慢性牙周炎合并2型糖尿病患者齦溝液內(nèi)脂素水平檢測(cè)及臨床意義

謝倩倩，高秀秋，張 超

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院，遼寧 錦州121000)

2型糖尿病和牙周炎是臨床中比較常見(jiàn)的兩大類慢性疾病，近些年來(lái)關(guān)于糖尿病和牙周炎之間的雙向關(guān)系已經(jīng)受到學(xué)者們的廣泛關(guān)注和認(rèn)可。牙周炎影響糖尿病的研究較少，有學(xué)者認(rèn)為牙周炎的發(fā)生增加了糖尿病患者血糖控制不佳的風(fēng)險(xiǎn)[1]。而糖尿病并發(fā)癥除引起各種心血管、神經(jīng)系統(tǒng)、腎等并發(fā)癥外，還可引起牙周組織加速破壞，成為牙周炎進(jìn)展的危險(xiǎn)因素之一[2]。牙周病已被認(rèn)為是糖尿病的第六并發(fā)癥[3]。內(nèi)脂素是由Fukuhara等[4]發(fā)現(xiàn)的一種脂肪因子，可促進(jìn)內(nèi)臟脂肪細(xì)胞的分化，參與胰島素抵抗、糖尿病、肥胖、代謝綜合征等疾病的發(fā)生。近些年來(lái)，許多學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)脂素在牙周炎患者的血清中、齦溝液中及唾液中均有表達(dá)，并且檢測(cè)水平均高于健康體檢者，Pradeep等[5]發(fā)現(xiàn)內(nèi)脂素在慢性牙周炎患者的齦溝液中的濃度高于血清中的濃度。基于上述已有研究結(jié)果，為進(jìn)一步探討內(nèi)脂素在糖尿病和牙周炎發(fā)病機(jī)制中的可能作用，本研究以2型糖尿病合并牙周炎患者為研究對(duì)象，探討其齦溝液中內(nèi)脂素表達(dá)水平及其與各項(xiàng)牙周臨床指標(biāo)的相關(guān)關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取在錦州醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院牙周科、綜合內(nèi)科2017年1月至2018年1月就診的慢性牙周炎患者30例(B組)、慢性牙周炎合并2型糖尿病患者30例(C組)，健康對(duì)照組選取我院的部分師生30例(A組)(各組均為男性15例，女性15例)，年齡25～56歲，中位年齡44歲。三組在性別與年齡上比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P>0.05)，參加研究者均簽署知情同意書(shū)并符合以下診斷標(biāo)準(zhǔn)。①慢性牙周炎：選取中、重度且具備全口至少有10顆可進(jìn)行牙周評(píng)價(jià)的慢性牙周炎患者，標(biāo)準(zhǔn)符合1999年牙周病學(xué)分類標(biāo)準(zhǔn)：其中至少有4顆磨牙(不包括第三磨牙)；有1個(gè)或多個(gè)探診深度(Probing depth，PD)≥4 mm、牙周附著喪失(Attachment loss,AL)≥3～4 mm且至少分布于3個(gè)象限內(nèi)；X線顯示牙槽骨吸收≥1/3分布多個(gè)位點(diǎn),且全身健康。②2型糖尿病：遵循中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病學(xué)分會(huì)建議，我國(guó)人群中采用WHO(1999)的診斷指標(biāo)，確診的2型糖尿病至少發(fā)病6個(gè)月以上且近期病情沒(méi)有變化并一直采用口服降糖藥物的2型糖尿病患者。③牙周健康：缺失牙數(shù)(除第三磨牙或正畸需要的拔牙、外傷或重度齲失牙及先天性缺牙外的失牙)不≤2顆，全口牙齒平均AL≤0.5 mm、鄰面AL≥3 mm的位點(diǎn)數(shù)為0。排除標(biāo)準(zhǔn)：①侵襲性牙周炎；②惡性口腔疾病；③腫瘤；④高血壓；⑤心臟病；⑥風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；⑦吸煙，可被納入，但要有記錄；⑧影響牙周炎的其他系統(tǒng)性疾病。

1.2 研究方法

1.2.1 牙周狀況檢查：全部受試者接受口腔檢查，由同一位醫(yī)生完成。使用Williams牙周探針檢查每顆牙6個(gè)位點(diǎn)(頰、舌側(cè)的近中、中央、遠(yuǎn)中)的PD和AL，根據(jù)Silneess和Loe 提出指數(shù)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)記錄菌斑指數(shù)(Plaque index,PLI),并記錄Mazza提出的改良出血指數(shù)(Bleeding index,BI)。

1.2.2 樣本收集與保存：每名受試者選取2顆牙采集齦溝液樣本，這2顆牙需分布于不同象限內(nèi)，且牙周探診深度≥5 mm，共120份樣本。將Periopaper濾紙條輕輕插入并留置于牙周袋或齦溝內(nèi)30 s,獲取齦溝液樣本,采用齦溝液測(cè)量?jī)x測(cè)量并記讀數(shù)后，置于裝有0.1% BS緩沖液的EP管中，冷凍保存于-80 ℃冰箱中。為保證內(nèi)脂素生物學(xué)活性，所收集的每一批次樣本保存時(shí)間為2個(gè)月內(nèi)。

1.2.3 樣本中內(nèi)脂素水平檢測(cè)：將標(biāo)本解凍后，水平震蕩1 h(室溫下)，放入低溫離心機(jī)中離心20 min(2000～3000 r/min)，收集上清液使用ELISA試劑盒測(cè)定內(nèi)脂素含量。操作步驟嚴(yán)格按照ELISA試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。

1.2.4 糖化血紅蛋白(HbA1c)水平檢測(cè)：使用全自動(dòng)糖化血紅蛋白分析儀(日本)檢測(cè)所有受試者空腹前臂靜脈血HbA1c含量并保存檢測(cè)結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)以SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，牙周臨床指標(biāo)、HbA1c指標(biāo)、齦溝液內(nèi)脂素含量組間比較，采用單因素方差分析，齦溝液內(nèi)脂素與牙周臨床指標(biāo)及HbA1c的相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組牙周臨床檢測(cè)指標(biāo)比較 見(jiàn)表1。采用方差分析及LSD-t兩兩比較，A組與B組牙周臨床指標(biāo)比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)；B組與C組牙周臨床檢測(cè)指標(biāo)比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。

表1 三組牙周臨床檢測(cè)指標(biāo)比較

2.2 各組齦溝液中內(nèi)脂素與血清HbA1c水平比較 見(jiàn)表2。采用方差分析及LSD兩兩比較，B組與A組比較內(nèi)脂素水平明顯增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；C組與B組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；C組HbA1c水平與B組和A組比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。

表2 三組內(nèi)脂素與HbA1c水平比較

2.3 齦溝液中內(nèi)脂素水平與牙周臨床指標(biāo)及血清HbA1c相關(guān)性分析 見(jiàn)表3。采用Pearson相關(guān)性分析法，結(jié)果顯示，齦溝液內(nèi)脂素水平與各項(xiàng)牙周臨床指標(biāo)(PD、AL、BI、PLI)和HbA1c均呈正相關(guān)性(均P<0.001)。

表3 齦溝內(nèi)脂素分別與各項(xiàng)牙周臨床指標(biāo)和HbA1c相關(guān)性

3 討 論

許多研究已證明糖尿病和牙周炎之間存在著雙向關(guān)系，牙周炎被認(rèn)為是糖尿病的第六并發(fā)癥，糖尿病是牙周炎發(fā)生的危險(xiǎn)因素之一[2]。反之，牙周炎不僅對(duì)糖尿病患者血糖的控制產(chǎn)生影響，而且與糖尿病各種并發(fā)癥的發(fā)生有密切關(guān)系。近些年，已有許多專家對(duì)2型糖尿病和牙周炎兩種疾病之間的相互影響以及發(fā)生機(jī)制從不同的角度做了大量的研究[6-7]。

內(nèi)脂素是新近發(fā)現(xiàn)的由動(dòng)物內(nèi)臟脂肪組織分泌合成的細(xì)胞因子，具有類胰島素樣作用，增加胰島素抵抗，在炎癥反應(yīng)、糖脂代謝調(diào)解中發(fā)揮很重要作用[4]。一些研究從細(xì)胞層面上解釋了內(nèi)脂素是如何發(fā)揮其功能的，即內(nèi)脂素與胰島素受體結(jié)合，激發(fā)脂肪細(xì)胞和肌細(xì)胞攝取葡萄糖的同時(shí)抑制肝細(xì)胞釋放葡萄糖。一些國(guó)內(nèi)的中醫(yī)研究結(jié)果也證明了，益氣降糖飲聯(lián)合胰島素在治療妊娠期糖尿病上發(fā)揮了控制血糖和內(nèi)脂素水平的顯著效果[8]。在Haider等[9]的研究中發(fā)現(xiàn)：血漿內(nèi)脂素水平隨著血糖增高而增高。這與本研究結(jié)果中齦溝液內(nèi)脂素水平與血清HbA1c呈正相關(guān)性相似。在健康者的糖耐量實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，內(nèi)脂素的增加，降低了胰島素對(duì)葡萄糖反應(yīng)性分泌功能[10]。本研究中對(duì)慢性牙周炎合并2型糖尿病者、單純牙周炎者以及健康體檢者的齦溝液中內(nèi)脂素進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)：慢性牙周炎伴2型糖尿病組齦溝液中的內(nèi)脂素表達(dá)水平明顯高于單純慢性牙周炎組，說(shuō)明內(nèi)脂素不僅在單純的炎癥反應(yīng)和糖脂代謝中發(fā)揮功能，而且在慢性牙周炎和2型糖尿病兩種疾病的雙向關(guān)系中可能發(fā)揮某種促進(jìn)作用。

本研究中結(jié)果顯示：所有受試者齦溝液中內(nèi)脂素水平與各項(xiàng)牙周臨床指標(biāo)之間呈正相關(guān)性，即牙周炎癥越重，牙周組織破壞越多，齦溝液中內(nèi)脂素的表達(dá)有升高的趨勢(shì)，但其中的發(fā)生機(jī)制尚不清楚。關(guān)于內(nèi)脂素與炎癥發(fā)生的關(guān)系的相關(guān)研究中，Ozcan 等[11]在健康及牙周炎人群的牙齦組織中發(fā)現(xiàn)IL-1β、TNF-α的mRNA和蛋白表達(dá)與內(nèi)脂素存在呈明顯正相關(guān)性。內(nèi)脂素能夠促進(jìn)牙周組織中蛋白水解酶的合成，加重牙周組織的破壞[12]。國(guó)內(nèi)有研究顯示，牙周炎患者的內(nèi)脂素、PGE2水平均顯著高于健康受試者[13]。另一個(gè)研究中發(fā)現(xiàn)慢性牙周炎基礎(chǔ)治療后對(duì)血清中的脂肪因子水平產(chǎn)生一定影響[14]。多項(xiàng)國(guó)外研究同時(shí)證明了，通過(guò)牙周基礎(chǔ)治療，患者血清、唾液和齦溝液中內(nèi)脂素水平均有顯著降低[15-16]。此外，一些研究顯示，內(nèi)脂素可能參與促進(jìn)骨質(zhì)疏松患者的骨質(zhì)代謝發(fā)生過(guò)程[17]。結(jié)合本研究中，內(nèi)脂素與HbA1c呈正相關(guān)性的結(jié)果，我們認(rèn)為，內(nèi)脂素可能在參與T2DM的血糖控制同時(shí)，在慢性牙周炎合并2型糖尿病患者的發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮某種促進(jìn)疾病發(fā)生、發(fā)展的作用。

綜上， 慢性牙周炎合并2型糖尿病患者的發(fā)病機(jī)制比較復(fù)雜，本研究通過(guò)測(cè)定患者齦溝液中內(nèi)脂素水平，并分析其與各項(xiàng)牙周臨床指標(biāo)的相關(guān)性，結(jié)果表明：內(nèi)脂素可能作為一種生物標(biāo)志物參與慢性牙周炎合并2型糖尿病的發(fā)病過(guò)程。