宮頸癌組織USP22、Glut1蛋白表達(dá)及其相互關(guān)系

朱太彩 張水榮 王 丹

在婦科惡性腫瘤患者中，宮頸癌的發(fā)病率較高，在合并有HPV16或者其他高危型HPV病毒感染的人群中，遠(yuǎn)期宮頸高級(jí)別病變或者宮頸癌的發(fā)病率顯著上升[1-2]。近年來(lái)，腫瘤調(diào)控蛋白的改變?cè)趯m頸癌的發(fā)病機(jī)理研究中越來(lái)越受到關(guān)注。腫瘤調(diào)控蛋白的改變，能夠在癌細(xì)胞的生物學(xué)特征的調(diào)控、癌細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路的激活等方面發(fā)揮作用。泛素特異性蛋白22(USP22)的表達(dá)，能夠通過(guò)影響到癌細(xì)胞腫瘤蛋白的泛素化修飾過(guò)程，惡化腫瘤細(xì)胞生物學(xué)特征，最終加劇癌細(xì)胞的持續(xù)異常分裂過(guò)程[3]。葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(Glut1)是葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白，能夠通過(guò)提高癌細(xì)胞膜上葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的激活程度，促進(jìn)癌細(xì)胞信號(hào)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)，提高腫瘤細(xì)胞的核DNA分裂速度[4]。本次研究收集我院病理中心收集的90例宮頸癌組織標(biāo)本、90例宮頸上皮瘤變組織標(biāo)本，探討了USP22、Glut1蛋白的表達(dá)情況。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收集我院2016年5月至2018年1月收集的90例宮頸癌組織標(biāo)本、90例宮頸上皮瘤變組織標(biāo)本。入選標(biāo)準(zhǔn)：①宮頸癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考中華醫(yī)學(xué)會(huì)婦產(chǎn)科學(xué)分會(huì)制定的標(biāo)準(zhǔn)；②所有標(biāo)本均為手術(shù)后獲取；③手術(shù)前患者未接受放化療、免疫學(xué)治療；④本研究符合《赫爾透辛基宣言》相關(guān)醫(yī)學(xué)倫理規(guī)定，經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，對(duì)研究對(duì)象的各項(xiàng)資料嚴(yán)格保密。排除標(biāo)準(zhǔn)：①轉(zhuǎn)移性宮頸、卵巢或其他部位惡性腫瘤患者；②未經(jīng)病理學(xué)檢查證實(shí)；③既往具有放化療病史；④基礎(chǔ)資料不完整，難以進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。宮頸癌患者年齡38～68歲，平均(55.2±9.8)歲；FIGO分期：Ⅰ期22例、Ⅱ期39例、Ⅲ期25例、Ⅳ期4例；腫瘤組織學(xué)分級(jí)：G1級(jí)22例、G2級(jí)36例、G3級(jí)32例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移39例；病理學(xué)類型：鱗癌75例、腺癌15例；病灶最大徑≥4 cm 40例、<4 cm 50例。CIN患者年齡30～65歲，平均(53.9±10.4)歲，CINⅠ級(jí)20例、CINⅡ級(jí)47例、CINⅢ級(jí)23例。2組患者的年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 免疫組化染色判定

Glut1蛋白陽(yáng)性染色表達(dá)于細(xì)胞核中、USP22蛋白的陽(yáng)性著色表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中。①根據(jù)染色的程度分為0～3分：0分為未染色；1分為僅僅淡黃色染色；2分為棕黃色染色；3分為染色呈褐色、黑色；②根據(jù)染色的細(xì)胞占比結(jié)果：1分為占比≤10%；2分為占比范圍>10%～50%；3分為占比范圍>50%～75%；4分為占比>75%；其中染色程度×陽(yáng)性細(xì)胞分值得到的積分<3則為陰性、≥3則為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 宮頸癌組織和CIN組織中的USP22、Glut1蛋白比較

宮頸癌組織中的USP22、Glut1蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為62.22%、65.56%，CIN組織中的USP22、Glut1蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為24.44%、30.00%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 宮頸癌組織和CIN組織中的USP22、Glut1蛋白比較(例，%)

2.2 宮頸癌組織中的USP22、Glut1蛋白表達(dá)與病理學(xué)特征的關(guān)系

宮頸癌組織中的Glut1蛋白陽(yáng)性表達(dá)率在不同的TNM分期、是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的組織中存在顯著差異(P<0.05)，宮頸癌組織中的USP22蛋白陽(yáng)性表達(dá)率在不同的TNM分期、不同組織學(xué)分級(jí)、是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的組織中存在顯著差異(P<0.05)，見表2。

2.3 宮頸癌組織中的USP22、Glut1蛋白表達(dá)相關(guān)性 經(jīng)Spearman秩相關(guān)分析，宮頸癌組織中的Glut1蛋白表達(dá)與USP22蛋白表達(dá)呈顯著的正相關(guān)關(guān)系(γ=0.495，P<0.05)，見表3。

3 討論

宮頸惡性腫瘤的發(fā)病居于婦科惡性腫瘤的前三位，近年來(lái)雖然宮頸病變的早期篩查，能夠在宮頸癌的預(yù)防和早期檢出方面發(fā)揮顯著作用[5-6]，但部分經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá)地區(qū)，宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)仍然呈現(xiàn)出了一定的上升趨勢(shì)[7]。有研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌患者的遠(yuǎn)期無(wú)瘤生存時(shí)間或者無(wú)進(jìn)展生存期均無(wú)明顯的改善，中晚期宮頸癌患者的5年內(nèi)病死率較高。通過(guò)對(duì)宮頸癌臨床病理特征的評(píng)估，可以為臨床上宮頸癌的診療提供可靠的參考。腫瘤蛋白的檢測(cè)，具有較為便捷的特征，其在疾病的早期診斷或者預(yù)后參考方面均具有一定的價(jià)值。雖然宮頸鱗狀上皮細(xì)胞抗原能夠在宮頸癌的診療過(guò)程中發(fā)揮一定的作用，但是依靠宮頸鱗狀上皮細(xì)胞抗原來(lái)評(píng)估宮頸癌臨床病理特征的一致性率較低，其與宮頸癌臨床分期進(jìn)展或者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的符合程度較低[8]。

USP22是泛素化修飾蛋白，其能夠在癌細(xì)胞內(nèi)腫瘤調(diào)控蛋白的激活及蛋白結(jié)構(gòu)的修飾方面發(fā)揮作用，從而影響到宮頸上皮細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄和異常增殖過(guò)程。相關(guān)的分子生物學(xué)方面研究表明，USP22能夠影響到癌細(xì)胞內(nèi)P16/AKT或者E6/E7蛋白的激活，最終影響到高危型HPV病毒顆粒的整合進(jìn)程[9]。Glut1蛋白能夠在癌細(xì)胞ATP能量利用代謝方面發(fā)揮作用，干預(yù)到腫瘤細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)癌基因的激活程度。Glut1蛋白對(duì)于葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體上ATP結(jié)合酶的影響，能夠提高癌細(xì)胞內(nèi)紡錘體異常分裂的風(fēng)險(xiǎn)，加速癌細(xì)胞非對(duì)稱分裂。雖然有部分研究者探討了Glut1蛋白在宮頸癌患者中的表達(dá)情況，但多數(shù)研究者局限于Glut1蛋白的流行病學(xué)分析[10]，缺乏對(duì)相關(guān)指標(biāo)與宮頸癌臨床病理特征的探討。

表2 宮頸癌組織中的Glut1、USP22蛋白表達(dá)與病理學(xué)特征的關(guān)系(例，%)

表3 相關(guān)性分析結(jié)果/例

本次研究的主要方式在于通過(guò)免疫組化探討了USP22、Glut1蛋白的表達(dá)情況，研究發(fā)現(xiàn)在宮頸癌病灶組織中，USP22、Glut1蛋白的表達(dá)陽(yáng)性率水平明顯高于宮頸上皮內(nèi)瘤變的患者，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異較為顯著，表明USP22、Glut1在宮頸癌的發(fā)生過(guò)程中存在明顯的高表達(dá)態(tài)勢(shì)。USP22、Glut1的高表達(dá)，能夠在影響宮頸癌細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征、生物學(xué)特征等方面發(fā)揮相應(yīng)的作用，從而提高了腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)力與粘附力。還有部分研究者也嘗試去探討Glut1蛋白在宮頸癌患者中的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)在宮頸癌患者中，Glut1蛋白的表達(dá)陽(yáng)性率水平可平均上升30%～45%，另外Glut1蛋白的表達(dá)還具有顯著的病情依賴性，在宮頸癌惡病質(zhì)較為明顯或者短期內(nèi)病死風(fēng)險(xiǎn)較高的患者中，Glut1蛋白的表達(dá)可持續(xù)上升[11]。本次研究還重點(diǎn)探討了USP22、Glut1蛋白的表達(dá)與宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)USP22蛋白在宮頸癌臨床分期較晚的患者、發(fā)生了顯著盆腔內(nèi)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或者組織學(xué)分級(jí)不佳的患者中，其表達(dá)陽(yáng)性率較高，提示了USP22蛋白的表達(dá)與宮頸癌的病情關(guān)系。USP22不僅能夠通過(guò)泛素化影響到腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)和粘附過(guò)程，同時(shí)可以提高腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)和突破宮頸基膜組織的能力，促進(jìn)癌細(xì)胞浸潤(rùn)宮旁組織，最終促進(jìn)臨床分期的進(jìn)展；USP22對(duì)于癌細(xì)胞粘附能力的影響，能夠提高癌細(xì)胞粘附盆腔淋巴結(jié)的風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)而提高淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的可能[12-13]；在不同的TNM分期、是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中，Glut1蛋白的表達(dá)同樣具有顯著的差異，提示Glut1蛋白的表達(dá)也能夠影響到宮頸癌的臨床病理特征的進(jìn)展。Glut1蛋白對(duì)于宮頸癌的病情影響，主要在于其能夠影響到葡萄糖載體運(yùn)輸、能量代謝利用及癌細(xì)胞周期調(diào)控等過(guò)程[14-15]。相關(guān)關(guān)系分析可見，在宮頸癌組織中，USP22、Glut1蛋白的表達(dá)具有顯著的正相關(guān)關(guān)系，表明USP22、Glut1在影響宮頸癌發(fā)生過(guò)程中可能具有一定的協(xié)調(diào)刺激作用。

在宮頸癌組織中，USP22、Glut1蛋白的表達(dá)明顯上升。USP22、Glut1蛋白的表達(dá)與宮頸癌患者的臨床分期或者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等特征有關(guān)。臨床上必要時(shí)可以通過(guò)檢測(cè)USP22、Glut1蛋白，協(xié)助整體評(píng)估宮頸癌的病情。