障礙為森林腦炎常見臨床并發疾病。雙相情感障礙患者以反復發作的情緒惡化為特點，從重度抑郁癥發作到躁狂發作，或是相反發作。在許多患者中，該病的特征是病程逐漸加重、發作頻繁、恢復不完全、情感癥狀低于閾值且對治療不敏感。雙相患者的預期壽命縮短10-15 年，這不僅是因為自殺率增加，還因為存在諸如血管疾病、糖尿病和其他代謝疾病等醫學合并癥[1]。近幾年，關于雙相情感障礙的神經生物學研究正在不斷深入，越來越多的證據表明炎癥過程在雙相情感障礙的病理生理學中起主要作用[2]。

目前，森林腦炎致雙相情感障礙的病理學機制尚未明確，臨床上也缺乏統一的診斷標準和治療方法，但諸多研究表明TBE 感染一般伴有細胞因子的產生[3,4]。本文利用流式細胞儀微球捕獲芯片(cytometric bead array，CBA)技術分析了森林腦炎致雙相情感障礙患者躁狂發作、混合發作及抑郁發作3 種狀態下血清白介素-2(IL-2)、白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、干擾素-γ(IFN-γ)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的水平變化，從炎癥反應角度探討森林腦炎致雙相情感障礙的可能機制。

1 對象與方法

1.1 研究對象

躁狂組：收集我院2016 年8 月至2018 年8 月期間精神科蜱咬傷住院患者，根據中國精神障礙分類與診斷標準第3版(CCMD-3)雙相情感障礙躁狂發作診斷標準，共收集該類型患者21 例(男性13 例，女性8 例)，年齡35-62 歲，平均年齡46 歲。

混合組：收集我院同期精神科蜱咬傷住院患者，根據CCMD-3 雙相情感障礙混合發作診斷標準，共收集該類型患者18 例(男性11 例，女性7 例)，年齡25-65 歲，平均年齡39 歲。

抑郁組：收集我院同期精神科蜱咬傷住院患者，根據CCMD-3 雙相情感障礙抑郁發作診斷標準，共收集該類型患者23 例(男性11 例，女性12 例)，年齡28-55 歲，平均年齡42 歲。

對照組：為同期入院體檢健康人群，且無精神疾病家族史，共收集對照組20 例(男性10 例，女性10 例)，年齡22-63歲，平均年齡35 歲。

以上四組間性別、年齡均無統計學差異(P＞0.05)。對上述各組對象實施靜脈穿刺采集血樣，離心(3500 rpm, 5 min)后收集血清，存于-20℃冰箱備用。

1.2 方法

使用楊氏躁狂評定量表(YMRS) 和漢密爾頓抑郁量表(HDRS) 分別評估躁狂和抑郁癥狀。急性躁狂或抑郁發作由DSM-IV-TR 標準定義。根據以下標準將森林腦炎致雙相情感障礙患者分為三組：(1)混合組不應滿足情緒發作的DSM-IV 標準，且YMRS 和HDRS 評分應小于8；(2) 躁狂組 滿 足YMRS＞7 且HDRS＜7；(3) 抑 郁 癥 滿 足HDRS ＞7 且YMRS＜7。

圖1 森林腦炎致雙相情感障礙患者血清細胞因子水平的變化情況(＊＊：P＜0.05)

1.3 細胞因子的測定

儀器與試劑：測定所用的流式細胞儀(FACS Canto Ⅱ)和人Th1 /Th2 /Th17 CBA 試劑盒均購自美國BD 公司。

標準品的制備：將細胞因子標準品置于分析稀釋液中，均勻混合溶解后靜置15 min，按照1:2、1:4，1:8、1:16、1:32、1:64、1:128 和1:256 的濃度梯度連續等比例稀釋。

待測樣品的前處理：將6 種(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ 和TNF-α)捕獲微球各10μL 加入樣品管中，混勻后離心(1500 rpm, 5 min)，棄上清，加入PBS 洗液使微球重懸，制備得到捕獲微球混合液；在各進樣管中依次加入50μL 待測樣品溶液、50μL 捕獲微球混合液及50μLPE 信號抗體，室溫避光孵育3h 后，于各管中加入1 mLPBS 洗液洗滌，離心(1500 rpm, 5 min)棄上清后，加入200μLPBS 洗液使微球重懸，充分混勻后上機檢測。

數據的測定：對所用流式細胞儀調試參數、設置程序后，分別對上述標準品和樣品進行檢測，利用CellQuest 軟件導出數據文件后，用FACP 軟件進行分析并繪制標準曲線，回算得到所測樣品各細胞因子水平。

1.4 數據分析

利用SPSS 21.0 對實驗數據進行統計分析。使用ANOVA檢驗分析各組的臨床特征；使用Mann-Whitney U 秩和檢驗分析細胞因子水平(α=0.05)。

2 結果

2.1 雙相情感障礙患者的臨床特征分析

森林腦炎致雙相情感障礙躁狂組、混合組、抑郁組患者的YMRS 和HDRS 得分如表1 所示。

表1 雙相情感障礙患者的臨床特征分析

2.2 森林腦炎致雙相情感障礙患者的血清細胞因子水平分析

與對照組相比，森林腦炎致雙相情感障礙患者在各狀態下 的 血 清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ 和TNF-α 水 平均升高( 圖1)，使用Mann-Whitney U 秩和檢驗進行分析，P＜0.05，差異有統計學意義，其中躁狂組患者的血清IL-6 水平升高幅度最大。

3 討論

森林腦炎為林業地區高發疾病，近幾年其發病率不斷增長，已成為影響林區居民健康的公共衛生問題[5]。此外，已有諸多文獻表明森林腦炎患者通常會伴有嚴重的精神障礙，嚴重影響了此類患者的臨床治療[6]。值得一提的是，已有研究表明不論是森林腦炎還是雙相情感障礙患者均會表現出一定的炎癥反應[7,8]，因此本文以森林腦炎致雙相情感障礙患者為研究對象，從炎癥反應角度入手，探討此類疾病發生發展的可能病理生理基礎。

雙相情感障礙與其他精神疾病不同，在臨床上會突發出現兩種截然不同的形式，即躁狂癥和抑郁癥。本文的細胞因子水平分析結果表明，與對照組相比，森林腦炎致雙相情感障礙患者在躁狂發作、混合發作及抑郁發作3 種狀態下血 清 中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ 和TNF-α 水 平 均顯著升高(P＜0.05)，與已有關于雙相情感障礙患者的細胞因子水平分析結果一致[9]；另外，躁狂組患者的血清IL-6 水平升高幅度最大，且與混合組和抑郁組水平相比呈現顯著差異(P＜0.05)，這一結果提示血清IL-6 水平的變化或與森林腦炎致雙相情感障礙的發作狀態有關。IL-6 是一種由T 細胞和巨噬細胞分泌的多效細胞因子，其作用是刺激B 和T 淋巴細胞產生急性炎癥蛋白，如高敏C 反應蛋白等，此外，有人提出IL-6 可與TNF-α 以協同作用的方式增強機體免疫反應[10]。本文中森林腦炎致雙相情感障礙患者不同發作狀態下的IL-6水平提示免疫失衡或是此類疾病發生發展的影響因素之一。另有研究表明高水平的細胞因子可使5-羥色胺和多巴胺轉運蛋白表達增加并破壞單胺信號傳導，從而引發情感障礙[11]。

關于雙相情感障礙的神經生物學研究正在逐步深入，炎癥反應作為影響疾病發生發展的因素之一，通過各細胞因子的共同作用，影響中樞神經膠質細胞的功能及神經遞質的分泌。本文通過分析森林腦炎致雙相情感障礙患者在3 種發作狀態下的血清細胞因子水平，探討了炎癥反應對疾病發生發展的影響，以期提供新的治療靶點。