272例新型冠狀病毒肺炎患者多項炎性免疫指標分析

余 磊，胡友濤，毛 仕，孫 偉，魯曉玲，孫建斌△

湖北省武漢市第三醫院：1.檢驗科；2.泌尿外科；3.中醫科，湖北武漢 430060

新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)的典型癥狀包括發熱、干咳、乏力、咳痰、氣短、咽痛、頭痛、肌痛或關節痛、寒戰等[1]，也有部分患者為無癥狀病毒攜帶者[2]。由于其傳染性強，人群普遍易感，致死率高，且前期缺乏確認有效的抗病毒藥物及疫苗，疫情迅速蔓延，嚴重威脅著人類的身心健康，給世界公共衛生系統都帶來了極大的挑戰[3]。加強對該病的早診和早治具有重要的意義，實驗室檢查指標是診治該病必不可少的依據。本文回顧性分析2020年1月27日至2月29日武漢市第三醫院收治的272例COVID-19確診患者多項炎性免疫指標，為臨床病情監測和療效判斷提供理論依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年1月27日至2月29日武漢市第三醫院收治的272例COVID-19確診患者為研究對象(病例組)，收集其各項實驗室檢測指標，進行回顧性分析。其中男137例，年齡24～98歲，中位年齡61歲；女135例，年齡25～89歲，中位年齡60歲。272例患者分為普通型肺炎(普通型組)、重型肺炎(重型組)和危重型肺炎(危重型組)3組。普通型組179例，其中男93例、女86例；重型組77例，男33例、女44例；危重型組16例，男11例、女5例。隨機抽取在發熱門診就診并且已排除感染的患者作為對照組，共54例，其中男27例，年齡24～77歲；女27例，年齡26～73歲。本研究通過武漢市第三醫院倫理委員會審批(武三醫倫KY2020-046)。

1.2納入標準和分型 所選入COVID-19確診病例除流行病學史和臨床表現外，需具備以下病原學證據之一：(1)實時熒光定量聚合酶鏈式反應(qRT-PCR)檢測新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)核酸陽性；(2)病毒基因測序，與已知的SARS-CoV-2高度同源[3]。按診療指南進行臨床分型，根據入院之日臨床癥狀、影像學特征以及實驗室檢查結果，分為普通型、重型和危重型[3]。對照組病例為胸部CT檢查結果正常和SARS-CoV-2核酸檢查結果為陰性者。

1.3方法 抽取靜脈全血2 mL，EDTA-K2抗凝，進行全血細胞分類計數、C反應蛋白(CRP)和血清淀粉樣蛋白A(SAA)的檢測。全血細胞分類計數和CRP使用邁瑞BC5390CRP進行檢測(深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司)，前者采用阻抗結合激光法進行分析，后者使用配套的測定試劑盒，方法為乳膠免疫比濁法；SAA由南京美寧康誠生物科技有限公司提供的量子點熒光免疫分析儀及配套的試劑盒進行檢測，方法為量子點熒光免疫層析法。抽取靜脈全血3 mL，及時分離血清，進行降鈣素原(PCT)、補體C3等檢測。PCT采用全自動熒光免疫分析儀VIDAS檢測(法國生物梅里埃公司)，方法為酶聯免疫熒光法；補體C3使用西門子ADVIA2400進行檢測，試劑由寧波普瑞柏生物技術股份有限公司提供。所有項目嚴格按照操作規程及儀器試劑說明書操作，且每日進行室內質控檢測以確保檢測質量。

1.4統計學處理 采用SPSS26.0軟件進行統計學分析，不符合正態分布的計量資料采用M(P25,P75)表示，組間比較采用Kruskal-Wallis秩和檢驗；計數資料采用百分數表示，組間比較采用χ2檢驗；采用受試者工作特征曲線(ROC曲線)對白細胞(WBC)計數、淋巴細胞(LYM)計數、CRP、SAA、PCT、補體C3等指標的診斷價值進行分析，ROC曲線下面積(AUC)越接近1則提示準確性越高。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1各組患者WBC計數、LYM計數的比較 與對照組相比，病例組WBC計數、LYM計數均顯著降低(Z=-5.488、-9.194，P<0.001)。與普通型組相比，重型組和危重型組WBC計數均有所增加，但差異無統計學意義(P>0.05)。而LYM計數隨著病情的加重逐漸降低，危重型組明顯低于重型組(Z=2.816，P=0.015)；同時，重型組LYM計數明顯低于普通型組，危重型組LYM計數明顯低于普通型組，差異均有統計學意義(Z=3.040，P=0.007；Z=4.553，P<0.001)，見表1。

表1 各組患者WBC計數、LYM計數的比較[×109，M(P25,P75)]

2.2各組CRP、SAA、PCT及補體C3水平的比較 與對照組相比，病例組患者CRP、SAA和PCT水平均顯著增高(P<0.05)；同時，重型組CRP水平高于普通型組，危重型組CRP水平高于普通型組，危重型組CRP水平高于重型組(Z=-4.215，P<0.001；Z=-5.234，P<0.001；Z=-2.880，P=0.012)；重型組SAA水平高于普通型組，危重型組SAA水平高于普通型組，危重型組SAA水平高于重型組(Z=-6.525，P<0.001;Z=-6.247，P<0.001;Z=-2.696，P=0.021)；重型組PCT水平高于普通型組，危重型組PCT水平高于普通型組，危重型組PCT水平高于重型組(Z=-3.936，P<0.001;Z=-5.823，P<0.001;Z=-3.578，P<0.001)。對照組與病例組補體C3水平差異無統計學意義(Z=-0.629，P=0.529)。但COVID-19確診患者隨著病情的加重，補體C3水平逐漸降低，重型組補體C3水平低于普通型組(Z=5.009，P<0.001)，危重型組補體C3水平低于普通型組(Z=5.564，P<0.001)，危重型組補體C3水平低于重型組(Z=2.786，P=0.016)，見表2。

表2 各組CRP、SAA、PCT及補體C3水平的比較[M(P25,P75)]

2.3WBC計數、LYM計數、CRP、SAA、PCT及補體C3診斷COVID-19的價值 WBC計數、LYM計數、CRP、SAA、PCT及補體C3聯合檢測診斷COVID-19的AUC為0.984，靈敏度為90.0%，特異度為100.0%，高于各項單獨檢測，見表3。

表3 WBC計數、LYM計數、CRP、SAA、PCT和補體C3單獨和聯合檢測診斷COVID-19的ROC曲線分析

2.4WBC計數、LYM計數、CRP、SAA、PCT及補體C3單獨及聯合檢測鑒別COVID-19患者重型和危重型的價值 WBC計數、LYM計數、CRP、SAA、PCT及補體C3聯合檢測鑒別COVID-19患者重型和危重型的AUC為0.911，顯著高于各指標單獨檢測，見表4。

表4 WBC計數、LYM計數、CRP、SAA、PCT及補體C3單獨及聯合檢測鑒別COVID-19患者重型和危重型的ROC曲線分析

3 討 論

COVID-19是由感染SARS-CoV-2而產生的以呼吸系統感染為主要癥狀的傳染病。SARS-CoV-2傳播速度快，且在潛伏期具有傳染性[4-5]。有效明確的實驗室檢查數據是認識該病的重要方法。

本研究表明，與對照組相比，病例組患者WBC計數、LYM計數均顯著降低(P<0.05)。而COVID-19患者中，隨著病情的加重，LYM計數進行性降低，但是WBC計數變化并不明顯。外周血中WBC計數和LYM計數水平對于維持機體免疫系統功能和病毒的清除非常重要[6]。有關嚴重急性呼吸綜合征(SARS)的研究表明，患者體內LYM計數減少，且LYM計數與疾病嚴重程度呈正相關[7]。隨著病情的進展，SARS患者外周血LYM計數顯著減低，其原因可能與免疫介導的損傷、細胞凋亡或肺內淋巴細胞隔離有關[8]。根據SARS-CoV-2與SARS病毒的高度同源性[9]，推測SARS-CoV-2也是通過介導免疫損傷而致病。重型和危重型COVID-19患者WBC計數稍增加，可能與疾病后期繼發感染有關。

與對照組相比，病例組患者CRP、SAA和PCT水平均顯著增高，SAA較CRP升高更明顯，補體C3水平無明顯變化。隨著病情的加重，CRP、SAA和PCT水平逐漸增加；而補體C3水平逐漸降低。CRP和SAA均為急性時相蛋白，當機體受到病毒等刺激時，大量促炎因子，如白細胞介素-1、白細胞介素-6及腫瘤壞死因子等可刺激肝細胞生成CRP和SAA，并在短期內迅速升高[10]，二者對診斷重癥病毒性肺炎具有較好的靈敏度[11]。本研究提示CRP和SAA是診斷COVID-19并提示分型的重要參考指標。PCT是降鈣素的激素原，可由很多器官的不同類型細胞在受到促炎性反應刺激后分泌，特別是受到細菌引起的刺激后水平增加[12]。但在病毒感染時幾乎不升高或升高不明顯[13]。本研究結果表明，COVID-19患者體內PCT水平較對照組患者明顯增高，進一步提示COVID-19患者后期存在繼發性感染。且隨著病情的進展，PCT水平進行性增加，表明PCT可成為診斷COVID-19并提示分型的重要指標。方佳丹等[14]研究也證實動態監測CRP、SAA、PCT等血清學指標有利于COVID-19的診斷和鑒別診斷。補體C3是血清中水平最高的補體成分，主要由巨噬細胞和肝臟合成，在補體經典激活途徑和旁路激活途徑中均發揮重要作用[15]。沈培奇[16]發現，膿毒癥患者血清補體C3和C4水平與病情嚴重程度呈負相關，即隨病情的進展，補體C3和C4的水平進行性降低。本研究結果表明，血清補體C3水平隨病情加重進行性降低，再次提示COVID-19確診患者后期存在繼發性感染。因此，補體C3也可成為評估病情嚴重程度的重要指標。

本研究結果顯示，WBC計數、LYM計數、CRP、SAA、PCT診斷COVID-19的AUC分別為0.771、0.925、0.901、0.934、0.648，而補體C3的AUC僅0.540。6種指標聯合檢測診斷COVID-19的AUC為0.984，且靈敏度為90.0%，特異度為100.0%。在鑒別COVID-19重型和危重型患者時，LYM計數、CRP、SAA、PCT、補體C3單獨檢測診斷COVID-19的AUC分別為0.662、0.693、0.781、0.654、0.737，而WBC計數僅為0.560。6種指標聯合檢測的AUC為0.911，且靈敏度為86.0%，特異度為85.0%。

綜上所述，COVID-19患者體內WBC計數、LYM計數、CRP、SAA、PCT及補體C3等多項炎性免疫指標的聯合檢測，有助于疾病的臨床診斷、分型。