復合乳酸菌膠囊對小兒慢性腹瀉病的療效及對其腸道微生態的影響

熊學敏，邵榮昌，方麗玲，姜勇超，何茹

小兒慢性腹瀉病是兒科較為常見的消化道疾染病，以大便次數增多、大便性狀改變等主要臨床表現，易導致小兒營養不良、生長發育障礙等，嚴重影響小兒健康。據流行病學資料統計顯示，全球導致5 歲以下小兒死亡原因中，腹瀉病占據第2位（18.00%）。目前臨床上對于小兒慢性腹瀉病的治療多采用抗生素、腸黏膜保護劑等藥物，但收效甚微。復合乳酸菌膠囊一種富含乳酸桿菌、乳酸鏈球菌、嗜乳酸桿菌的新型復方微生態制劑，通過口服可在腸道內定植、繁育，提高腸道益生菌含量，調節腸道微生態失調，抑制病原菌的滋生、繁殖，在修復腸道黏膜方面療效顯著。據報道，復合乳酸菌膠囊在小兒慢性腹瀉病中應用療效顯著，但是關于其對慢性腹瀉病小兒腸道微生態的影響報道尚少，鑒于此，本研究特采用分組方法探討此問題，以期為臨床治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2018年10月醫院收治的82例患有慢性腹瀉病的小兒，采用隨機數字表法將其分為對照組與觀察組，每組各41例。其中對照組男22 例，女19 例，年齡范圍為6 個月至6歲，年齡（3.14±0.63）歲，病程范圍為2～4個月，病程（3.58±0.71）個月，其中，感染后腸炎癥16例，乳糖不耐癥8 例，腸易激綜合征10 例，潰瘍性結腸炎7 例。觀察組男20例，女21例，年齡范圍6個月至6歲，年齡（3.11±0.62）歲，病程范圍2～4 個月，病程（3.56±0.69）個月，其中，感染后腸炎癥18例，乳糖不耐癥6例，腸易激綜合征9例，潰瘍性結腸炎8例。兩組的一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。本研究符合《世界醫學協會赫爾辛基宣言》。

納入標準：符合小兒慢性腹瀉病的診斷標準者；年齡為6 個月至6 歲；發病后未使用其它抗菌藥物治療者；小兒近親屬知情并簽署知情同意書；所有小兒每天排便頻率≥4次，大便為水樣或者蛋花樣，無脫水現象。

排除標準：嚴重營養不良者；合并心、肝、腎等功能不全者；存在藥物過敏史者；存在代謝性疾病或胃腸道畸形等疾病史者；存在嚴重傳染性疾病者；中途退出研究或者轉入其他醫院者。

1.2 方法

對照組給予常規治療：入院后對小兒口服補液鹽、糾正水電酸堿平衡、抗感染治療、增強免疫、調節腸道菌群等常規治療，并指導小兒近親屬適當減少母乳喂養，采用無乳糖奶粉配合米湯、面糊的方式進行喂養；此外，給予蒙脫石散（哈藥集團中藥二廠，國藥準字H20093375，生產批號160914）口服治療，3克∕次，3次∕日。

觀察組在對照組的基礎上聯合復合乳酸菌膠囊（江蘇美通制藥有限公司，國藥準字H19980184，生產批號160109）口服治療，年齡≤1 歲的小兒，0.5粒∕次，3次∕日；年齡＞1歲的小兒，1粒∕次，3次∕日。

兩組治療時間均為7 d。

1.3 觀察指標

比較兩組治療后的止瀉時間、排便頻率。比較兩組小兒慢性腹瀉病的臨床療效。顯效：治療3 d 后，小兒大便次數、性狀及全身癥狀均恢復正常；有效：治療3 d后，小兒大便次數、性狀及全身癥狀均有所改善，但尚未恢復正常；無效：治療3 d 后大便次數、性狀及全身癥狀均無改善，甚至呈加重趨勢。總有效率＝（顯效+有效）∕總例數×100%。比較兩組治療后的腸道微生態結構及復雜度。（1）腸道微生態結構檢測方法：對所有小兒取0.2 g 的新鮮大便，檢測其大便樣本的微生物總DNA，并建立DNA 文庫，利用DNAMAN 軟件拼接測序結果，以獲取其基因框架，并預測代表基因的開放閱讀框，去除冗余。之后與腸道菌群數據庫進行序列比對，鑒別出腸道菌群的種類及結構，并計算物種的豐度。（2）腸道微生態復雜度的檢測方法：利用Ion Torrent PGM 技術對腸道菌群16S rRNA V3區進行聚合酶鏈式反應擴增進行高通量測序，對測序結果處理及聚類分析，利用R 軟件繪制豐富度（Chao1）指數及多樣性（Shannon）指數箱線圖。

比較兩組不良反應發生情況。

2 結果

2.1 止瀉時間、排便頻率

表1 所示，治療后觀察組的止瀉時間顯著短于對照組（P＜0.05），排便頻率顯著低于對照組（P＜0.05）。

表1 小兒慢性腹瀉82例止瀉時間、治療后排便頻率的比較∕

2.2 臨床療效

表2所示，兩組臨床療效等級分布差異顯著（P＜0.05），觀察組總有效率顯著高于對照組（P＜0.05）。

表2 小兒慢性腹瀉82例臨床療效比較∕例（%）

2.3 腸道微生態結構及復雜度

治療后兩組的糞便樣本中共分為厚壁菌門（Firmicutes）、擬桿菌門（Bacteroidetes）、變形菌門（Proteobacteria）、放線菌門（Actinobacteria）、螺旋菌門（Spirochactes）和梭桿菌門（Fusobacteria）6 大門，其中治療后觀察組糞便樣本依次比例分別為83.04%、2.15%、13.24%、1.10%、0.29%、0.11%，對照組糞便樣本中的比例依次為76.21%、3.58%、11.69%、3.82%、2.97%、1.73%，治療后觀察組糞便中厚壁菌門比例顯著高于對照組。治療后，觀察組腸道中雙歧桿菌屬、乳桿菌屬、腸球菌屬、大腸桿菌屬、嗜堿菌屬、鹽單胞菌屬、節細菌屬、梭菌屬、葡萄球菌屬豐度分別為（50.95±9.53）%、（10.31±2.06）%、（10.16±2.03）%、（7.85±1.26）%、（6.73±1.14）%、（5.29±1.02）%、（3.24±0.57）%、（2.91±0.53）%、（2.56±0.42）%，對照組分別為（13.37±2.56）%、（9.40±1.48）%、（12.59±3.12）%、（41.28±8.25）%、（7.48±1.33）%、（6.03±1.16）%、（3.66±0.62）%、（3.24±0.56）%、（2.95±0.53）%，其中觀察組的雙歧桿菌屬、乳桿菌屬顯著高于對照組（P＜0.05），大腸桿菌屬、腸球菌屬顯著低于對照組（P＜0.05）。見表3。

表3 小兒慢性腹瀉82例治療后腸道微生態優勢菌群數量變化∕（lg拷貝數∕g濕便，）

觀察組治療后腸道微生態Chao1指數、Shannon指數均高于對照組（P＜0.05），見表4。

表4 小兒慢性腹瀉82例治療后腸道微生態Chao1指數、Shannon指數∕

2.4 不良反應發生情況

表5所示，兩組治療期間在嘔吐、皮疹、便秘發生率及總發生率均差異無統計學意義（P＞0.05）。

表5 小兒慢性腹瀉82例不良反應發生情況比較∕例（%）

3 討論

小兒慢性腹瀉病是一種由多病源、多因素綜合作用所導致的慢性消化道疾病，及時有效的治療至關重要。目前臨床上針對小兒慢性腹瀉病尚無特殊療法。因此，探討復合乳酸菌膠囊治療小兒慢性腹瀉病的療效及對其腸道微生態的影響意義重大。

研究顯示，蒙脫石散可以吸附病毒，減輕病毒對胃腸道黏膜的損傷，提高胃腸道黏膜對致病因子的防御能力的作用。本研究在蒙脫石散常規用藥的基礎上聯合復合乳酸菌膠囊可有效改善小兒慢性腹瀉病的臨床癥狀，與黃新宇研究結果相符。推測其原因，可能是由于復合乳酸菌膠囊是一種包含乳酸桿菌、乳酸鏈球菌、嗜乳酸桿菌的活菌制劑，口服后能夠有效抑制機體致病菌滋生，并保障機體內正常腸道菌群吸收營養物質，分泌足夠的乳酸，緩解胃腸道內的堿性環境，進而有效地抑制病原菌的增殖。此外，復合乳酸菌膠囊還可以促進消化酶的分泌，以增加對胃腸道的保護作用。本研究發現，觀察組的止瀉時間短于對照組，治療后排便頻率低于對照組，兩組的臨床療效等級分布差異顯著，且觀察組的總有效率優于對照組，說明復合乳酸菌膠囊治療小兒慢性腹瀉病不僅能夠改善臨床癥狀，而且可以提高臨床療效。

本研究發現，治療后兩組的糞便樣本中門水平微生物組成基本相似，但是不同的菌門比例有所差異，治療后觀察組的不同菌屬豐度與對照組也有明顯差異，觀察組的雙歧桿菌屬、乳桿菌屬優于對照組；此外，治療后觀察組腸道微生態Chao1 指數和Shannon 指數均高于對照組，提示復合乳酸菌膠囊治療小兒慢性腹瀉病可以改善腸道微生態結構及其復雜度。由于小兒自身免疫能力低下，容易受外界環境感染，且胃腸道內環境的修復力弱，一旦病菌侵入，腸道微生態菌群的結構與復雜度隨之發生變化，導致腸道內的優勢菌屬減少，有害菌群增加，從而影響腸道功能。復合乳酸菌膠囊中的乳酸桿菌、乳酸鏈球菌、嗜乳酸桿菌可以吸附在腸道黏膜上，并降低腸道pH 環境，抑制有害菌滋生繁殖，同時乳酸桿菌、乳酸鏈球菌、嗜乳酸桿菌還能夠增加小兒腸道免疫力，維持機體內微生態平衡。總之，利用乳酸菌膠囊治療小兒慢性腹瀉病能夠改善其腸道微生態結構及其復雜度。

此外，本研究中兩組不良反應發生率的結果對比相近，說明復合乳酸菌膠囊治療小兒慢性腹瀉病的安全性好。綜上所述，復合乳酸菌膠囊治療小兒慢性腹瀉病可有效縮短小兒止瀉時間，降低排便頻率，增加療效，改善腸道微生態結構及復雜度，且不會增加不良反應發生率。