MTHFR C667T基因多態性對漢族肥胖患者高尿酸血癥發生風險的影響*

夏麗芳，何 倩，王 鑫，宋茜茜，張月娥，李志紅△

(1.河北省保定市第一中心醫院內分泌二科 017000;2.河北省蠡縣醫院內三科 071400;3.河北省保定市第一中心醫院內分泌科 017000;4.河北省保定市第一中心醫院康復二科 017000)

高尿酸血癥(hyperuricemina，HUA)是嘌呤代謝障礙引起的代謝性疾病。調查顯示，我國不同地區HUA患病率為5.0%～23.5%，預計在未來10～20年，HUA將成為僅次于糖尿病的第二大內分泌代謝性疾病，因此對HUA進行深入研究意義重大[1]。亞甲基四氫葉酸還原酶(methylenetetrahydrofolatereductase，MTHFR)定位于人類第1染色體短臂，是葉酸代謝中一個重要的酶，MTHFR C667T基因位點突變可降低葉酸代謝關鍵酶的活性[2]。趙欣等[3]報道，葉酸可通過上調過氧化物酶體增殖物激活受體γ的表達，促進人脂肪間充質干細胞成脂分化，影響肥胖的發生。且一項大型研究[4]發現，肥胖患者發生HUA的概率較高。故推測MTHFR C667T基因多態性可能與肥胖患者發生HUA有關，但目前關于三者間關系的報道較少。本研究選取136例HUA患者，研究MTHFR C667T基因多態性對肥胖患者HUA發生風險的影響，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2019年8月保定市第一中心醫院收治的136例HUA患者(HUA組)及體檢中心150例健康人群(對照組)作為研究對象。HUA組均符合HUA的診斷標準[5]：連續2次空腹血尿酸水平檢測，男性大于420 μmol/L，女性大于360 μmol/L，且均為漢族人群，相互間不存在血緣關系。排除合并造血系統疾病者，由藥物、腫瘤、銀屑病、腎臟疾病、肝臟疾病及飲食等因素導致的繼發性HUA患者，妊娠期患者，合并精神疾病者，近期曾服用降尿酸藥物者。本研究獲得保定市第一中心醫院倫理委員會審核批準，所有患者對本研究均知情同意，并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1資料收集

收集研究對象性別、年齡、體質量指數(BMI)、空腹血糖(GLU)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)等資料。

1.2.2MTHFR C667T基因型檢測

使用PCR-芯片雜交法MTHFRC667T基因檢測試劑盒，按杭州開泰生物技術有限公司血液基因組DNA提取試劑盒說明書，提取和純化DNA。PCR擴增，PCR反應條件：94 ℃ 5 min，94 ℃ 25 s，56 ℃ 25 s，72 ℃ 25 s，共35個循環，最后72 ℃后延伸5 min，雜交顯色。反應結束后取出芯片，放入生物芯片識讀儀(上海百傲科技有限公司，BE-3.0)中，用Baio Array Doctor V2.0軟件進行圖像掃描與數據分析，輸出MTHFR 3種基因型：667CC、667CT、667TT。

1.3 觀察指標

(1)比較兩組年齡、性別、舒張壓、飲酒史、吸煙史等一般資料；(2)比較兩組MTHFR C667T基因型頻率及等位基因頻率分布；(3)分析影響HUA發生的因素；(4)比較兩組不同BMI患者分布；(5)分析MTHFR C667T基因型與肥胖對HUA發生風險的交互作用。

1.4 統計學處理

2 結 果

2.1 兩組一般資料比較

兩組年齡、性別、舒張壓、飲酒史、吸煙史、GLU、TC、TG、BUN、Cr、合并糖尿病、心臟病、高血壓比較，差異無統計學意義(P>0.05)；HUA組BMI、收縮壓、高脂血癥患者占比較對照組高(P<0.05),見表1。

表1兩組一般資料比較

續表1兩組一般資料比較

2.2 兩組MTHFR C667T基因型頻率及等位基因頻率分布比較

對照組MTHFR C667T位點基因型分布符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律檢驗(P=0.80)。HUA組TT基因型頻率、T等位基因頻率均較對照組高(P<0.05)，見表2。

表2 比較兩組MTHFR C667T基因型頻率 及等位基因頻率分布[n(%)]

2.3 HUA發生的影響因素分析

以是否發生HUA為因變量，以BMI、收縮壓、高脂血癥等為自變量進行多因素分析發現，高BMI、高收縮壓、高脂血癥、基因型TT、等位基因T是HUA發生的危險因素(P<0.05),見表3。

表3 HUA發生影響因素的logistic多元回歸分析

2.4 兩組不同BMI患者分布比較

根據《中國成人超重和肥胖癥預防控制指南》[7]中BMI≥28 kg/m2為肥胖，HUA組BMI≥28 kg/m2患者占比高于對照組(P<0.05),見表4。

表4 比較兩組不同體質量指數患者分布[n(%)]

2.5 MTHFR C667T基因型與肥胖對HUA發生風險的交互作用

BMI≥28 kg/m2時，TT型基因在組間分布比較，差異具有統計學意義(P<0.05)；交互作用分析顯示，S=4.464，RERI=3.040，AP=0.406，見表5。

表5 MTHFR C667T基因型與肥胖對HUA發生 風險的交互作用

3 討 論

隨著我國人民生活水平的不斷提高，HUA發病率逐漸遞增，并表現出年輕化趨勢。流行病學調查顯示，90%的原發性高血壓患者合并HUA，血尿酸水平每增高59.5 μmol/L，高血壓發病相對危險增高25%，且HUA亦可增加腦卒中、冠心病等發病與死亡的風險[8]。但HUA發病機制尚未完全明了，陳曉波等[9]、林曦陽等[10]研究指出，HUA與高血壓、高血脂有關。本研究結果顯示，除高收縮壓、高脂血癥外，高BMI、TT基因型、T等位基因亦是HUA發生的危險因素，提示肥胖及MTHFR C667T TT基因型、T等位基因可影響HUA的發生。

3.1 肥胖與HUA的關系

超重、肥胖是當今社會常見的一種現象，可引起代謝綜合征。胡夢妍等[11]報道，與健康人群相比，肥胖患者HUA發生率較高。本研究結果顯示，HUA組BMI較對照組高(P<0.05)，提示肥胖可能與HUA的發生有關。朱冰坡等[12]研究共納入1 363例老年體檢人群，進行單因素與二元logistic回歸分析發現在校正年齡后，高脂血癥、肥胖是HUA的獨立危險因素，與本研究結論一致。尿酸在細胞外的水平取決于尿酸生成的速度和經腎臟排出之間的平衡關系，排泄減少和(或)生成增加，或生成大于排泄，均可出現HUA。從這個角度講，肥胖導致HUA的機制可能為：(1)引起胰島素抵抗，增加腎小管近曲小管對尿酸/Na+的重吸收；(2)可通過激活腎素-血管緊張素系統，導致腎髓質缺血，乳酸增加，競爭性抑制尿酸的排泄；(3)降低近端小管泌氨功能，造成尿液酸化，影響尿酸的排泄；(4)可促進黃嘌呤氧化酶的生成，增加尿酸合成量[13-14]。

3.2 MTHFR C667T基因多態性與HUA的關系

MTHFR是一種重要的一碳單位代謝酶，至今已發現近65個多態性位點，其中C667T是最為常見的突變位點之一[15-16]。KIMI 等[17]研究發現，血清尿酸水平較高者TT基因型檢出率較高，CC、TT、CT基因型患者血清尿酸水平具有明顯差異，MTHFR C667T基因多態性可能與HUA有關。日本的一項研究納入了793例49歲以上人群，發現血尿酸水平大于或等于7 mg/dL者TT基因型檢出率高于尿酸水平低于7 mg/dL者，并得出HUA與MTHFR 677T等位基因攜帶者之間存在顯著相關性的結論[18]。一項Meta分析[19]共納入1 470例患者，進行異質性測試后發現，MTHFR C677T多態性是HUA的獨立危險因素，支持本研究結論。MTHFR基因第4外顯子667位點上存在C等位基因和T等位基因多態現象，分為野生型(CC型)、雜合型突變(CT型)和純合型突變(TT型)3種，C與T對應氨基酸殘基分別為丙氨酸和纈氨酸，纈氨酸取代丙氨酸后使MTHFR穩定性下降，直接影響MTHFR的活性和耐熱性，其中CT型、TT型人群的酶活性分別降低為CC型的65%和30%，導致由S-腺苷-同型半胱氨酸產生的腺苷優先滲入尿酸前體池，使同型半胱氨酸和尿酸的合成相關聯，增加了尿酸的來源，且TT型個體常出現全身血管病變、腎血管動脈粥樣硬化等并發癥，降低了腎臟對尿酸的清除能力，從而誘發HUA[20-21]。

3.3 MTHFR C667T基因多態性對肥胖患者高尿酸血癥發生風險的影響

MAHESH 等[22]研究顯示，MTHFR C667T基因多態性與較低的高密度脂蛋白(HDL)水平有關，而HDL主要作用是促進體內膽固醇逆化轉運，防止外周組織中過多脂質堆積。可見MTHFR C667T基因多態性與肥胖有關，結合上述分析，推測MTHFR C667T基因多態性與肥胖對HUA的發生可能存在交互作用。本研究通過分層分析發現，BMI≥28 kg/m2時，TT型基因在組間分布比較，差異具有統計學意義(P<0.05)，交互作用分析顯示，RERI=3.040，AP=0.406，S=4.464，直接證實兩種因素在HUA的發生中存在正向交互作用，且在HUA發病總效應中占比為40.60%。但本研究受客觀情況限制，納入樣本量較小，可能造成數據的偏倚，且由于本地區漢族人群較多，故納入漢族人群作為研究對象，而研究結果是否適用于其他民族的人群，仍需后續研究進一步完善、驗證。

綜上所述，MTHFR C667T基因TT型純合子突變攜帶增加HUA的風險，MTHFR C667T基因多態性、肥胖在HUA的發生中存在正向交互作用。