MCV對不同方法血小板計數結果的影響

張 澤,趙強元

解放軍總醫院第六醫學中心檢驗科，北京 100048

血細胞分析儀是臨床檢驗應用最為普遍的儀器，具有快速、重復性好等特點，為臨床提供準確、有效的血細胞參數[1]。血小板計數檢測是臨床血細胞計數檢驗中的一項重要的分析指標，對多種臨床疾病的診斷及治療具有重要意義，并且與疾病的發展和預后密切相關[2-6]。而臨床血小板檢測中易受溶血、脂血、紅細胞碎片等因素影響導致血小板計數假性減低和假性增高[7]。Sysmex公司XN-2000血細胞分析儀可采用電阻抗法(PLT-I)和熒光染色法(PLT-F)對血小板進行計數分析，其中PLT-I具有快速、重復性好等特點，但易受小紅細胞和紅細胞碎片的影響；PLT-F應用血小板特異性染料結合流式細胞術進行血小板計數，對非血小板顆粒具有較強的抗干擾能力。本次研究分析不同范圍MCV這兩種方法計數血小板結果的差異，并結合直方圖及散點圖，對其準確性及干擾因素進行分析，為實驗室準確檢測血小板計數提供依據。

1 資料與方法

1.1標本來源 隨機收集本院門診、住院患者及體檢者286份標本，根據MCV結果分為3組：A組124例，MCV<72 fL；B組62例，72 fL≤MCV≤82 fL；C組106例，MCV>82 fL。

1.2儀器與試劑 Sysmex XN-2000全自動血細胞分析儀及其配套試劑、質控品，XN-2000血細胞分析儀定期校準，在相關監測指標在控的前提下完成標本檢測。

1.3方法 患者晨起空腹狀態時，采集肘正中靜脈血2 mL，以乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)實施抗凝，以Sysmex XN-2000全自動血液分析儀分別采用PLT-I和PLT-F在2 h內完成檢測。記錄A組標本PLT-I通道血小板直方圖和PLT-F通道熒光散點圖結果。

2 結 果

2.1兩種檢測方法血小板計數比較 見表1，A組PLT-I與PLT-F兩種檢測方法比較，血小板計數差異有統計學意義(P<0.05)；B組與C組這兩種檢測方法比較，血小板計數差異均無統計學意義(P>0.05)。

表1 兩種檢測方法血小板計數結果比較

2.2PLT-I血小板直方圖和PLT-F散點圖分析 觀察PLT-I血小板直方圖，MCV<72 fL時PLT-I血小板直方圖曲線尾部抬高，同時紅細胞直方圖左側出現曲線抬高，提示碎片或小紅細胞增多(圖1A)。PLT-F通道使用半導體激光的流式細胞計數法，描畫出二維散點圖，X軸表示側向熒光強度(SFL)，Y軸表示前向散射光強度(FSC)，可較好區分血小板、紅細胞、白細胞和碎片各組分(圖1B)。

注：A為PLT-I血小板直方圖；B為PLT-F散點圖。

3 討 論

血小板是由骨髓造血組織中的巨核細胞產生，具有維持血管內皮完整性以及黏附、聚集、釋放、促凝和血塊收縮等功能，在止血、傷口愈合、炎性反應及器官移植排斥等生理和病理過程中發揮重要作用[8]。有研究報道，血小板計數結果可為血液性疾病、腫瘤、炎性腸病、燒傷、肝病等疾病的治療及預后提供重要診療信息，同時也是診斷血栓及出血性疾病的重要指標之一[2-6]。臨床血小板計數檢測主要有血液分析儀、顯微鏡及流式細胞儀等方法，顯微鏡法及流式細胞儀法由于操作復雜，耗費大，不適于臨床常規檢測；血液分析儀方法重復性好，自動化程度高，精密度和準確性高，是目前臨床檢測血小板最常用的方法[1]。臨床血液分析儀檢測血小板大多數采用PLT-I原理，即根據血細胞相對非導電的性質，懸浮于電解質溶液中的血小板顆粒在通過計數小孔時引起電阻的變化，以此為基礎對血小板進行計數，該方法具有快速、重復性好的特點，但易受細胞碎片及小紅細胞的干擾，導致血小板計數假性增高。PLT-F是對血小板核酸成分進行熒光染色，采用流式細胞術檢測前向散射光和側向熒光強度，分別檢測細胞大小和細胞內容物及顆粒，根據檢測數據繪制出二維散點圖進行計數，對非血小板顆粒具有較強的抗干擾能力，可較好區分血小板、紅細胞、白細胞和碎片各組分，準確對血小板進行計數[7,9]。

臨床多種疾病可導致血小板計數假性升高，如小細胞貧血、溶血性貧血患者血液中出現小紅細胞、紅細胞碎片，血小板直方圖易與紅細胞直方圖重疊，干擾血小板計數；影響臨床疾病的判斷，需要對血小板計數結果進行校正[10-12]。實驗室目前將MCV正常范圍定為82～100 fL，MCV<72 fL定為推片復檢規則，其判斷的依據參考我國血液學專家小組提出的12條血細胞自動計數顯微鏡復檢陽性標準，但手工操作繁瑣不適于大批量標本檢測。研究證明PLT-F具有較強的抗紅細胞碎片干擾能力，準確性高，可正確計數血小板。本研究結合實驗室復檢規則，根據MCV結果將血常規標本分為3組，記錄PLT-I及PLT-F兩種方法計數血小板結果，統計結果顯示，A組PLT-I和PLT-F血小板計數結果之間差異有統計學意義(P<0.05)，B組和C組PLT-I和PLT-F血小板計數結果之間差異無統計學意義(P>0.05)；觀察A組血小板直方圖中可發現尾部抬高，熒光染色圖示可見碎片及紅細胞各組分，說明紅細胞對PLT-I和PLT-F計數檢測方法具有一定影響，小紅細胞及紅細胞碎片增多時PLT-I血小板計數假性增高，通過PLT-F血小板計數可以得到校正，與報道相符。因此，可用PLT-I進行常規檢測，當MCV<72 fL時應用PLT-F進行復檢可有效避免小紅細胞和紅細胞碎片增多導致的血小板計數假性增高。