新都地區成人血氨測定參考區間的建立*

鐘 麗，黃華翠

四川省成都市新都區人民醫院檢驗科，四川新都 610500

生物參考區間通常指參考值分布的95%置信區間[1],是解釋檢驗結果、分析檢驗信息的基本依據和尺度,是臨床判斷健康與否的標準，實驗室必須保證提供給臨床的參考區間可靠、適用，否則容易引起漏診、誤診[2]。血氨對急慢性肝病的診斷和判斷預后有重要作用。臨床中血氨增高也常見于消化道出血，是急診及危重癥醫學常關注的檢測指標之一。建立本地區成人血氨的參考區間，可為相關疾病的診療提供更可靠的依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 隨機抽取2020年1月10-20日到本院體檢的健康者402例作為研究對象，其中男200例，年齡18～86歲,中位年齡為43歲；女202例，年齡18～93歲，中位年齡為32歲。每10歲為一個年齡段，男女納入人群各分為8個年齡段。納入標準：(1)肝功能檢測正常；(2)無消化道出血及其他消化道疾病；(3)近期沒有接受輸血治療；(4)無各種腫瘤疾病；(5)無先天性疾病。

1.2儀器與試劑 采用美康生物科技股份有限公司生產的血氨檢測試劑盒在貝克曼全自動生化分析儀上進行檢測，并將所得的檢測結果進行統計學分析。使用配套的校準品(批號：190711102，生產日期：20190711，有效期：20200710，校準值：300.0 μmol/L)和質控品(批號：190927101，生產日期：20190927，有效期：20200926)，檢測期間保證每天的室內質控均在控。

1.3方法 所有研究對象均在安靜狀態下采集空腹靜脈EDTA抗凝血3 mL，采血管由江蘇康健醫療用品有限公司生產提供(批號：191201，有效期：20210112)，標本3 000 r/min離心15 min，用血漿檢測。排除標本量不足、嚴重溶血、黃疸、乳糜等標本，立即進行檢測。所有試驗嚴格按照儀器和血氨項目檢測試劑盒的標準操作規程(SOP)進行操作。本研究依據WS/T 402-2012《臨床實驗室檢驗項目參考區間的制定》[2]推薦方法，取單側95%建立各項目的參考區間。

1.4統計學處理 對所得的數據采用Dixon法剔除離群值[3]后，采用SPSS 21.0軟件對檢測結果進行數據處理及統計學分析。采用K-S檢驗對有效數據進行正態性檢驗，對符合正態分布的數據進行t檢驗；對不符合正態分布的數據，采用非參數秩和檢驗。采用SPSS描述統計功能，計算血氨數據的P2.5、P5、P50、P95和P97.5百分位數，以單側第95百分位數(P95)作為參考區間的上限。以P<0.05為差異有統計學意義。

1.5參考區間驗證 隨機抽取男女各20例體檢者做血氨檢測，計算R值。R=測定結果在參考區間內的例數/總測定例數×100%。如20例參考個體中不超過2例檢查結果落在所驗證的參考區間外(即R≥90%)，則可基本認為該參考區間適用；如果有3例及以上的觀測值落在參考區間外，則證明該參考區間不適用。

2 結 果

2.1離群值判斷 對所得的數據使用Dixon法剔除離群值，將各項目數據分男、女升序排列，疑似離群值與相鄰值的差值(D)與數據全距(R)之比D/R≥1/3則判斷為離群值。所有檢測對象的血氨檢測結果按男、女按數值升序排列后，計算D/R值均小于1/3，故保留所有檢測數據。

2.2不同性別血氨檢測結果比較 經檢驗,血氨數據為非正態分布。不同性別間血氨檢測結果差異有統計學意義(Z=-7.946，P<0.05)。故建議分別建立男性和女性血氨的參考區間。見表1。

表1 不同性別血氨檢測結果比較(μmol/L)

2.3不同年齡段血氨檢測結果比 各性別不同年齡段間血氨水平差異無統計學意義(P>0.05)。故無需依據年齡分別建立血氨指標的參考區間。見表2。

表2 不同年齡段血氨檢測結果比較

2.4健康成人血氨的參考區間 健康成人的血氨檢測結果的分布在統計學上存在性別差異，但不存在年齡差異，故建立不同性別參考區間。取單側95%建立各項目的參考區間，健康成年男性血氨參考區間為0～65.0 μmol/L，健康成年女性血氨參考區間為0～52.0 μmol/L。 見表3。

2.5驗證生物參考區間 隨機抽取男女各20例體檢者檢測血氨值，檢測結果均在自建參考區間內，即檢測結果落在本研究參考區間外的個數為0例(R≥90%)。

表3 成人血氨參考區間(μmol/L)

3 討 論

氨是人體內氨基酸代謝的主要產物，成人每天產生大約1 000 mmol 的氨，主要在腸道吸收，一部分氨在生物合成中被重新利用，在肝臟通過鳥羧酸循環轉化為尿素由腎臟排出[4]，其余部分對機體沒有作用甚至具有神經毒性[5]。血氨的檢測廣泛用于肝臟疾病、小兒先天性高血氨血癥等疾病的診斷、鑒別診斷及治療中[6]。大量臨床研究數據表明，高氨血癥能活化肝星狀細胞和導致肌肉萎縮的發生[7-8]，是肝硬化患者的獨立危險因素，與肝性腦病的發生密切相關[9]。除肝源性疾病外，血氨增高還常見于消化道出血及危重患者，大量臟器出血、大量輸血、低鉀血癥、腎臟病變等患者，血氨增高會抑制神經系統的功能，引起昏迷，不利于患者的預后恢復[10]。目前高血氨的研究仍在繼續，可能其危害仍未完全發現。生物參考區間是臨床判斷健康與否的標準，適宜的生物參考區間對疾病的預防、診斷、療效及預后都有重要的指導意義。臨床各實驗室使用檢測方法、儀器、試劑、環境等不同，加之生物屬性本身存在個體差異，故建立適合本地區人群的參考區間尤為重要。本實驗室通過對402例健康人群的血液進行血氨檢測，建立本地區男性成人18～86歲血氨的參考區間為0～65.0 μmol/L，女性成人18～93歲血氨的參考區間為0～52.0 μmol/L，并通過了實驗室內參考區間驗證。在得到實驗室參考區間的基礎上，聯系醫務科，與臨床各科室老師共同商討確立了適合本地區的血氨危急值。

參考區間的適用性取決于實驗室檢驗結果與建立參考區間結果的可比性和服務人群的適用性[11]。直接引用試劑說明書的參考范圍，勢必會影響醫生對疾病的準確判斷，建立本地區血氨的參考區間十分重要和必要，建議每個實驗室應根據自己的檢測系統和本地區人群特性，建立適合本地區人群的參考區間。