不同類型急性白血病外周血T淋巴細胞亞群、B淋巴細胞和NK細胞等在不同時期的變化分析

董奎良，姚洋，劉嬌媛

（大石橋市中心醫院檢驗科，遼寧 大石橋 115100）

急性白血病是造血干細胞的惡性克隆性疾病，疾病的發生受機體免疫功能狀態的影響,會導致患者出現貧血、出血、感染癥狀，甚至會危及患者生命[1]。有資料報道稱，免疫功能水平會對急性白血病的治療與轉歸產生明顯影響[2]。為分析機體免疫功能變化對于急性白血病的意義，本研究選取38 例急性淋巴細胞白血病患者，45 例急性髓系白血病患者與45 名健康者為研究對象，旨在探討不同類型急性白血病外周血T、B淋巴細胞與NK細胞的變化規律，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年3月至2019年6月本院收治的38 例急性淋巴細胞白血病患者（ALL 組）及45 例急性髓系白血病患者（AML組），并取同時期在本院接受體檢的健康者45名（對照組）為研究對象。ALL組男22例，女16例，年齡22～68歲，平均（41.9±5.6）歲；包括T型4例，B型34例。AML組男27 例，女18 例；年齡20～71 歲，平均（42.3±5.8）歲。對照組男25例，女20例；年齡18～65歲，平均（41.2±5.4）歲。3 組臨床資料比較差異無統計學意義，具有可比性，本研究獲得醫院倫理委員會審批通過。

納入標準：急性白血病經臨床綜合檢查確診；對本研究內容知情同意。排除標準：機體存在其他惡性腫瘤疾病者；合并其他免疫相關疾病者。

1.2 方法 采集3組晨起空腹靜脈血2～3 mL，應用EDTA管進行抗凝，取2支流失試管（12 mm×75 mm），在管體表面做好標記，其中一支為對照管，另一支為測定管，采用同型對照抗體20 μL 加入到對照管內，采用6 色標記CD3FITC/CD16+56PE/CD4PE-cy7/CD8APCcy7/CD45PercP/CD19APC 各20 μL加入測定管內，向各管內加入100 μL外周血，充分混合均勻后，放置于遮光室內常溫孵育15～20 min，應用自動裂解儀對細胞進行裂解、固定、洗滌，然后采用美國Olympus公司生產的HKD560 型上流失細胞儀開展檢測；同時，按照《NCCN 臨床實踐指南》的推薦方案對急性白血病患者開展治療。

1.3 統計學方法 采用SPSS 17.0統計軟件進行數據分析，計量資料以“”表示，比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3 組淋巴細胞亞群水平比較 ALL 組與AML 組治療前CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、NK細胞陽性率與CD4+/CD8+均低于對照組（P＜0.05）；治療前，AML組CD3-CD19+細胞陽性率低于對照組（P＜0.05），CD3-CD19+細胞陽性率高于對照組（P＜0.05），見表1。

表1 3組淋巴細胞亞群水平比較（，%）Table 1 Comparison of lymphocyte subsets in three groups(,%)

表1 3組淋巴細胞亞群水平比較（，%）Table 1 Comparison of lymphocyte subsets in three groups(,%)

注：與對照組比較，aP＜0.05

組別ALL組（n=38）AML組（n=45）對照組（n=45）CD3+40.91±10.68a 39.82±10.23a 68.73±2.35 CD3+CD8+19.83±5.11a 19.22±4.13a 28.63±2.15 CD3+CD4+21.38±7.15a 20.13±8.22a 37.29±1.76 CD4+/CD8+0.89±0.32a 0.99±0.35a 1.60±0.25 CD3-CD19+35.71±8.4a0 3.48±1.55a 10.85±2.36 NK 7.66±4.28a 6.50±3.18a 15.61±2.48 Treg 18.84±5.50a 17.68±2.89a 7.25±2.21

2.2 急性白血病患者治療前后淋巴細胞亞群水平比較 治療后，ALL組與AML組CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、NK細胞陽性率與CD4+/CD8+值高于治療前（P＜0.05）；治療后，AML 的CD3-CD19+細胞陽性率高于治療前（P＜0.05），ALL 組CD3-CD19+細胞陽性率低于治療前（P＜0.05），見表2。

表2 急性白血病患者治療前后淋巴細胞亞群水平比較（，%）Table 2 Comparison of lymphocyte subsets in patients with acute leukemia before and after treatment(,%)

表2 急性白血病患者治療前后淋巴細胞亞群水平比較（，%）Table 2 Comparison of lymphocyte subsets in patients with acute leukemia before and after treatment(,%)

注：與治療前比較，aP＜0.05

組別ALL組（n=38）AML組（n=45）NK 7.66±4.28 12.10±2.38a 6.50±3.18 14.35±3.40a時間治療前治療后治療前治療后CD3+40.91±10.68 77.60±8.50a 39.82±10.23 58.61±4.58a CD3+CD8+19.83±5.11 22.50±2.36a 19.22±4.13 22.61±2.85a CD3+CD4+21.38±7.15 30.48±2.40a 20.13±8.22 33.05±2.42a CD4+/CD8+0.89±0.32 1.50±0.22a 0.99±0.35 1.30±0.21a CD3-CD19+35.71±8.40 4.51±1.88a 3.48±1.55 7.81±2.55a Treg 18.84±5.50 10.25±1.23a 17.68±2.89 10.33±2.32a

3 討論

急性白血病屬于惡性血液疾病，由于機體造血功能受到抑制，外周血淋巴細胞及功能會出現異常，并影響機體免疫功能。根據表面抗原表達所具備的差異，可將外周血淋巴細胞分為B 淋巴細胞、T 淋巴細胞與NK 細胞等類型，其所具備的免疫效應存在差異，可使機體免疫內環境維持在穩定狀態[3]。外周T淋巴細胞亞群可反映細胞免疫功能狀態，但由于僅成熟淋巴細胞可對CD4+和CD8+進行表達，因此，CD4+/CD8+比值可直接反映機體免疫功能狀態[4]。有資料報道稱，當惡性血液病患者具備輸血指征時，為其采用紅細胞輸注后，患者機體T 淋巴細胞亞群水平會出血明顯改變[5]。CD3-CD16+CD56+的NK細胞可直接殺滅病毒感染細胞及腫瘤細胞，發揮抗腫瘤作用，并可分泌細胞因子，從而使多種免疫細胞得到活化，并提升機體免疫功能[6]。本研究結果顯示，ALL組與AML 組治療前CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、NK 細胞陽性率與CD4+/CD8+值均低于對照組，提示急性白血病的發生會使機體免疫功能明顯降低，抑制機體抗腫瘤效應，使其保持在免疫抑制的狀態[7]。治療后，急性白血病患者CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、NK 細胞陽性率與CD4+/CD8+值均高于治療前，提示經過治療后，可使急性白血病患者的機體細胞免疫功能增強。

CD19屬于B細胞表面膜抗原，可對體液免疫應答進行介導，在體液免疫應答中發揮重要作用，并可分泌多種細胞因子，從而在免疫調節中發揮作用[8]。本研究結果顯示，AML組患者體液免疫功能顯著降低，在實施治療后得到改善，而ALL組患者的CD3-CD19+升高明顯，分析其原因，可能與研究對象中B細胞性病變占比較高有關，在實施治療后該指標顯著降低，是否受到幼稚細胞減少的影響仍需開展進一步研究[9-10]。

綜上所述，外周血T 淋巴細胞亞群、B 淋巴細胞和NK 細胞可有效評估不同類型急性白血病的病情嚴重度、治療效果與預后情況。