動物檢測樣品采集和處理

劉瑩

動物檢測樣品采集和處理

劉瑩

（河南省西峽縣動物衛生監督所，河南 西峽 474500）

動物檢測樣品的采集、保存、運輸和處理，事關所采檢測樣品的質量和檢測結果的準確性。為有效保障動物檢測樣品的質量及安全性，本文就采集和處理動物檢測樣品過程中應注意的事項進行了闡述。

動物樣品；采集；處理

動物檢測樣品是實驗室檢測工作的對象，樣品的采集、保存、運輸和處理關系著所采檢測樣品的質量，決定著檢測工作的成敗，是實驗室操作質量控制的首要環節。采集動物檢測樣品應注意以下事項：

1 樣品的采集和處理

樣品采集時應穿戴好防護用品（如一次性手套、鞋套、防護服，口罩等）后再進行樣品采集，應避免防護用品破損。樣品采集操作完成后，應嚴格按照生物安全要求妥善處理相關污染物品，以免造成人畜感染和環境污染。

1.1 病原微生物樣品的采集和處理

（1）充分保定動物。在減少動物應激的同時，避免動物對采樣人員構成威脅。

（2）做好環境消毒和動物尸體處理工作。防止污染環境，防止疫病傳播。

（3）根據不同檢測目的，采集相應的樣品。如監測抗體采用血清樣品，檢測抗原則根據病原不同分別采集相應的內容物、分泌物、組織臟器、排泄物或其他材料，不能初步判斷病因時應進行全面采樣待查。進行流行病學調查、抗體監測、群體健康狀況評估或環境衛生檢測時，樣品數量應滿足統計學要求及一定飼養階段的區間分布。企業進行群體抗體監測時可根據群體大小和日齡狀態，制定符合養殖場自身的采樣方案和樣本數目。

（4）采集樣品時應無菌操作。

（5）所采集樣品要及時標記并進行登記。

（6）用于細菌檢測的樣品，如果是無菌樣品，接種前無需作特別處理；有雜菌污染的樣品，可接種選擇性培養基抑制雜菌生長；奶、尿等樣品含菌量少時，可用離心法或過濾法作集菌處理。

1.2 血樣的采集和處理

采集全血應根據試驗要求選擇合適的抗凝劑，如肝素、乙二胺四乙酸（EDTA）、阿氏液、枸櫞酸鈉等。血清血液樣品采集后應避免震蕩，于室溫下靜置2～4 h（避免暴曬），待血液凝固、血清析出后分離血清，置4 ℃ 保存，如需長期保存應置于-20 ℃ 保存，避免反復凍融。

1.3 眼、呼吸道、咽、肛拭子的采集與處理

需進行病毒分離的樣品用無菌PBS液保存，如需長期保存，應置于-70 ℃；待進行細菌學檢驗的應立即進行涂片染色和接種相應培養基；待進行核酸檢測的樣品用50 % 甘油生理鹽水保存，保存液沒過拭子即可。所采集樣品應用稀釋液作1～2倍稀釋，室溫作用1 h后充分振蕩，離心取上清液。

1.4 實質臟器的采集和處理

（1）對已死亡的畜禽，應盡快采集，冬季不超過6 h，夏季不超過4 h。瀕死畜禽，在放血后采集。采集實質臟器時應無菌操作，將所采臟器組織塊，放入無菌容器，每塊組織應單獨放置，取材應包括病灶和周邊正常組織。供組織病理學檢查的樣品應新鮮，不能冷凍，不能擠壓，避免人為損傷，組織塊以1.5 cm × 1.5 cm × 1.5 cm為宜。如作冷凍切片，則需將組織放在0～4 ℃保存，盡快進行切片、檢測；作石蠟切片應及時用10 % 甲醛溶液固定；進行分子生物學檢查的樣品，應保持新鮮，低溫保存，不能及時檢測的，7 d內可于 -20 ℃保存，超過30 d的應置于-70 ℃保存，但應避免反復冷凍。進行細菌學檢驗時，應及時進行觸片、固定。

（2）供顯微鏡檢查的膿汁、血液、分泌物等樣品，應無菌操作，盡快進行涂片、固定。

2 樣品的記錄

送往實驗室的樣品應填寫一式兩份的送檢單，一份隨樣品送實驗室，另一份留送備案。送檢單應包括畜主姓名、場址、動物品種及數量；被感染動物的種類、數量、發病日期、造成損失、感染動物在畜群中的分布情況、發病動物及死亡數量、臨床癥狀、病理變化、免疫及用藥情況。送檢樣品的清單和說明應包括病料種類、保存方法等。

3 樣品的運輸

運輸樣品時應提前與動物疫病診斷室溝通，并視天氣情況和運輸時間長短，將所采集的樣品放入加有足夠冰袋的泡沫保溫箱中，以最快最直接的途徑送往實驗室。如果樣品能在采集后24 h內抵達實驗室，應放在4 ℃的容器中密封保存，專人運送。如需寄送，裝箱時要內裝防震材料。在制成的涂片、觸片、玻片上做好標記，火焰固定，放入玻片盒內，并另附說明。所有樣品都要標注詳細標簽。

[1] 樊麗鑫, 袁慧, 宋紅靜. 獸醫臨床樣品的采集與送檢規范[J]. 山東畜牧獸醫, 2015, 36（6）: 55-56.

[2] 劉煒, 賈松濤, 彭志領. 基層動物疫病防控技術指南[M]. 鄭州: 河南人民出版社, 2014.

[3] 袁江平. 牛羊布魯氏菌病臨床樣品的采集與送檢技術要點[J]. 山東畜牧獸醫, 2018, 39（6）: 56.

（2021–05–08）

S851.2+1

C

1007-1733（2021）08-0041-02