叉頭框轉錄因子D3蛋白表達與胃癌相關病理學參數的關聯性①

程蘭芳

(鄭州市金水區總醫院病理科,河南 鄭州 450000)

胃癌為臨床常見的消化道惡性腫瘤，目前臨床主要采用胃鏡、病理檢查等診斷。腫瘤干細胞(CSCs)為腫瘤細胞內特殊細胞亞群，數量極少，能產生不同表型的腫瘤細胞，維持腫瘤細胞的惡性增殖。叉頭框轉錄因子D3(FOXD3)蛋白是一種干細胞關鍵轉錄因子，可維持胚胎發育，同時有助于抑制血管內皮生長因子(VEGF)表達，阻斷血管生成，干擾病灶生長[1,2]。本研究以我院胃癌患者109例為研究對象，旨在分析FOXD3蛋白表達與胃癌患者相關病理學參數的關系。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2018-03～2019-11我院胃癌患者109例，術前均未行任何放、化療，術后均行病理檢查。排除HE染色制作時掉片、滑片情況病例。

1.2 方法

手術取胃癌組織及癌旁正常組織，采用免疫組化法按SP試劑盒(購自北京博奧森公司)說明書進行，固定，脫水，包埋，3μm連續切片，脫蠟至水化，抗原微波修復，辣根過氧化物酶標記，二抗孵育，DAB鏡下觀察顯色，以PBS代替一抗作為陰性對照，用已知陽性組織切片作為陽性對照。每張切片隨機選5個高倍視野(×200)，半定量積分法判斷陽性結果，陽性強度：3分：棕褐色；2分：棕黃色；1分：淺黃色；0分：基本不著色；陽性面積：4分：視野陽性細胞數≥75%；3分：50%～74%；2分：25%～49%；1分：6%～24%；0分：≤5%。兩項積分乘積≤2 分為陰性(-)，3～4分為弱陽性(+)，5～8分為中度陽性(++)，9～12分為強陽性(+++)，強陽性、中度陽性、弱陽性均判斷為陽性表達。

1.3 觀察指標

(1)對比胃癌組織及癌旁組織FOXD3蛋白陽性率。(2)單因素分析不同病理參數(性別、年齡、腫瘤直徑、分化程度、臨床分期、浸潤深度、是否有淋巴結轉移)FOXD3蛋白陽性表達情況。(3)分析FOXD3蛋白陽性率與胃癌相關病理學參數關聯性。

1.4 統計學方法

采用SPSS22.0統計分析軟件，計數資料以n(%)表示，兩組間比較采用χ2檢驗；Logistic回歸分析模型分析FOXD3蛋白陽性率與胃癌相關病理學參數關聯性。均采用雙側檢驗，檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 FOXD3蛋白陽性率

胃癌組織FOXD3蛋白陽性率78.90%(86/109)高于癌旁組織28.44%(31/109，χ2=55.805，P<0.001)。

2.2 單因素分析

不同年齡、性別、腫瘤直徑FOXD3蛋白陽性率對比，差異無統計學意義(P>0.05)；低分化程度、浸潤程度T3～T4、淋巴結轉移患者FOXD3蛋白陽性率高于中高分化程度者、浸潤程度T1～T2、無淋巴結轉移者，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 FOXD3陽性率與病理參數的關系[n(%)]

2.3 Logistic回歸分析模型分析FOXD3蛋白陽性率與胃癌相關病理學參數關聯性

以FOXD3蛋白陽性率為因變量，納入單因素分析中差異有統計學意義的參數，結果顯示，中、低分化程度FOXD3蛋白陽性率是高分化的5.143倍；浸潤程度為T3～T4是T1～T2的2.909倍；有淋巴結轉移是無淋巴結轉移的1.966倍，分化程度、浸潤程度、淋巴結轉移與FOXD3蛋白陽性率顯著相關(P<0.05)，見表2。

表2 Logistic回歸分析模型分析

3 討論

胃癌發生發展是多階段、多基因參與的復雜過程。其中FOXD3蛋白可抑制胚胎干細胞中起分化作用的基因轉錄，調節胚胎干細胞增殖、分化。近年來，其與胃癌的關系研究備受關注。劉坤龍等[3]研究指出，胃癌組織內FOXD3蛋白陽性表達率高達72.50%。本研究對比胃癌患者癌組織及癌旁正常組織FOXD3蛋白水平，發現胃癌組織FOXD3蛋白陽性率78.90%高于癌旁組織28.44%(P<0.05)，與上述研究結果相近，可見FOXD3蛋白在胃癌患者中呈異常高表達。

FOXD3蛋白表達受絲氨酸-蘇氨酸激酶(B-RAF)抑制，可下調RhoA-ROCK信號，抑制黑色素瘤細胞形成、遷移、侵襲，進而影響腫瘤的形成[4]。本研究中低分化程度胃癌組織FOXD3蛋白陽性率高于中高分化程度者(P<0.05)，主要原因在于FOXD3蛋白為轉錄抑制因子，其高表達會抑制細胞生長，促使基因水平向惡性轉化，分化程度降低。胃癌組織中FOXD3蛋白可能通過負調控B-RAF信號通路抑制胃癌浸潤及淋巴結轉移。本研究還發現，浸潤程度T3～T4、淋巴結轉移患者FOXD3陽性率高于浸潤程度T1～T2、無淋巴結轉移者(P<0.05)。腫瘤細胞生長過程中，其基因水平調控失常，在惡性轉化過程中浸潤程度增高，而干細胞因子獲得淋巴細胞樣“偽裝”，逃避人體免疫系統識別，殺傷，侵襲淋巴結，因此，FOXD3蛋白表達隨著浸潤深度增加或轉移陽性表達率增加[5]。進一步Logistic回歸分析模型分析發現，分化程度、浸潤程度、淋巴結轉移與FOXD3蛋白陽性率顯著相關(P<0.05)，通過檢測FOXD3蛋白陽性率可為臨床評價胃癌病理學特征提供參考。

綜上可知，胃癌患者FOXD3呈異常高表達，且其表達與分化程度、浸潤程度、淋巴結轉移密切相關，臨床可據此判斷患者病情程度，為制定針對性治療措施提供參考依據。