急性胰腺炎患者外周血單個核細胞中PRDM3水平與預后的關系

張子豪 王昌生 黎 雄 鐘業騰

急性胰腺炎是常見的急腹癥之一，具有起病急、病情進展快等特點，若不及時救治，預后往往較差，甚至導致患者死亡[1-2]。若能及時了解影響急性胰腺炎患者預后的危險因素，采取對癥治療，將極大改善患者的預后情況，降低病死率。目前，臨床上鮮有準確度較高的生物學指標用以預判急性胰腺炎的預后。鋅指蛋白轉錄抑制因子3(PRDM3)是PRDM家族成員之一，在造血、細胞分化及凋亡方面發揮著重要作用[3-4]。有研究表明，PRDM3在正常胰腺腺泡細胞中低表達，但在慢性胰腺炎患者的胰腺組織中呈高表達；急性胰腺炎小鼠的胰腺組織中PRDM3表達升高，且與胰腺炎性反應有關[5]。由此推測，檢測急性胰腺炎患者外周血單個核細胞中PRDM3的表達水平或可預判患者預后情況。本文對此展開研究，以探究急性胰腺炎的預后標志物。

1 資料與方法

1.1 一般資料

前瞻性選取2016年5月至2020年1月在海南省東方市東方醫院接受治療的311例急性胰腺炎患者作為研究對象。患者均參照《中國急性胰腺炎診治指南(2013年，上海)》[6]中的標準確診。納入標準：(1)年齡>18歲；(2)入組前未接受相關治療；(3)能夠配合完成研究；(4)簽署了知情同意書。排除標準：(1)伴自身免疫性疾病；(2)心、肝、腎功能嚴重異常；(3)伴心、腦血管疾病；(4)有長期免疫抑制劑服藥史；(5)有惡性腫瘤。本次研究中男性222例，女性89例，年齡為35～68歲，平均年齡為(50.26±7.34)歲。根據急性胰腺炎患者治療后28 d的預后情況將其分為2組：生存組265例，死亡組46例。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 臨床信息收集

收集受試者的年齡、性別、體質量指數(BMI)、吸煙史、急性胰腺炎病因(酒精性、膽源性、高脂血癥性)、脂肪酶、血鈣、白細胞計數(WBC)、C反應蛋白(CRP)、急性生理與慢性健康評分Ⅱ(APACHEⅡ)、急性胰腺炎嚴重程度床邊指數(BISAP)及入院28 d內死亡情況等信息。

1.3 外周血單個核細胞中PRDM3水平檢測

分別于急性胰腺炎患者入組當日及治療3 d時抽取空腹肘部靜脈血10 mL，采用Ficoll密度梯度離心法分離外周血中單個核細胞[7]。采用蛋白質印跡法檢測單個核細胞中PRDM3的表達水平，具體如下：RIPA裂解液裂解單個核細胞，分離出蛋白，采用BCA法進行蛋白定量；10% SDS-PAGE分離膠電泳至溴酚藍跑出膠面，轉膜，5%脫脂牛奶室溫封閉1 h；一抗，4 ℃孵育過夜；二抗，室溫孵育2 h；ELC顯影。使用ImageJ軟件讀取灰度值[8]。

1.4 統計學分析

2 結果

2.1 兩組的基本資料比較

兩組在年齡、性別、BMI、吸煙史、病因、WBC和CRP方面比較，差異均無統計學意義(P均>0.05)。生存組血鈣水平高于死亡組，而脂肪酶水平、APACHEⅡ評分和BISAP評分均低于死亡組，差異均有統計學意義(P均<0.05)。見表1。

表1 兩組的基本資料比較

2.2 兩組外周血單個核細胞中PRDM3水平比較

兩組治療前PRDM3水平比較，差異無統計學意義(P>0.05)。兩組治療3 d后PRDM3的相對表達量均較治療前降低，且生存組PRDM3的相對表達量低于死亡組，差異均有統計學意義(P均<0.05)。見表2和圖1。

表2 兩組PRDM3的相對表達量比較()

圖1 兩組PRDM3的蛋白電泳圖

2.3 PRDM3診斷急性胰腺炎患者預后的效能分析

治療3 d后PRDM3診斷急性胰腺炎預后的ROC曲線下面積(AUC)大于治療前PRDM3和APACHEⅡ評分，差異均有統計學意義(Z=7.454，P<0.001；Z=2.820，P=0.005)。治療3 d后PRDM3診斷急性胰腺炎預后的AUC大于BISAP評分，但差異無統計學意義(Z=1.951，P=0.051)。見表3和圖2。

表3 各指標診斷急性胰腺炎的效能比較

圖2 各指標診斷急性胰腺炎預后的ROC曲線

2.4 影響急性胰腺炎患者預后的危險因素分析

將急性胰腺炎患者預后作為因變量，將可能影響急性胰腺炎預后的指標，包括血鈣、脂肪酶、APACHEⅡ評分、BISAP評分和治療3 d后PRDM3作為自變量納入Logistic回歸分析模型，結果顯示血鈣是急性胰腺炎預后的獨立保護因素(P<0.05)，而APACHEⅡ評分、BISAP評分和治療3 d后PRDM3是急性胰腺炎預后的獨立危險因素(P<0.05)。見表4。

表4 影響急性胰腺炎患者預后的危險因素分析

3 討論

近年來，中國急性胰腺炎的發病率呈升高趨勢，病死率為5%～10%[9]。探究急性胰腺炎患者預后的影響因素不僅可指導臨床治療，還對患者的預后評估有著重要意義。基于Ye等[5]的研究結論，推測急性胰腺炎患者外周血單個核細胞中PRDM3的表達水平與患者的預后有關。本研究比較了生存組與死亡組外周血單個核細胞中PRDM3的表達水平，結果顯示生存組治療3 d后PRDM3的相對表達量低于死亡組，提示治療3 d后PRDM3的表達水平可能與患者預后有關，或可評價預后情況。

既往研究表明，APACHEⅡ評分、BISAP評分在重癥急性胰腺炎預后評估中具有較高價值，尤其適用于發病至救治時間短于3 d的重癥急性胰腺炎患者[10]。APACHEⅡ評分在臨床上常用于評價急性胰腺炎患者的病情和預后情況[11]。BISAP評分可用于評價急性胰腺炎患者病情的嚴重程度，并在評價全身并發癥、器官衰竭及死亡方面具有較高價值[12]。本研究構建了APACHEⅡ評分、BISAP評分和治療3 d后PRDM3評價急性胰腺炎患者預后的ROC曲線，結果顯示治療3 d后PRDM3診斷急性胰腺炎預后的AUC、敏感度和特異度分別為0.885、86.96%和80.00%，其診斷效能與BISAP評分相當，兩者的診斷效能均高于APACHEⅡ評分，上述結果提示治療3 d后的PRDM3在急性胰腺炎患者預后評估中具有一定價值。

田阿各等[13]研究表明，血鈣是急性胰腺炎患者預后的獨立保護因素，而APACHEⅡ評分是急性胰腺炎患者預后的獨立危險因素。王輝等[14]研究亦證實，APACHEⅡ評分是急性胰腺炎患者預后的獨立危險因素。此外，安園[15]指出APACHEⅡ評分和BISAP評分均是急性胰腺炎預后的獨立危險因素。本文采用多因素Logistic回歸方法分析影響急性胰腺炎患者預后的相關因素，結果顯示血鈣是急性胰腺炎預后的獨立保護因素，而APACHEⅡ評分和BISAP評分是急性胰腺炎預后的獨立危險因素，與上述研究結果一致。本研究結果顯示，治療3 d后PRDM3水平與急性胰腺炎患者預后不良有關，推測其原因可能是急性胰腺炎患者的PRDM3表達水平升高，參與了炎性反應及胰腺腺泡細胞穩態調節，因此PRDM3水平可反映機體的炎性反應情況及胰腺損傷情況，進而反映患者的預后情況。

綜上所述，急性胰腺炎患者外周血單個核細胞中PRDM3水平與患者預后有關，檢測其水平有助于預后評估。本研究因樣本量偏小，且為單中心研究，分析結果可能存在一定偏倚，下一步將開展大樣本、多中心研究，以驗證本研究結論。