雌激素受體-α36 與乳腺癌的關系研究進展

后夢玥 黃照權

桂林醫學院基礎醫學院，廣西桂林 541000

雌激素的多種生理功能與雌激素受體（ER）密切相關，ER 作為配體激活型轉錄因子，能夠介導細胞核中雌激素相關基因的轉錄和翻譯[1]，在惡性腫瘤增殖、遷移和凋亡等生物學行為的調控中起到極大的作用[2-5]。乳腺癌作為經典的雌激素依賴性腫瘤，內分泌治療和化學治療是除外科手術外最常用的治療方法[6]。ER 陽性乳腺癌通常預后較好，且對于藥物治療較敏感，但易產生耐藥性和復發[7-8]。ER-α36 是膜型ER 的新亞型，在ER 陰性和陽性乳腺癌細胞中均能被檢測到，可以激活非基因組雌激素信號通路調節乳腺癌細胞的發生和發展[9]，在機體對內分泌治療耐藥性的產生當中也發揮了重要作用[10]。ER-α36 已經成為可以判斷乳腺癌發生發展、治療效果及預后的靶標。本文將重點介紹近年來ER-α36 在乳腺癌方面的研究進展，并對其進行綜述。

1 ER-α36 的發現

Wang 及其團隊[11]于2005 年在正常的人子宮內膜cDNA 文庫中發現了一條全長大約為5.4 kb 的cDNA 基因，該基因能夠編碼310 個氨基酸開放閱讀框架和一個分子量約為35.7 kD 的蛋白質，其cDNA 序列的開放閱讀框能夠完全匹配ER-α66 基因序列中外顯子2 到外顯子6 的區域，該因子即ER-α36。在此基礎上，為了檢測該段克隆的cDNA 是否在蛋白水平有表達，Wang等[11]構造了ER-α36、ER-α46 和ER-α66 高表達的細胞株，通過Western blot 實驗證明分子量為36 kD 的蛋白可以被ER-α66 的單克隆抗體識別，證明ER-α36 與ER-α66 有同源性，由此ER-α66的剪切變異體ER-α36 被發現并鑒定出來。

2 ER-α36 在乳腺癌細胞中的表達

乳腺癌是女性中發病率最高的癌癥[12]，其死亡率和發生率一直居高不下[13-14]。與乳腺癌相關的主要激素受體有ER、孕激素受體（PR）及人表皮生長因子受體2（HER2）[6]。為明確ER-α36 在乳腺癌細胞當中的定位，Li 等[15]使用免疫組織化學法檢測ER-α36 在乳腺癌組織中的表達情況，發現ER-α36 主要定位在細胞膜。晉佳路等[16]探究ER-α36 與乳腺癌主要激素受體在mRNA 水平表達的相關性，發現ER-α36 與HER2的表達呈正相關，除此之外，ER-α36 的表達率在三陰性乳腺癌細胞中明顯高于其他分子分型的乳腺癌，提示ER-α36 在三陰性乳腺癌發生發展中可能存在著獨立且重要的作用。當前，三陰性乳腺癌較高的復發率和較差的預后給臨床治療帶來了不少的難題[17]。進一步的研究又證實了ER-α36 在三陰性乳腺癌組織轉移灶中的表達明顯高于原發灶[18]，且與患者的不良預后相關[19]。不僅如此，在最近的一項對PR 陽性乳腺癌患者的研究中發現，ER-α36 高表達的患者無病生存期明顯縮短，提示ER-α36 可能成為診斷PR 陽性乳腺癌的新靶標[20]，但ER-α36 與PR 的關聯性仍缺乏后續研究。

3 ER-α36 介導的信號通路與耐藥性

越來越多的證據顯示乳腺癌患者耐藥性的產生與ER-α36 有關[21]。與ER-α36 相關的主要信號途徑包含磷脂酰肌醇3 激酶/蛋白激酶B、絲裂原激活蛋白酶/細胞外調節蛋白激酶（ERK）等[22]。本文主要總結對應用較為廣泛的兩種藥物的耐藥性。

3.1 他莫昔芬的耐藥性

他莫昔芬（TAM）是選擇性雌激素受體調節劑，在臨床上常用于ER 陽性乳腺癌的內分泌治療，但長期治療的患者都會產生不同程度的耐藥性[23]。Li 等[24]通過研究發現，ER-α36 在TAM 耐藥的乳腺癌細胞中表達升高，敲除ER-α36 的片段后發現表皮生長因子受體（EGFR）信號通路下游因子ERK1/2 磷酸化水平降低，說明ER-α36可能通過EGFR/ERK 信號通路增強乳腺癌細胞的TAM 耐藥性。此外，ER-α 的共激活因子人蛋白質精氨酸甲基轉移酶2（PRMT2）在以往研究中被證明具有影響乳腺癌細胞生物學行為的作用[25]。最近的實驗發現在TAM 耐藥的乳腺癌細胞中，PRMT2 降低、ER-α36 升高、Akt1/2 和ERK1/2 磷酸化水平均升高，證實PRMT2 可能通過抑制ER-α36 及其介導的非基因組雌激素信號通路來逆轉乳腺癌細胞中的TAM 耐藥性[26]。

3.2 順鉑的耐藥性

順鉑是目前惡性腫瘤治療中最常見的化療藥物，其耐藥性的產生及細胞毒性是當前影響乳腺癌治療效果的一大阻礙[27-28]。最近有研究表明[29]，ER-α36 可能與乳腺癌順鉑耐藥性相關并驗證了其潛在機制，通過體內和體外實驗結合的方式證明了乳腺癌順鉑耐藥株中ER-α36 的表達明顯升高，而降低ER-α36 基因的表達可以一定程度上恢復順鉑化療的敏感度，該研究也進一步表明，順鉑的耐藥性可能與EGFR/HER2/ERK 信號通路的激活有關。

4 ER-α36 與乳腺癌的中醫藥治療

一直以來，乳腺癌的非手術治療都是以藥物和放射治療為主[6]，隨著中國傳統醫學的發展，中醫藥治療癌癥逐漸引起臨床研究者的重視[30]。鹿角帽是民間多用來治療乳腺增生和乳房腫塊的一味中藥。最近的一項研究發現，鹿角帽逐步提取物（SAB）可以將細胞周期阻滯在S 期，并通過降低細胞周期蛋白Cyclin D1 和Cyclin A2 的表達抑制乳腺癌細胞的增殖，不僅如此，ER-α36 的表達在SAB 的作用下也有所降低[31]，初步說明中醫藥治療乳腺癌的可能性。

5 ER-α36 對正常乳腺細胞的影響

盡管先前已經有大量文獻記載ER-α36 與乳腺癌的密切關聯，但正常乳腺細胞中ER-α36 的定位、表達和影響卻少有研究。Thiebaut 及其團隊[32]探討了ER-α36 過表達對于正常乳腺上皮細胞的影響，使用KEGG 數據庫進行基因富集分析，發現在正常乳腺上皮細胞中與ER-α36 相關的信號通路與乳腺癌細胞中的主要信號通路一致。再進一步研究乳腺上皮細胞的生物學行為發現：ER-α36 的高表達可能通過減緩細胞分裂來影響細胞增殖，且能顯著增加乳腺上皮細胞抗凋亡能力，但卻會促進細胞遷移，體內實驗發現ER-α36 過表達的成年小鼠乳腺上皮厚度減小、基質厚度和管腔直徑增加[33]。Chamard-Jovenin 等[34]還將ER-α36 高表達的正常乳腺上皮細胞移植到裸鼠體內，發現并沒有腫瘤組織的生長，即ER-α36 可能影響正常乳腺的生長，但其單一過表達不足以誘導腫瘤的形成。

6 總結與展望

目前，盡管許多文獻已經記載了ER-α36 在乳腺癌及其他腫瘤發生發展中起到的關鍵作用，但這些實驗數據尚未為臨床所應用，基于現有的研究，專家學者們或許可以根據ER-α36 的表達來改進現有乳腺癌的分類方法。不僅如此，考慮到ER-α36 與腫瘤及其預后的關聯性，或許可以將其列為腫瘤標志物的篩查項目之一來協助乳腺癌的診斷及生存率的評估，藥物干預調節ER-α36 的表達可能成為逆轉藥物耐藥性、延緩癌癥進展的新方法。深入了解和探索ER-α36在癌癥發展和治療中的作用機制，有利于拓展更多腫瘤預防和治療策略。