規模豬場偽狂犬病gB 與gE 抗體檢測綜合對比分析

吳雙燕 韋玉慶 韋玉姣 蘇益瓊 余波 秦雪培 施佳露 經孝紅

(1，廣西鹿寨縣動物疫病預防控制中心 545600；2，廣西鹿寨縣農業執法大隊 545600；3，廣西鹿寨縣寨沙鎮水產畜牧獸醫站 545603；4，廣西鹿寨縣畜牧工作站 545600)

豬偽狂犬病（Porcine pseudorabies,PPR）是由偽狂犬病病毒（Pseudorabies Virus,PRV）引起的一種急性傳染病[1]，我國將其列為二類動物傳染性疾病。豬感染該病后臨床癥狀因感染日齡不同而表現各異：妊娠母豬表現為流產，產死胎、木乃伊胎；初生仔豬具有明顯的神經癥狀，并呈現急性致死性經過；育肥豬出現呼吸道癥狀，生長不良，并長期帶毒和排毒；公豬精液質量下降[2]，本病給養殖業造成嚴重的經濟損失。

為了了解鹿寨縣規模豬場豬偽狂犬病病毒（PRV）免疫抗體水平及野毒感染情況，有效控制規模豬場的偽狂犬病，2019年筆者對采自鹿寨縣平山鎮、中渡鎮、鹿寨鎮、寨沙鎮、導江鄉5 個鄉鎮的21 個規?；B殖場共計992 份血清樣品進行了PRV gB、PRV gE 抗體檢測綜合對比分析，以期為鹿寨縣制定豬偽狂病的防控計劃和措施提供數據支持。對農民持續穩定增收、現代農業發展、社會主義新農村建設和全面小康目標的實現具有極其重要的戰略意義。

1 材料與方法

1.1 血清樣品

將流行病學問卷調查結果中免疫過豬偽狂犬病基因缺失苗的規模場群作為采樣群體。根據采樣策略，隨機采集鹿寨縣5個鄉鎮（平山鎮、中渡鎮、鹿寨鎮、寨沙鎮、導江鄉）、不同生長階段（母豬、保育豬、仔豬）的21 個規模化豬場的血清樣本，共計采集到豬血清樣本992 份。

1.2 檢測方法

檢測過程嚴格按照豬偽狂犬病gB 抗體檢測試劑盒及豬偽狂犬病毒gE 糖蛋白阻斷ELISA 抗體檢測試劑盒的說明書進行，檢測豬偽狂犬病的gB 及gE 抗體。

1.3 檢測試劑

西班牙海博萊生物大藥廠gB/gE 抗體ELISA 檢測試劑盒。

2 檢測結果與分析

2.1 鹿寨縣南北地區不同豬場豬偽狂犬病gB、gE 抗體檢測結果

根據地理位置分布，對鹿寨縣南部跟北部地區的血清進行統計檢測分析，結果如下表1 所示，經檢測，南北地區血清樣品PRV gB 抗體陽性率為47.7%，PRV gE 抗體陽性率為9.4%。平山鎮無偽狂犬野毒感染的豬場共計2 家，占采樣比25% （2/8）；中渡鎮無偽狂犬野毒感染的豬場共計3 家，占采樣比75%（3/4）；導江鄉無偽狂犬野毒感染的豬場共計5 家，占采樣比71.43% （5/7）。平山鎮有偽狂犬野毒感染的豬場共計6 家，占采樣比75% （6/8）；中渡鎮有偽狂犬野毒感染的豬場共計1 家，占采樣比25% （1/4）；導江鄉有偽狂犬野毒感染的豬場共計2家，占采樣比28.57% （2/7）。豬偽狂犬病病毒在鹿寨縣南北地區都有所流行，在北部地區平山鎮流行范圍廣，流行率高。

2.2 鹿寨縣不同規模豬場豬偽狂犬病gB、gE 抗體檢測結果

根據養殖規模大小，對鹿寨縣不同規模養殖場的血清進行統計檢測分析，結果如下表2 所示，PRV gB 抗體陽性率最高的為大型豬場86.46%，其次到中型豬場37.72%，最低的為小型豬場36%；PRV gE 抗體陽性率最高的為小型豬場14.84%，其次到中型豬場6.38%，最低為大型豬場3.13%。不同規模豬場PRV gB 抗體陽性率與PRV gE 抗體陽性率呈負相關。

2.3 鹿寨縣不同生長階段豬偽狂犬病gB、gE 抗體檢測結果

根據生長階段不同，對送檢的血清結果按照母豬、育肥豬、仔豬分別進行統計分析，結果如下表3 所示，PRV gB 抗體陽性率最高的為母豬96.2%，其次為育肥豬33.33%，最低的為仔豬32.3%；PRV gE 抗體陽性率最高的為母豬24.57%，其次為仔豬6.15%，最低的為育肥豬0.35%。育肥豬、仔豬PRV gB、PRV gE 抗體陽性率的相關性與不同規模豬場PRVgB、PRVgE 抗體陽性率的相關性相似。

表1 南北地區不同豬場PRV gB、gE 抗體檢測結果

表3 不同生長階段豬偽狂犬病gB、gE 抗體檢測結果

3 分析與討論

本次調查分析所用的豬血清樣品采自鹿寨縣21 個豬場，各豬場均進行了PRV 基因缺失苗的免疫。當豬接種了缺失gE糖蛋白的基因缺失苗后，將產生缺少gE 糖蛋白的抗體；由于PRV 野毒攜帶gE 基因，且無論活疫苗接種還是野毒感染都有機會刺激機體產生gB 抗體。因此，采用豬偽狂犬病毒gEELISA 抗體檢測試劑盒可以鑒別豬群的野毒感染情況。在PRV gE 抗體水平為陰性的基礎上，通過PRV gB 抗體水平能知道該場的疫苗免疫效果。

PRV gB、PRV gE 抗體血清學檢測結果綜合對比表明，鹿寨縣南北地區存在偽狂犬野毒感染情況，尤以平山鎮規模豬場偽狂犬病野毒感染比例較高，防控形勢嚴峻。這可能與平山鎮的養殖密度、養殖模式、生豬流通情況息息相關。而導江鄉的對比檢測結果顯示，導江鄉規模豬場的PRV 陰性場較多，PRV gB 抗體水平較高，疫苗免疫效果普遍要高于其他鄉鎮。分析其原因有以下兩點：一是得益于導江鄉的天然地理位置，導江鄉境內有柳江河阻隔，各豬場間隔較遠，山川河流的天然屏障等有利外界環境對整個導江鄉PRV 的整體流行起到一定的阻隔作用。二是豬偽狂犬疫苗的免疫毒株、免疫程序、免疫劑量、采樣時機、生豬流通等因素也會影響當地PRV 的流行態勢。

大型豬場gB 抗體陽性率最高為86.46%，gE 抗體陽性率最低為3.13%；而小型豬場gB 抗體陽性率最低為36%，gE 抗體陽性率最高為14.84%。這與規模豬場的環境管理、養殖模式、養殖理念、人養設備息息相關。大型豬場通常都是規模化生產，在場地建設、生產設備、技術人才引進等方面要遠遠優于中小型豬場。良好的“人養設備”，對豬群的免疫效果大有不同，豬群抗體水平參差不齊，對疾病流行產生較大影響。而小型豬場由于技術水平，生產條件，養殖觀念落后等因素造成PRV 的嚴重流行態勢。

母豬群的gB 抗體陽性率為96.2%、gE 抗體陽性率為24.57%，其兩種抗體陽性率都明顯高于育肥豬和仔豬。出現這種結果說明母豬群是鹿寨縣規模豬場PR 野毒株感染的主要來源，與韓剛豬偽狂犬病流行病學調查[3]、湯海平調查與分析[4]的結果一致。二是說明各個規模豬場都非常重視母豬群的偽狂犬病免疫工作，疫苗免疫效果好。而育肥豬的gB 抗體陽性率稍微高于仔豬gB 抗體陽性率，但隨著日齡的增大，育肥豬gE抗體陽性率明顯低于仔豬gE 抗體陽性率，這可能與仔豬受母豬母源抗體影響較大有關[5-7]。由此可以看出，母豬群及后備豬群的野毒清除情況是決定該場PR 凈化的首要關鍵點；母豬群的偽狂犬病免疫工作也是整個豬場偽狂犬病免疫的重中之重。

4 建議

豬偽狂犬病仍是危害目前規?；i場的重要傳染病。雖然目前養殖戶的免疫意識較高，但通過此次研究明顯可以看出，鹿寨縣各鄉鎮規模豬場的免疫水平參差不齊，該病在鹿寨縣一定范圍內流行，根除的壓力偏大。因此，提出以下建議。

（1）良好的生物安全是前提，做好豬場和外界的隔離，出入場人員、車輛的消毒、場內滅鼠工作、慎重定點引入種豬等工作。

（2）合理制定種豬高效免疫計劃，每半年進行一次疫苗抗體水平檢測，對疫苗抗體水平低下的個體或滴度參差不齊的群體予以加強免疫或普免。在免疫前后給豬群飲水或飼料中添加免疫促進劑，以促進豬群的免疫應答；添加適量的電解多維等營養性藥物，以提高豬群抗應激能力。

（3）果斷淘汰病豬。對有繁殖障礙的母豬全部進行檢測，留作種用的仔豬在100 日齡左右檢測，育肥豬不定期進行抽檢。通過檢測掌握豬群野毒感染狀況，堅決淘汰野毒感染陽性豬。