百花定喘片中4味藥材的薄層色譜鑒別

劉學良 汪永明 石春蘭 韓達斌 陳鵬 俞雅瓊 陳麗 劉海青

摘要：目的建立百花定喘片的薄層色譜鑒別方法。方法采用薄層色譜法，對百花定喘片中的麻黃、五味子、牡丹皮、黃芩進行定性鑒別。結果在薄層色譜中，4味藥材均能得到很好的鑒別。結論該法專屬性強，重復性好，且操作簡單，可用于百花定喘片的質量控制。

關鍵詞： 百花定喘片;薄層色譜;鑒別

【中圖分類號】R97 ?【文獻標識碼】A ?【文章編號】1673-9026（2021）14--01

百花定喘方為中醫驗方，收載于《衛生部藥品標準》中藥成方制劑第一冊[1]。

由麻黃、五味子、牡丹皮等17味藥味組方而成，用于治療新久咳嗽，喘咳痰多，勞嗽咳血。該制劑質量標準中僅有性狀和片劑的常規檢查項，無任何鑒別和含量測定項。為了提高該制劑的質量控制水平，有效控制該藥品質量，參考文獻[2～6 ] ，對制劑中的4味藥材的薄層鑒別方法進行研究，建立了其薄層鑒別方法，可用于該制劑的質量控制。

1 儀器與試藥

BT224S 型電子天平（ 德國賽多利斯儀器有限公司）;KQ5200B 型超聲機（ 昆山超聲儀器有限公司）;CAMA-GREPROSTAR3型薄層數碼成像系統（ 瑞士）;TDL-5-A 型臺式離心機（上海安亭科學儀器廠）。丹皮酚對照品（ 批號：110708-201407），鹽酸麻黃堿（ 批號：171241-201007），五味子對照藥材（批號：120922-201610）五味子甲素（ 批號：110764-20100），五味子乙素（ 批號：110765-201311），黃芩苷對照品（ 批號：110715-201318），，均購于中國食品藥品檢定研究院;百花定喘片（天津中新藥業集團股份有限公司隆順榕制藥廠，批號：CD36031、CE36033、DD36035;廣東萬方制藥有限公司，批號：141201、150201、150202）;薄層層析硅膠G 板（ 青島海洋化工廠分廠）;水為超純水;其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1麻黃

取本品20片，研細，加濃氨試液1ml，加氯仿25ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液。取鹽酸麻黃堿對照品， 加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。另取缺麻黃的陰性樣品，同法制成缺麻黃的陰性對照溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2020年版四部通則 0502）試驗，吸取上述溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-濃氨試液（40：10：1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾。結果見圖1。

1、鹽酸麻黃堿對照品 ? 2、3、4、6、7、8百花定喘片樣品（批號CD36031、CE36033、DD36035、141201、150201、150202） ?5、麻黃陰性對照

2.2五味子

取本品20片，研細，加氯仿25ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液。取五味子對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液。取五味子甲素、五味子乙素對照品， 加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。另取缺五味子的陰性樣品，同法制成缺五味子的陰性對照溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2020年版四部通則 0502）試驗，吸取上述溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（30℃～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（254nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾。結果見圖2。

1-6、百花定喘片樣品（批號CD36031、CE36033、DD36035、141201、150201、150202）7、五味子陰性對照 ?8、五味子對照藥材 ?8、五味子甲素對照品 ?9、五味子乙素對照品

2.3 ?牡丹皮

取本品20片，研細，加乙醇25ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加30ml乙醚使溶解，濾過，濾液蒸干，殘渣加丙酮1ml使溶解，作為供試品溶液。取丹皮酚對照品，加丙酮制成每1ml含5mg的溶液，作為對照品溶液。另取缺牡丹皮的陰性樣品，同法制成缺牡丹皮的陰性對照溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2020年版四部通則 0502）試驗，吸取上述溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以鹽酸酸性5%的三氯化鐵乙醇溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾。結果見圖3。

1、牡丹皮陰性對照 ? 2、丹皮酚對照品3-8、百花定喘片樣品（批號CD36031、CE36033、DD36035、141201、150201、150202）

2.4 黃芩

取本品20片，研細，加甲醇25ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加水10ml攪拌使溶解，加稀鹽酸調pH值至2，離心，收集沉淀，加水5ml水充分混勻，離心，收集沉淀，水浴揮干殘留液體，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液。取黃芩苷對照品， 加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。另取缺黃芩的陰性樣品，同法制成缺黃芩的陰性對照溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2020年版四部通則 0502）試驗，吸取上述溶液各5μl（百花定喘丸供試品溶液8μl），分別點于1%氫氧化鈉制備的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲酸-水（8：1：1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鐵乙醇試液，105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾。結果見圖4。

1-6、百花定喘片樣品（批號CD36031、CE36033、DD36035、141201、150201、150202）7、8、黃芩苷對照品 ? 9、黃芩陰性對照

3 ?結果與討論

按上述建立方法分別對2家生產企業的6批次樣品進行牡丹皮、麻黃、五味子、黃芩4味藥材的TLC分析測定，6批次百花定喘片均檢出相應斑點。綜合比較，發現同一廠家不同批號的樣品差異不大，不同企業之間的樣品存在斑點大小及顏色深淺不一或微弱檢出的問題，說明企業對原料藥材質量把控不嚴。

經過多次試驗，發現牡丹皮、黃芩鑒別項中提取相應的對照藥材溶液點樣后，色譜圖中只有一個主斑點，為其特征成分丹皮酚、黃芩苷，而麻黃、五味子鑒別項中提取相應的對照藥材溶液點樣后，對照藥材中的部分斑點與樣品不能全部對應，所以百花定喘片中4味藥材的薄層色譜鑒別僅以其相應的特征成分為對照進行鑒別，方法簡單，陰性對照無干擾，紫外光下斑點清晰，結果較好。曾對制劑中的其他藥味采用不同的提取方法和展開劑、顯色劑進行薄層色譜鑒別，其陰性對照干擾較大，試驗未獲成功。

建立的百花定喘片處方中麻黃等4味藥材的薄層鑒別方法簡單，重復性好，專屬性強，斑點清晰，能提高質量標準對藥材的可控度，保證生產企業對藥材投料，增強了現行標準藥品有效性的控制，可用于百花定喘片的質量控制。

參考文獻：

[1] 衛生部藥品標準中藥成方制劑：第十三冊[S].1995

[2] 陳阿麗，楊永霞，梁生旺，等.百花定喘片中藥材的鑒別及其黃芩苷、橙皮苷的測定[J]. 華西藥學雜志，2014， 29（3） ∶318-320.

[3] 侯小濤， 李耀華， 盧小芳.復方百部止咳沖劑中黃芩和陳皮的鑒別及黃芩苷的含量測定[J]. 華西藥學雜志，2005， 20（2）：165-167

[4] 姚琳，孫妍，譚思思，等.瓜桔止嗽丸薄層鑒別及桔梗皂苷D 的含量測定

[5] 雷成康，郭玲. 麻黃止嗽膠囊質量標準的建立[J].中國藥師，2016，19（4）：681-684.

[6] 許廣華，王虎，李小偉，等.芪精愈消膠囊薄層鑒別及含量測定研究[J].安徽醫藥，2016，20（4）：660-663.

基金項目：青海省基礎研究項目（編號2020-ZJ747）

作者簡介：劉學良（1980—），男，副主任藥師，主要從事藥品審評工作。