高純度番瀉苷A和高純度番瀉苷B的制備研究

譚琪明 李滿香 楊廣安 高煜翔

(1.銅仁職業技術學院，貴州 銅仁 554300；2.貴州農業職業學院，貴州 清鎮 551400)

番瀉屬于豆科類植物，主要是矮小的灌木，大概是一米左右，其主要產于印度、埃及，我國的廣西省、云南省、海南省等地也有引種。番瀉中有效成分有多種，其中，主要有效成分是蒽醌類化合物，此外，還有黃酮、多糖等其他類化合物，所以，番瀉有很多種藥理作用：包括瀉下、還可以進行止血、也可以起到抗菌的作用。但是，從目前情況來看，相關文獻對于番瀉苷的研究還是比較少的。因此，查到相關的資料可以得知，現在市場中高達百分之九十多的番瀉藥材主要都是以進口為主的，進口的國家多數為印度，雖然說進口的藥材比較多，但是和人們的具體使用情況來對比，還是遠遠不夠的。因此，通過對高純度番瀉苷A和番瀉苷B制備的研究，為市場上研究和開發含番瀉苷類有效成分的藥物提供物質選擇，同時彌補番瀉供給量的不足。

1 材料

1.1 儀器與設備

使用到的儀器主要包括超聲波清洗器、恒溫水浴鍋、電子天平、不銹鋼電熱蒸餾水器以及旋轉蒸發器、循環水式多用真空泵、LC-2040C 3D型號的色譜儀，產地是日本；還有TQ-144色譜儀，(天津天光光學儀器)；BCD-205型冰箱(TCL集團股份有限公司)；其他為一般常規儀器。

1.2 藥物的試用

對番瀉苷A和番瀉苷B進行提取，番瀉苷的含量是百分之十二點六和百分之十四；使用到的硅膠薄層板，主要是由青島海洋化工廠所產；主要使用到的試劑是甲醇和乙腈，碳酸氫鈉，乙酸乙醇，礦泉水以及自制的蒸餾水。

2 方法和結果

2.1 色譜的條件

使用到的色譜柱是Supersil-T C18的分析柱；零下零點四的流酸水；檢測的波長是三百四十納米，柱溫設置在二十五攝氏度，需要的樣品量為μL。

2.2 對薄層色譜進行分析

可以選用薄層色譜的相關方法。主要是使用精密稱對番瀉苷A和番瀉苷B進行提取，并且要對適用量進行分析，主要是使用碳酸鈉百分之零點一、甲醇百分之三十進行溶液的配置，可將其用作對照溶液。然而，對于照薄層色譜法進行試驗，可以使用精密儀器對番瀉苷A和B進行提取，選取試劑10μL、選取番瀉苷A和B的對照品溶液10μL，將其都放置于薄層板上，然后再選取四比四比三的正丙醇、乙酸乙酯和水，放入到開缸中，時間可以選取十五分鐘，進而取出再對其進行晾曬，最后需要放置到二百五十四納米的紫外燈下進行檢驗。從本次研究中可以得出，在對番瀉苷A和番瀉苷B對照品色譜相應位置中，提取物薄層色譜的顏色出現了熒光斑點。番瀉苷A的射頻值為零點四三、B則為零點二五。所以說，在這樣的條件下，可以對番瀉苷A和B進行有效的分離。

圖1 薄層層析圖譜

2.3 硅膠柱層析方法分離番瀉苷A和番瀉苷B

經薄層色譜分析確定展開劑后，將含量為百分之十二點六的番瀉苷A和含量為百分之十四點五的番瀉苷B提取物進行分離，可以使用水、乙酸乙酯和正丙醇進行溶解，它們的選取比例為一比一比一，然后按照固液比進行溶解，可以使用超聲波進行，固定相為柱層析硅膠，其體積為七百毫升，選取的徑高比是一比十，選取正丙醇、乙酸乙酯和水的比例為四比四比三，各選取五十毫升，可以分別將洗脫液進行收集，再放置大約時間為一周。再結晶析出后，需要過濾，再使用洗脫機洗結晶，這樣的操作可以反復兩到三次，再對其進行陰干，繼而再測定相應的含量。如果沒有析出結晶，就需要選擇溶劑將其揮發干，然后在對番瀉苷A和番瀉苷B進行濃縮性的蒸干，才可以對其含量進行測定，如果含量小于百分之九十五，就要對其進行二次的分離。選取的洗脫劑也是同之前一樣，從研究的結果可以看出，分離的第一次結果可以參考表一，第二次結果可以參考表二。試驗得出的高效液相色譜圖可以參考圖二。

表1 第1次硅膠柱分離

表2 第2次硅膠柱分離結果

圖2 混合對照品

3 結論

綜上，可以得出，采用硅膠柱層析的方法進行分離，試驗主要是得到了亮黃色針狀物的結晶，番瀉苷含量是九十七點四；另外一次分離，主要是得到了橙黃的粉末狀，番瀉苷B含量為百分之七十一點九。隨后可以再對橙黃色的粉末進行分離，得出的結果為百分之九十五點四，兩者含量均大于95%。高純度番瀉苷A、高純度番瀉苷B的制備研究，為市場上研究和開發含番瀉苷類有效成分的藥物提供物質選擇，同時又可以彌補番瀉供給量的不足。