窄葉鮮卑花與葉表皮組織構造相關的脂肪類成分分析＊

李 運，白賀明，邱國玉，楊永建

(1.蘭州市食品藥品檢驗檢測研究院/甘肅省種植中藥材外源性污染物監測工程研究中心，甘肅 蘭州 730050；2.蘭州大學藥學院，甘肅 蘭州 730000)

窄葉鮮卑花Sibiraea angustata (Rehd.)Hand.-Mazz.為薔薇科鮮卑花屬植物，生長于山坡灌木叢中或山谷砂石灘上，海拔3 100 m 以上，分布于我國青海南部、甘肅東南部、云南西北部、西藏東南部和四川西部[1]。藏族民間常以其枝葉及果序或帶果實的果枝入藥，具有消食理氣、散熱消痞，祛風寒的功效[2]，現代藥理學研究表明，具有調節脂代謝[3]、抗氧化[4]、抑制K 562 腫瘤細胞體外生長[5]等作用。為探明窄葉鮮卑花的特殊環境對該植物的組織構造以及與組織構造相關的特征性成分產生的影響，本研究首次對窄葉鮮卑花與其葉表皮組織構造相關的脂肪類成分進行分析，為進一步合理開發這一藏藥資源提供科學依據。

1 儀器與材料

1.1 試劑與儀器

N,O-雙（三甲基硅烷基）三氟乙酰胺(BSTFA)（上海晶純試劑有限公司）；石油醚、氯仿均為分析純（天津化學試劑有限公司）。JSM-6380LV 型電子顯微鏡；Agilent 6890/5973 型氣相質譜聯用儀。

1.2 試驗材料

A（甘肅夏河達宗湖2009.06.21 海拔3 100 m）；B（甘肅夏河達宗湖2009.07.18）；C（甘肅夏河達宗湖2009.08.15）；D（C 的炮制品）；E（甘肅合作當周草原2009.08.14 海拔2 980 m）；F（西藏拉薩多底溝2009.08海拔4 000 m），以上樣品經蘭州大學藥學院楊永建教授鑒定，均為窄葉鮮卑花Sibiraea angustata(Rehd.) Hand.-Mazz.的葉。

2 方法

2.1 葉表皮微形態觀察

成熟、完整、干燥的窄葉鮮卑花葉片，取中部0.5 cm×0.5 cm 小塊直接貼在觀察臺上，鍍導電膜，在JSM-6380LV 型電子顯微鏡下觀察，拍照。

2.2 脂肪類成分分析

取窄葉鮮卑花的葉粉碎，過40 目篩，分別稱取5 g，置于具塞錐形瓶中，加入30 mL 石油醚，超聲提取3 次，合并，濃縮至30 mL，取濃縮液1 mL，轉入1.5 mL埃芬道夫管中，真空干燥后加入30 μL BSTFA，密封，60℃反應30 min 后，加0.5 mL 氯仿進行氣相色譜-質譜聯用儀器分析，分析條件：SE-54,50 m×250 μm×0.50 μm 毛細管柱（中科院蘭州化物所色譜研究中心）；進樣口溫度：280℃；進樣方式：不分流；載氣流速：1.0 mL/s；升溫程序：100℃→280℃（20℃/min），保持10 min；氣化室溫度為260℃；載氣為高純氦氣。質譜傳輸線溫度為280℃；EI 源；電子轟擊能量70 eV；離子源溫度250℃；溶劑延遲5.0 min；質量掃描范圍14～400 amu；進樣量：2μL。樣品總離子流圖如圖1 所示，并按峰面積歸一化法計算各組成成分的百分含量。

圖1 樣品A 總離子流圖

3 結果與討論

3.1 窄葉鮮卑花葉表皮微形態

掃描電鏡結合光學顯微鏡觀察結果表明：窄葉鮮卑花葉表皮細胞排列緊密；具非腺毛，基部較粗，先端尖削，長37.5～166 μm；葉上、下表皮均具氣孔，分布較為分散，上、下表皮氣孔形態基本一致，大部分氣孔取向無規則，形狀多為長寬相差不大的橢圓形，外拱蓋為單層，內緣平滑，氣孔明顯下陷，呈環式或不定式，副衛細胞5～6 個，上表皮氣孔長徑14.1～21.3 μm，下表皮氣孔長徑13.1～20 μm；窄葉鮮卑花葉的上、下表皮細胞、上、下表皮中的非腺毛及氣孔的副衛細胞和保衛細胞的外壁均覆蓋有較厚的點狀或鱗片狀紋飾的角質，如圖2 所示。以上微形態顯示出窄葉鮮卑花具有旱生植物的特征，是其適應于高海拔、晝夜溫差較大的生境的體現，這些特征為窄葉鮮卑花，以及鮮卑花屬植物的鑒定、分類學研究具有一定的參考價值。

圖2 窄葉鮮卑花葉表皮微形態

3.2 脂肪類成分分析

由于角質層是由表皮細胞所分泌，覆蓋于植物地上器官表面的一層非細胞結構，由表層蠟、角質等組成的異源復合物，其功能主要起保護作用，對組織植物體內水分蒸騰和抗蟲害具有重要作用[6]，另外，植物葉角質層的特征在分類學中的價值也已得到普遍承認[7]。為探明窄葉鮮卑花葉表皮角質層的化學組成，對其分類、鑒定和資源利用提供依據，作者首次對窄葉鮮卑花與葉組織構造相關的脂肪類成分進行分析。（見表1）。

表1 窄葉鮮卑花葉中各脂肪類成分的含量（%）

脂肪類成分分析結果首次證實，窄葉鮮卑花葉中富含月桂酸、棕櫚酸、植物醇、亞油酸、α-亞麻酸、硬脂酸和正二十烷；其中不同采收時間（6、7 和8 月份）樣品中所含成分一致，含量有差別，其中棕櫚酸含量在24.4%～16.3%之間，不飽和脂肪酸亞油酸的含量在15.4%～9.9%之間，α-亞麻酸的含量在43.3%～28.4%之間。采收時間相同產地不同的樣品中所含成分與含量均有差異，其中甘肅夏河達宗湖樣品C中α-亞麻酸（43.3%）含量最高，不含硬脂酸；甘肅合作當周草原的樣品E 中月桂酸（17%）和棕櫚酸(44.1%)含量最高，不含亞油酸；西藏拉薩多底溝的樣品F中植物醇(43.4%)含量最高，不含硬脂酸。隨著采集時間的向后推移，窄葉鮮卑花中的不飽和脂肪酸（植物醇、亞油酸、α-亞麻酸）的含量明顯增高，這是由于窄葉鮮卑花的生長環境屬于高海拔、高寒區，隨著采集時間的向后推移，環境溫度降低明顯，有利于增強植物膜體系的穩定性，是窄葉鮮卑花適應環境，增強抗旱和抗寒性的一種表現[8]，與其表型特征一致。

亞油酸、α-亞麻酸是人體必需的重要不飽和脂肪酸，炮制后窄葉鮮卑花葉中未檢測到亞油酸和α-亞麻酸，而正二十烷的含量增加到了60.7%，因此認為，炮制工藝[9]使得亞油酸和α-亞麻酸氧化并損失。本實驗結果為合理開發這一藏藥資源及在新型藥物的開發等方面提供依據。