徐國良 涂招秀 袁菊如
(江西省科學院應用化學研究所,江西 南昌 330096)
葛根[1]主要有效活性成分有異黃酮、葛根素、葛根苷、生物堿等物質,富含鐵、鈣、硒、鍺、猛等人體必需的微量元素。葛根及其制品有清火、排毒、降血壓、降膽固醇、降血糖、減肥、通便、預防老年性癡呆,防止動脈硬化,防止腦血栓等心腦血管疾病之良效。我國衛生部2002年正式公布葛根為“藥食同源”植物,可用于功能性保健食品及新藥的研發??蓮V泛利用于食品醫藥工業、日用化工等領域,是一種極具潛力和高經濟價值的藥食兩用植物。因此,如何將葛根高效綜合利用且產生高附加值的深加工產品,是種植戶和企業迫切需要解決的問題。檢測葛根酒測定其中葛根素,粗多糖,總黃酮,總酸,總脂,酒精度,氰化物,甲醇,丙酸乙脂,可為葛根酒質量品質控制提供精確的含量檢測方法,并為葛根釀酒的發酵過程控制及根釀酒生產品質控制提供參考依據。
氣相色譜法本是作為一種分離手段,但自從氣相色譜配備各種檢測器(如FID、TCD、FPD等)以后,能使分離分析一次完成,具有分離效果好、靈敏度高、選擇性強、分析速度快、用途廣泛等優點,使氣相色譜成為一種極重要的現代分析工具。目前通常采用填充色譜分析和毛細管色譜分析,進行填充色譜分析時可采用鄰苯二甲酸二壬酯(DNP)和吐溫-60(Tween-60)20B7的混合柱(簡稱DNP混合柱)和PEG 20M(聚乙二醇,平均相對分子質量20000)柱兩種。進行毛細管色譜分析時通常采用FFAP柱(FFAP是PEG 20M與2-硝基對苯二酸的反應產物)。毛細管柱直接進樣分析白酒香味成分時,一次進樣可對包括有機酸的高級脂肪酸乙酯在內的多個組分進行定量測定。
色譜是分離混合物的有效方法,但難以得到結構信息,主要靠與標樣對比來達到未知物結構的推定,質譜法提供了豐富的結構信息,樣品用量又是幾種譜學方法中最少的,因此色譜)質譜的結合,成為分離和鑒定未知混合物的理想手段。薄層色譜定性鑒別法和色譜——質譜
用精度為萬分之一的電子天平精密稱定葛根素對照品44mg,將該對照品溶解后用35%甲醇溶液定容于10mL容量瓶中,制得4.4mg/mL的葛根素對照品溶液,以此液為母液,分別精密移取,制備梯度濃度對照品,則葛根素對照品濃度分別為880μg/mL、440μg/mL、220μg/mL、110μg/mL、55μg/mL。以濃度(X)對峰面積(Y)作圖繪制標準曲線。
2.4.1 色譜條件
色譜柱Shimadzu Shim-pack VP-ODSC18色譜柱(5μm,4.6×250mm);甲醇:水=35:65為流動相,檢測波長:250nm;流速:1mL/min;柱溫:30℃;進樣量:10μL。
2.4.2 葛根酒中葛根素樣品測定
吸取自制葛根酒1μL,過微孔濾膜,進樣量為10μL,注入高效液相色譜議。
聯用技術的應用為測定其中葛根素含量的方法。
依照上述色譜條件依次注入液相色譜儀,以峰面積積分值Y為縱坐標,以標品葛根素的濃度值X為橫坐標,繪制標準曲線,得葛根素的線性回歸方程Y=48.864X+611.05,R2=0.9997。
標準曲線圖見圖1,葛根素對照品色譜圖如圖2所示。

圖1 葛根素標準曲線

圖2 葛根素標品(A)和葛根酒樣品(B)色譜圖
根據所得葛根酒樣品峰面積,代入標準方程,所得葛根酒中葛根素含量為160.83μg/mL。

表1 葛根酒主要成分檢測結果
葛根酒主要成分檢測結果符合國家食品衛生標準,為探索出一條葛根特征風味的營養保健型葛根酒奠定了基礎,品質管量建立了葛根酒的質量控制方法,為其產品的質量控制提供依據,其方法:采用薄層色譜定性鑒別方法研究,RP-HPLC法建立測定其中葛根素含量的方法。