淋巴細(xì)胞亞群檢測在小兒哮喘診斷中的臨床價值

王群 李娟 孫遜

徐州市兒童醫(yī)院檢驗科221000

支氣管咳喘 (哮喘)是5 歲以下小兒常見呼吸系統(tǒng)疾病,若治療不及時,會對小兒免疫系統(tǒng)及生長發(fā)育帶來嚴(yán)重的影響,也會給社會、家庭帶來嚴(yán)重的負(fù)擔(dān)[1]。流行病學(xué)資料數(shù)據(jù)顯示,目前我國小兒哮喘呈現(xiàn)高發(fā)病率和高增長率趨勢,發(fā)病率約為2.4‰～5.6‰,年增長率約為0.1‰～0.3‰[2-3]。研究報道指出,越早對急性小兒哮喘進行有效控制,尤其是在3歲以下能得到有效控制,可以降低成年后哮喘反復(fù)發(fā)作風(fēng)險[4]。小兒哮喘極易因大量炎性因子及淋巴細(xì)胞亞群異常表達的持續(xù)作用,引起持續(xù)的氣道高反應(yīng),從而表現(xiàn)為較強的持續(xù)性反復(fù)哮喘[5]。小兒哮喘與細(xì)胞免疫狀態(tài)異常相關(guān),如外周血T 淋巴細(xì)胞亞群就與小兒哮喘存在明顯的關(guān)系,但是否與小兒持續(xù)性反復(fù)哮喘存在關(guān)系少見報道。本文在觀察淋巴細(xì)胞亞群檢測在小兒哮喘診斷中臨床意義的基礎(chǔ)上,進一步分析淋巴細(xì)胞亞群檢測與小兒持續(xù)性哮喘的關(guān)系,為臨床小兒哮喘診斷提供科學(xué)依據(jù)。

1 對象與方法

1·1 研究對象 選取2018年1月至2019年10月徐州兒童醫(yī)院健康體檢的小兒50名為健康對照組,兒科同期收治的哮喘小兒107例為病例觀察組進行回顧性研究。健康對照組,1～3周歲,身體健康,無呼吸系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)疾病及心肝腦腎疾病,近1個月未應(yīng)用任何糖皮質(zhì)激素。病例觀察組,1～3周歲,符合嬰幼兒哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn),患兒在48 h內(nèi)哮喘發(fā)作超過3次以上;血常規(guī)白細(xì)胞計數(shù)正常或稍微降低[6],診斷為小兒哮喘,無呼吸系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)疾病及心肝腦腎疾病,近1個月未應(yīng)用任何糖皮質(zhì)激素,排除發(fā)育不良導(dǎo)致的小兒哮喘。病例觀察組根據(jù)臨床癥狀及病史問詢結(jié)果分為急性發(fā)作組(突然發(fā)作喘息、咳嗽、氣促、胸悶等呼吸道癥狀,或者原有癥狀急劇加重,共44例)和持續(xù)發(fā)作組 (近3個月內(nèi)不同頻度或者不同程度的出現(xiàn)過喘息、咳嗽、氣促、胸悶等癥狀,共63例)。健康對照組、急性發(fā)作組、持續(xù)發(fā)作組3組小兒的一般資料比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P 值均>0.05),見表1。納入研究患兒家屬均簽署知情同意書,且經(jīng)徐州市兒童醫(yī)院倫理委員會論證通過(2017045)。

1·2 研究方法 對納入研究的所有受試小兒進行空腹采血2 ml,血液樣品2 000 r/min 離心處理20 min,離心半徑5 cm,采用流式細(xì)胞儀 [生產(chǎn)商:艾森生物 (杭州) 有限公司; 型號:NovoCyte D2040R;批準(zhǔn)文號:浙食藥監(jiān)械 (準(zhǔn))字2014 第2400581 號]進行T 細(xì)胞亞群細(xì)胞CD3+、CD4+、CD8+檢測,并計算CD4+/CD8+的值,分析健康對照組、急性發(fā)作組、持續(xù)發(fā)作組3組小兒的T 淋巴細(xì)胞亞群細(xì)胞水平差異。

表1 3組小兒的一般資料比較

1·3 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件,T淋巴細(xì)胞亞群細(xì)胞表達水平采用±s 描述;2組間比較采用t檢驗,多組間比較采用LSD-t 檢驗。P <0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2·1 3組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD3+比較 健康對照組、急性發(fā)作組、持續(xù)發(fā)作組小兒CD3+分別為(84.63±3.43)%、(73.82±2.61)%和(46.56±1.18)%,急性發(fā)作組和持續(xù)發(fā)作組均低于健康對照組,且持續(xù)發(fā)作組低于急性發(fā)作組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F =56.807,P <0.05),見表2。3組典型病例小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD3+流式細(xì)胞儀檢測見圖1。

2·2 3組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD4+比較 健康對照組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD4+為 (76.24±3.34)%,急性發(fā)作組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD4+為(50.89±2.26)%,持續(xù)發(fā)作組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD4+為(38.70±1.03)%。3組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD4+比較,急性發(fā)作組和持續(xù)發(fā)作組均低于健康對照組,且持續(xù)發(fā)作組低于急性發(fā)作組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=67.216,P <0.05)。見表2、圖2。

2·3 3組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD8+比較 健康對照組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD8+為 (57.82±2.39)%,急性發(fā)作組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD8+為(68.74±2.78)%,持續(xù)發(fā)作組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD8+為(91.08±3.42)%。3組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD8+比較,急性發(fā)作組和持續(xù)發(fā)作組均高于健康對照組,且持續(xù)發(fā)作組高于急性發(fā)作組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (F =7.019,P <0.05)。見表2、圖3。

2·4 3 組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD4+/CD8+比較 健康對照組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD4+/CD8+為1.46±0.54,急性發(fā)作組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD4+/CD8+為0.74±0.31,持續(xù)發(fā)作組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD4+/CD8+為0.42±0.18。3組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD4+/CD8+比較,急性發(fā)作組和持續(xù)發(fā)作組均低于健康對照組,且持續(xù)發(fā)作組低于急性發(fā)作組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (F =62.115,P <0.05)。見表2。

3 討論

小兒哮喘給患兒的生活質(zhì)量及生長發(fā)育帶來了嚴(yán)重的威脅,其具體發(fā)病機制尚未完全明確,但有文獻報道顯示,變態(tài)性反應(yīng)及氣道炎性反應(yīng)與小兒哮喘病理機制具有密切的相關(guān)性,而機體免疫功能是影響小兒變態(tài)性反應(yīng)及氣道炎性反應(yīng)的關(guān)鍵因素[7]。T 淋巴細(xì)胞亞群參與機體免疫應(yīng)答,如輔助性T 淋巴細(xì)胞及其他T 淋巴細(xì)胞所導(dǎo)致的免疫應(yīng)答,從而造成小兒哮喘的發(fā)生,可能在小兒哮喘發(fā)生、發(fā)展中起到重要作用[8],研究T 淋巴細(xì)胞亞群水平變化與小兒哮喘發(fā)生、發(fā)展的相關(guān)性有一定的臨床意義。

表2 3組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比較表 (±s)

表2 3組小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比較表 (±s)

注:與健康對照組比較,a P <0.05;與急性發(fā)作組比較,b P <0.05

組別例數(shù)CD3+ (%)CD4+ (%)CD8+ (%)CD4+/CD8+健康對照組50 84.63±3.43 76.24±3.34 57.82±2.39 1.46±0.54急性發(fā)作組44 73.82±2.61a 50.89±2.26a 68.74±2.78a 0.74±0.31a持續(xù)發(fā)作組63 64.56±1.18b 38.70±1.03b 91.08±3.42b 0.42±0.18ab F 值56.807 67.216 7.019 62.115 P 值<0.001<0.001 0.030<0.001

圖1 3組典型病例小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD3+流式細(xì)胞儀檢測圖 A:急性發(fā)作組;B:健康對照組;C:持續(xù)發(fā)作組

圖2 3組典型病例小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD4+流式細(xì)胞儀檢測圖 A:急性發(fā)作組;B:健康對照組;C:持續(xù)發(fā)作組

圖3 3組典型病例小兒T 淋巴細(xì)胞亞群CD8+流式細(xì)胞儀檢測圖 A:急性發(fā)作組;B:健康對照組;C:持續(xù)發(fā)作組

3·1 T 淋巴細(xì)胞亞群異常與小兒哮喘發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān) CD3+、CD4+、CD8+均屬于T 淋巴細(xì)胞亞群中的重要組成部分。CD3+為一種蛋白質(zhì)復(fù)合物,具有CD3γ鏈和CD3δ鏈。這兩個鏈具有參與T 細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的功能,是免疫系統(tǒng)中的重要分子標(biāo)志物,其表達水平降低則可使機體免疫功能受到影響[9]。而CD4+、CD8+的高低變化則主要揭示機體免疫功能的被強化或被弱化,CD4+/CD8+被認(rèn)為是機體免疫功能評估的最關(guān)鍵指標(biāo)[10-11]。本研究發(fā)現(xiàn),無論是急性發(fā)作哮喘患兒,還是持續(xù)性發(fā)作哮喘患兒的CD3+、CD4+表達水平均低于健康兒童,而CD8+則高于健康兒童,同時衡量機體免疫功能的關(guān)鍵指標(biāo)CD4+/CD8+則均低于健康兒童(P 值均<0.05),這一結(jié)果得到國內(nèi)外大量研究的支持[12-14]。提示哮喘發(fā)作時,CD3+、CD4+表達水平被抑制,而CD8+表達水平則被激活,T 淋巴細(xì)胞亞群在小兒哮喘發(fā)作時的功能和作用,其可能導(dǎo)致免疫功能抑制,最終誘導(dǎo)小兒哮喘的發(fā)生。

3·2 T 淋巴細(xì)胞亞群檢測可用于小兒持續(xù)性哮喘的預(yù)測診斷 本文將106例小兒哮喘病例按進行急性發(fā)作和持續(xù)性發(fā)作進行分組,并分析2組小兒哮喘病例的T 淋巴細(xì)胞亞群表達情況,結(jié)果顯示,持續(xù)發(fā)作哮喘患兒的CD3+、CD4+表達水平均低于急性發(fā)作哮喘患兒,CD8+則高于急性發(fā)作哮喘患兒,同時衡量機體免疫功能的關(guān)鍵指標(biāo)CD4+/CD8+則均低于急性發(fā)作哮喘患兒 (P 值均<0.05)。分析認(rèn)為,小兒哮喘的主要病因在于激活免疫系統(tǒng)功能的T 淋巴細(xì)胞受到抑制,最終導(dǎo)致兒童免疫功能持續(xù)性低下,進而導(dǎo)致小兒持續(xù)性高氣道反應(yīng),導(dǎo)致哮喘持續(xù)性反復(fù)發(fā)作[15]。T 淋巴細(xì)胞亞群水平的持續(xù)紊亂或失衡,對于兒童哮喘具有明顯的病情促進作用,可使小兒急性哮喘發(fā)展為小兒持續(xù)性哮喘[16-17]。本研究結(jié)果顯示,持續(xù)性哮喘發(fā)作患兒的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+表達水平較對照組低,而CD8+的表達水平則較高(P 值均<0.05),提示T 淋巴細(xì)胞亞群檢測在預(yù)測診斷小兒持續(xù)性哮喘具有一定的臨床意義。

綜上所述,外周血T 淋巴細(xì)胞亞群與小兒哮喘的發(fā)生、發(fā)展存在明顯的相關(guān)性。與健康兒童比較,哮喘患兒的T 淋巴細(xì)胞亞群表達存在差異,且持續(xù)性哮喘患兒的T 淋巴細(xì)胞亞群表達差異更為顯著,故淋巴細(xì)胞亞群檢測不僅在小兒哮喘診斷中有一定的臨床意義,而且在反復(fù)持續(xù)性小兒哮喘診斷中也具有一定的臨床意義,外周血T 淋巴細(xì)胞亞群在健康兒童、急性發(fā)作哮喘患兒和持續(xù)性發(fā)作哮喘患兒中的這種表達差異,值得在小兒哮喘臨床診斷中給予關(guān)注。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突