四君子湯對大腸癌術后化療患者腸道菌群及免疫功能影響的臨床研究

章斐然，謝澳斯，張金海，蔡曉敏，陳君填，李 威

(汕頭大學醫學院第一附屬醫院 1.胃腸外科，2.中醫科，廣東 汕頭 515041)

大腸癌為我國常見腫瘤，居我國癌癥發病及死亡的第4位[1]，嚴重威脅人民健康。大腸癌患者行外科手術是獲得治愈機會的必要選擇。大腸癌手術對腸道造成不同程度損傷，干擾腸道微生態，且手術作為應激源，可進一步破壞腸道屏障，導致腸道微生態變化[2]。術后輔以化療成為大多數大腸癌患者的必經途徑。術后化療會進一步導致腸道菌群失調[3]?；熂毎拘运幬镏苯踊蜷g接殺死免疫效應細胞，可導致免疫系統功能低下或免疫無能[4]。四君子湯為祖國醫學經典藥方，出自宋代《太平惠民合劑局方》，由白術、茯苓、人參、炙甘草等組成，具有健脾益氣功效，臨床主要用于脾虛證治療[5]。臨床上惡性腫瘤患者化療后往往存在脾虛證[6]。動物研究[7-8]顯示健脾益氣類方藥能通過調節腸道菌群，改善患者免疫功能。然而對四君子湯對大腸癌術后化療患者作用研究的報道較少。本研究采用健脾益氣方藥配合化療，觀察四君子湯加減對大腸癌術后化療患者腸道菌群及機體免疫功能的影響，探討該方對化療患者的腸道菌群調節及免疫作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2017年10月—2018年10月在汕頭大學醫學院第一附屬醫院胃腸外科行大腸癌根治手術患者60例，其中男性32例，女性28例，平均年齡(56.4±10.2)歲。采用病例隨機對照研究方法，將入選患者分成中藥加化療組(30例)和單獨化療組(30例)。納入標準：術后病理結果確診大腸癌，腫瘤分期Ⅰ～Ⅲ期，術后恢復良好，術后1個月內行mFOLFOX6方案化療；年齡在18～60歲之間；無重大基礎疾病，化療用藥前后2周無使用相關抗生素。排除標準：腸造口患者；有嚴重內分泌、心血管、血液、肝、腎等系統疾病以及骨髓抑制患者；孕婦及哺乳期婦女；明確表示拒絕中醫藥相關治療患者。本研究經汕頭大學醫學院第一附屬醫院倫理委員會批準，所有研究對象均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 治療組口服健脾益氣方藥(四君子湯制劑加減)聯合大腸癌一線標準化療mFOLFOX6方案(奧沙利鉑135 mg/m2，靜滴3 h；亞葉酸鈣200 mg/m2，靜滴2 h，5-氟尿嘧啶400 mg/m2，靜脈注射；5-氟尿嘧啶3 000 mg/m2，持續泵注48 h，在推注5-氟尿嘧啶后執行)，2周為1個周期，術后第1次化療；對照組單純化療，方案同治療組。四君子湯制劑組方：黃芪30 g，當歸6 g，西洋參5 g，白術12 g，敗醬草30 g，白花蛇舌草30 g，茯苓30 g，山藥30 g，薏苡仁30 g，甘草6 g。100 mL/次，2次/d，10 d為1個療程，化療前10 d開始服用，連續服用10 d。

1.2.2 腸道菌群檢測 取新鮮糞便3～5 g于無菌瓶內并0.5 h內送檢。取0.5 g糞便，加入無菌稀釋液稀釋，根據不同菌種要求，選擇不同稀釋度，分別接種于相應培養基上。需氧菌(腸桿菌、腸球菌)置37℃培養箱培養，24 h后進行菌落計數。厭氧菌(雙歧桿菌、乳桿菌)采用Gas Pak厭氧培養，48～72 h后進行菌落計數。結果以每克糞便中菌落形成單位(colony forming unit，CFU)的常用對數值(lg CFU/g)表示。

1.2.3 其他觀察指標 免疫功能：分別于化療前10 d及化療后4 d抽取靜脈血1 mL，用流式細胞儀檢測T淋巴細胞亞群(CD3、CD4、CD8、CD4/CD8)和NK細胞百分比。生活質量：采用卡氏功能狀態(Karnofsky performance status，KPS)評分評估患者的生活質量，治療前后KPS評分提高≥10分為改善；減少≥10分為降低；增加或減少＜10分為穩定。骨髓抑制程度評價：采用世界衛生組織抗癌藥物急性及亞急性毒性反應分度標準，0～Ⅰ度為輕微，Ⅱ度為中等，Ⅲ～Ⅳ度為嚴重。

1.3 統計學方法

應用SPSS 25.0統計軟件進行分析。符合正態分布的計量資料以±s表示，組間比較用t檢驗；計數資料以例數或百分率表示，組間比較用卡方檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般資料

2組患者一般資料比較，差異無統計學意義(均P＜0.05)。見表1。

表1 2組一般資料比較 (n=30)

2.2 2組治療前后腸道菌群變化比較

大腸癌術后化療患者的腸道菌群失衡，中藥加化療組雙歧桿菌及乳桿菌較單純化療組增多(均P＜0.05)，腸桿菌及腸球菌無明顯變化(P＞0.05)，說明四君子湯可促進益生菌生長，見表2。

2.3 2組治療前后免疫功能比較

中藥加化療組CD3、CD4、CD4/CD8水平較單獨化療組高(均P＜0.05)，兩組NK細胞百分比差異無統計學意義(P＞0.05)，見表3。

表2 2組治療前后腸道菌群變化比較 (n=30，±s，lg CFU/g)

表2 2組治療前后腸道菌群變化比較 (n=30，±s，lg CFU/g)

1)：與單純化療組相比，P＜0.05。

治療后5.94±0.30 5.84±0.25組別中藥加化療組單純化療組雙歧桿菌治療前6.18±0.26 6.02±0.25治療后8.12±0.311)5.83±0.36乳桿菌治療前7.52±0.29 7.22±0.41治療后8.62±0.361)6.94±0.21腸桿菌治療前7.02±0.23 6.82±0.34治療后7.01±0.15 6.92±0.21腸球菌治療前5.82±0.27 5.62±0.36

表3 2組治療前后免疫功能比較 (n=30，±s，%)

表3 2組治療前后免疫功能比較 (n=30，±s，%)

1)：與單純化療組相比，P＜0.05。

組別中藥加化療組單純化療組CD3治療前60.28±10.06 59.42±10.35治療后66.02±11.311)58.23±11.26 CD4治療前32.12±8.29 30.22±8.41治療后37.68±9.361)29.96±0.31 CD8治療前24.02±7.23 23.82±8.04治療后23.31±8.15 22.92±7.81 CD4/CD8治療前1.52±0.57 1.44±0.66治療后1.90±0.601)1.31±0.75 NK細胞治療前23.45±10.87 20.16±9.97治療后22.96±11.87 20.86±11.07

2.4 2組治療后KPS評分及骨髓抑制程度比較

中藥加化療組患者治療后KPS評分高于單純化療組(P＜0.05)，見表4；2組患者骨髓抑制程度差異無統計學意義(P＞0.05)，見表5。

表4 2組治療后KPS評分對比 (n=30)

表5 2組治療后骨髓抑制程度對比 (n=30)

3 討論

越來越多的臨床及實驗證實中醫藥與腸道微生態關系密切，中草藥作為微生態調節劑，對人體的生理代謝功能發揮重要作用[9-10]。馬祥雪等[10]假定中醫的“證”或“癥”就是人體腸道微生態變化產生的某些繼發反應導致的“表觀現象”，通過藥物調理腸內菌群的平衡，對“證”施以影響，對證下藥，達到治療疾病的目的，因此腸道微生態的微小變化都可以對“證”產生深遠的影響。本研究結果顯示，中藥加化療組患者在服用四君子湯后，腸道內雙歧桿菌及乳桿菌較單純化療組增多，說明四君子湯可促進腸道正常菌群生長。免疫功能指標CD3、CD4、CD4/CD8水平較單純化療組高，提示四君子湯能增強大腸癌術后化療患者的免疫功能，其具體機制是單獨作用還是通過調節腸道微生態來協同作用，尚需進一步研究。

綜上所述，以四君子湯為代表的健脾益氣方藥能調節腸道微生態，減少腸道菌群紊亂，并能增強患者機體免疫力，給腫瘤患者的綜合治療提供了有利條件，值得臨床推廣應用。本研究拓寬了中醫方藥在腫瘤化療領域的有效應用。