系統(tǒng)性紅斑狼瘡患兒血清IL-18、IL-23及MCP-1水平變化及其臨床意義

王文芳，龐春玉，王緒松，譚三陽

海南省海口市婦幼保健院檢驗(yàn)科，海南海口 570100

兒童系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一種常見的慢性自身免疫性疾病，以T、B細(xì)胞異常活化，大量自身抗體產(chǎn)生，免疫復(fù)合物沉積及多系統(tǒng)受累為主要臨床特征[1-2]。研究發(fā)現(xiàn)，白細(xì)胞介素-18(IL-18)作為一種炎癥細(xì)胞因子，對多種免疫活性細(xì)胞有直接或間接的調(diào)節(jié)功能，在自身免疫性疾病的發(fā)病過程中發(fā)揮一定作用[3]。白細(xì)胞介素-23(IL-23)是輔助性T(Th)17和Th22細(xì)胞的重要效應(yīng)分子，其異常表達(dá)可引起機(jī)體免疫功能紊亂及炎性反應(yīng)，導(dǎo)致組織器官的損傷，參與了SLE腎損傷的發(fā)生、發(fā)展[4]。單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)是CC趨化因子家族的一個(gè)小分子細(xì)胞因子，能誘導(dǎo)單核細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)黏附分子，使各種炎癥細(xì)胞，尤其是單核細(xì)胞向病變部位聚集，在SLE腎損傷中起重要作用[4]。本研究通過檢測SLE患兒血清IL-18、IL-23及MCP-1的水平變化，分析其對兒童SLE的診斷價(jià)值，以期為兒童SLE診斷及治療提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年1月至2019年9月本院收治的SLE患兒138例為SLE組，其中男23例，女115例；年齡6～14歲，平均(8.26±2.50)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合最新修訂的SLE診斷分類標(biāo)準(zhǔn)者[5]；(2)臨床資料完整，能配合本次研究者。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并急性或慢性炎癥疾病、急性腎損傷、惡性腫瘤、血液系統(tǒng)疾病，嚴(yán)重心、腦、腎等原發(fā)性疾病及其他自身免疫性疾病者；(2)近1個(gè)月內(nèi)服用過免疫抑制劑或激素者。另選取60例體檢健康者為對照組，其中男13例，女47例；年齡6～15歲，平均(8.40±2.28)歲。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，并與患兒家屬簽署知情同意書。

1.2分組方法 采用SLE病情活動(dòng)指數(shù)(SLEDAI)評分評估疾病活動(dòng)度，其中低活動(dòng)組66例(SLEDAI評分<9分)，高活動(dòng)組72例(SLEDAI評分≥9分)。

1.3觀察指標(biāo) 采集所有研究對象空腹時(shí)靜脈血5 mL，3 500 r/min離心10 min，-70 ℃保存待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)檢測血清IL-18、IL-23及MCP-1水平，試劑購自北京博奧森生物技術(shù)有限公司；采用ELISA檢測抗雙鏈DNA(dsDNA)抗體水平，試劑購自上海晶抗生物技術(shù)有限公司；血清清蛋白(ALB)、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、C-反應(yīng)蛋白(CRP)在美國貝克曼庫爾特全自動(dòng)生化分析儀上檢測；采用日本希森美康XN3000血細(xì)胞分析儀檢測血紅蛋白(Hb)和血小板計(jì)數(shù)(PLT)水平；操作過程均嚴(yán)格按照儀器及試劑說明書進(jìn)行。

2 結(jié) 果

2.1SLE組和對照組一般資料及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較 SLE組抗dsDNA抗體及CRP水平高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。SLE組Hb、PLT、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4及ALB水平低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。兩組性別、年齡及體質(zhì)量指數(shù)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 SLE組和對照組一般資料及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較

組別nPLT(x±s,109/L)補(bǔ)體C3(x±s,g/L)補(bǔ)體C4(x±s,g/L)ALB(x±s,g/L)CRP(x±s,mg/L)對照組60265.42±61.371.14±0.410.34±0.1049.16±7.603.38±1.15SLE組138204.84±45.250.62±0.230.11±0.0533.48±5.729.86±3.74χ2/t3.2518.2054.6078.1653.984P0.036<0.0010.005<0.0010.018

2.2SLE組和對照組血清IL-18、IL-23及MCP-1水平比較 SLE組血清IL-18、IL-23及MCP-1水平高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 SLE組和對照組血清IL-18、IL-23及MCP-1水平比較

2.3高活動(dòng)組和低活動(dòng)組血清IL-18、IL-23及MCP-1水平比較 高活動(dòng)組血清IL-18、IL-23及MCP-1水平高于低活動(dòng)組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

2.4血清IL-18、IL-23及MCP-1水平對兒童SLE的診斷價(jià)值 血清IL-18、IL-23及MCP-1水平診斷兒童SLE的最佳臨界值分別為227.50、94.46、161.28 pg/mL，三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合診斷兒童SLE的AUC為0.924，明顯高于IL-18(AUC為0.845)、IL-23(AUC為0.796)及MCP-1(AUC為0.817)單獨(dú)診斷，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=4.472、5.318、5.116，P<0.05)，聯(lián)合診斷的靈敏度和特異度分別為93.6%和87.0%。見表4。

表3 高活動(dòng)組和低活動(dòng)組血清IL-18、IL-23及MCP-1水平比較

表4 血清IL-18、IL-23及MCP-1水平對兒童SLE的診斷價(jià)值

2.5SLE患兒血清IL-18、IL-23及MCP-1水平與其他實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)分析顯示，SLE患兒血清IL-18、IL-23與MCP-1水平之間均呈正相關(guān)(P<0.05);SLE患兒血清IL-18、IL-23及MCP-1水平與SLEDAI評分及抗dsDNA抗體水平均呈正相關(guān)(P<0.05)，與補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4及ALB水平均呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，與Hb、PLT及CRP水平不相關(guān)(P>0.05)。見表5。

表5 SLE患兒血清IL-18、IL-23及MCP-1水平與其他實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的相關(guān)性分析

3 討 論

兒童SLE是一種多系統(tǒng)受累的自身免疫性疾病，其發(fā)病機(jī)制與遺傳因素、環(huán)境因素、免疫功能紊亂有關(guān)，各種因素相互作用，導(dǎo)致炎癥因子釋放，產(chǎn)生自身抗體，引起多種組織和器官的炎癥及損傷[6]。自身抗體作為臨床診斷SLE的常用實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目，檢測結(jié)果影響因素較多，其靈敏度及特異度不穩(wěn)定，尚不能成為SLE診斷及病情評估的最佳標(biāo)志物。因此，尋找能夠在SLE患者體內(nèi)特異表達(dá)的生物學(xué)指標(biāo)，對SLE的輔助診斷、病情評估及療效判斷有重要的臨床意義。IL-18是近年來研究發(fā)現(xiàn)的Th1細(xì)胞因子家族中的一員，主要由激活的單核或巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，在誘導(dǎo)Th1細(xì)胞的分化成熟過程和Th1細(xì)胞為主的免疫反應(yīng)中有重要的調(diào)節(jié)作用，參與了SLE的發(fā)病過程[7]。IL-23主要由活化的抗原遞呈細(xì)胞分泌產(chǎn)生，對Th17細(xì)胞的存活及增殖有重要作用，能夠促進(jìn)Th細(xì)胞釋放IL-17，從而參與自身免疫性疾病的發(fā)生及發(fā)展[8]。MCP-1是單核細(xì)胞的特異性趨化和激活因子，對單核細(xì)胞及T細(xì)胞具有募集作用，同時(shí)誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞產(chǎn)生炎癥介質(zhì)，造成腎組織的損傷，在SLE的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用[9]。

本研究顯示，SLE組血清IL-18、IL-23、MCP-1及抗dsDNA抗體水平均高于對照組，且高活動(dòng)組血清IL-18、IL-23及MCP-1水平均高于低活動(dòng)組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；SLE患兒血清IL-18、IL-23及MCP-1水平與SLEDAI評分及抗dsDNA抗體水平均呈正相關(guān)。提示IL-18、IL-23及MCP-1在SLE患兒中異常高表達(dá)，且與SLE活動(dòng)性相關(guān)，其水平升高可能預(yù)示疾病的活動(dòng)性較高。本研究中SLE組補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4及ALB水平均低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且SLE患兒血清IL-18、IL-23及MCP-1水平與補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4及ALB水平均呈負(fù)相關(guān)。這進(jìn)一步提示血清IL-18、IL-23及MCP-1水平與SLE患兒病情惡化有關(guān)，有可能是監(jiān)測SLE患兒病情變化的參考指標(biāo)。劉美蘭等[10]研究顯示，狼瘡性腎炎患者血清IL-18水平明顯升高，且與疾病活動(dòng)性及病理變化呈正相關(guān)，IL-18可以作為預(yù)測狼瘡性腎炎活動(dòng)性的指標(biāo)。ELGLIL等[11]研究發(fā)現(xiàn)，有腎損傷的SLE患者IL-23水平明顯高于無腎損傷的SLE患者，IL-23在SLE和狼瘡性腎炎的發(fā)生、發(fā)展中起一定作用，未來有望作為SLE診斷的生物學(xué)標(biāo)志物。另有研究表明，活動(dòng)性狼瘡性腎炎組血清MCP-1水平明顯高于非活動(dòng)性狼瘡性腎炎組，與SLE活動(dòng)性密切相關(guān)，MCP-1可能有助于監(jiān)測SLE腎損傷的嚴(yán)重程度[12]。本研究ROC曲線結(jié)果表明，血清IL-18、IL-23及MCP-1水平診斷兒童SLE的最佳臨界值分別為227.50、94.46、161.28 pg/mL，三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合診斷兒童SLE的AUC最大，其靈敏度和特異度較高。說明三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測有助于提高診斷兒童SLE的準(zhǔn)確性，有望作為兒童SLE診斷及判斷疾病活動(dòng)性的生物學(xué)指標(biāo)。JAFARI-NAKHJAVANI等[13]研究顯示，SLE患者血清IL-18水平明顯高于對照組，且與SLE患者的腎臟損傷嚴(yán)重程度和疾病活動(dòng)性相關(guān)，IL-18可能參與了SLE的發(fā)病機(jī)制，并有望作為診斷SLE的潛在生物學(xué)標(biāo)志物。XIA等[14]研究發(fā)現(xiàn)，與健康對照組比較，SLE患者血清和尿液中IL-23水平升高，其與腎臟SLE的SLEDAI評分相關(guān)，可作為狼瘡性腎炎診斷的可靠指標(biāo)。GMEZ-PUERTA等[15]研究認(rèn)為，SLE患者的血清MCP-1水平升高，與疾病活動(dòng)性和腎臟損傷相關(guān)，對SLE的鑒別診斷和判斷疾病活動(dòng)性有一定價(jià)值。本研究顯示，SLE患兒血清IL-18、IL-23與MCP-1水平之間均呈正相關(guān)，提示機(jī)體中Th1、Th17細(xì)胞和單核細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子間交互作用，形成復(fù)雜的免疫調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，共同參與SLE的發(fā)病過程。但這些研究仍處于初步探索階段，今后尚需更多的臨床研究來進(jìn)一步證實(shí)IL-18、IL-23及MCP-1在SLE中的臨床應(yīng)用價(jià)值，使其為臨床提供更豐富的SLE診療體系。

綜上所述，與對照組比較，SLE組血清IL-18、IL-23及MCP-1水平升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且與疾病的活動(dòng)性相關(guān)，三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測對兒童SLE的診斷有一定價(jià)值，同時(shí)也為了解SLE的發(fā)病機(jī)制提供了新思路。