液相色譜法測(cè)定食品中的糖精鈉、安賽蜜、苯甲酸、山梨酸

□ 張作松 施震地 啟東市綜合檢驗(yàn)檢測(cè)中心

食品很容易因?yàn)闇貪穸取h(huán)境等出現(xiàn)變質(zhì)，給企業(yè)帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失，也會(huì)制約食品行業(yè)發(fā)展。防腐劑的添加很好地延長(zhǎng)了食品的保質(zhì)期，因此被廣泛添加到食品中。目前常添加的有苯甲酸及其鈉鹽、山梨酸及其鉀鹽、丙酸及其鹽、脫氫乙酸等。甜味劑能夠改善口感進(jìn)而增加食欲，常用的甜味劑有糖精鈉、安賽蜜、阿斯巴甜、紐甜與阿力甜等[1]。近些年的研究表明食品添加劑超量使用也會(huì)危害人體健康，食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)對(duì)防腐劑和甜味劑的添加量作出明確規(guī)定，以保證食品安全[2]。本文采用液相色譜法同時(shí)測(cè)定食品中所添加的苯甲酸及其鈉鹽、山梨酸及其鉀鹽、糖精鈉和安賽蜜。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

Waters allianc acquity e2695液相色譜儀；渦旋混合器；HR/T20 MM 立式高速冷凍離心機(jī)；KH-250DB數(shù)控型超聲波清洗器。

甲醇（HPLC 純）；乙酸銨、亞鐵氰化鉀、乙酸鋅均為分析純；標(biāo)準(zhǔn)試劑：山梨酸、安賽蜜、苯甲酸、糖精鈉純度均＞99%。

1.2 色譜條件

色譜柱：C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動(dòng)相：甲醇+乙酸銨溶液=8+92；柱溫：35 ℃；進(jìn)樣量：10 μL，檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm；流速：1 mL/min。

1.3 樣品前處理

取2.5 g 左右樣品于50 mL 離心管中，加入25 mL 水渦旋振蕩，加入2 mL 10.6%的亞鐵氰化鉀溶液渦旋20 s 混勻，再加入2 mL 22%的乙酸鋅溶液渦旋1 min 后定容至刻度線，超聲30 min，于10 000 r/min 離心10 min，上清液轉(zhuǎn)移至50 mL 容量瓶中，殘?jiān)偌铀靹蚝箅x心提取一次，上清液合并至原容量瓶中，用水定容至刻度線混勻，取上清液2 mL 過0.22 μm 濾膜，供液相色譜上機(jī)檢測(cè)。

2 結(jié)果與討論

2.1 流動(dòng)相條件的選擇

參 照GB 5009.28—2016《食 品 安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定》檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，通過改變甲醇的比例[1]對(duì)比驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)品目標(biāo)峰的分離和出峰時(shí)間，最后確定流動(dòng)相條件為：甲醇+乙酸銨溶液=8+92。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立與分析

準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)品（精確到0.000 1 g），以空白樣品為基質(zhì)制備基質(zhì)空白標(biāo)準(zhǔn)溶液，用空白標(biāo)準(zhǔn)基質(zhì)配制成梯度為1、5、10、25、50、100 mg/L 與200 mg/L的混合系列標(biāo)準(zhǔn)工作液,使用前配制，然后對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行檢測(cè)。圖1 是4 種標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖，從圖1 中可以看出，安賽蜜、苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的出峰時(shí)間分別在10.68、12.41、17.13 min 與26.24 min， 實(shí)現(xiàn)了4 種樣品的同時(shí)檢測(cè)。將色譜檢出的峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度進(jìn)行擬合，計(jì)算出目標(biāo)物的線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)、線性范圍和檢出限，如表1 所示。4 種樣品擬合曲線的線性相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.999 以上。回收率試驗(yàn)的加標(biāo)濃度分別為1、2.5、5 mg/kg，每份樣品分別重復(fù)測(cè)定4次，結(jié)果表明樣品的平均回收率在78.3% ～117.4%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）在1.6%～4.1%。

圖1 4 種添加劑的色譜圖

圖2 4 種添加劑的線性回歸曲線圖

表1 4 種添加劑的線性回歸方程與相關(guān)系數(shù)

3 結(jié)論

本文通過液相色譜法檢測(cè)食品中的苯甲酸及其鈉鹽、山梨酸及其鉀鹽、糖精鈉和安賽蜜，參考GB 5009.28—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定》，為防腐劑和甜味劑的檢測(cè)提供了一種高效、快捷的檢測(cè)方法。利用液相色譜技術(shù)建立了同時(shí)測(cè)定多組分防腐劑和甜味劑的方法，提高了檢測(cè)效率、縮短了樣品的檢測(cè)時(shí)間，并能確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，這也為以后的食品檢測(cè)工作提供了思路上的借鑒。