復(fù)合益生菌培養(yǎng)物對(duì)肉羊生長(zhǎng)性能、糞便微生物菌群結(jié)構(gòu)及血液生化指標(biāo)的影響

楊 明， 劉 武

（1.青海省互助土族自治縣紅崖子溝鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站，青海互助土族自治縣810500；2.青海省互助土族自治縣畜牧獸醫(yī)站，青海海東 810500）

臨床中常用的益生菌菌種主要包括酵母菌類(lèi)、乳酸菌類(lèi)、腸球菌類(lèi)、芽孢桿菌類(lèi)等，益生菌制劑是多種有益的單體活性微生物在一定條件下經(jīng)過(guò)培養(yǎng)、發(fā)酵、干燥等多種特殊工藝制成的一種活菌制劑（劉政，2017）。益生菌中富含蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、微量元素等多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及消化酶類(lèi)，具有調(diào)整腸道內(nèi)菌群平衡、促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化與吸收、提高動(dòng)物飼料轉(zhuǎn)化率、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育、提高生產(chǎn)性能及免疫機(jī)能等多種作用，且無(wú)污染、無(wú)耐藥性，被廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖中（陳柯源，2019；郭振，2019；褚素喬，2019）。研究表明，20 世紀(jì)40年代酵母菌培養(yǎng)物作為蛋白質(zhì)補(bǔ)充料，被廣泛應(yīng)用于畜禽健康養(yǎng)殖過(guò)程中（曾光，2016）。目前關(guān)于益生菌制劑在肉雞、豬、牛等動(dòng)物中應(yīng)用的研究較多，在肉羊養(yǎng)殖過(guò)程中應(yīng)用的較少。本試驗(yàn)以復(fù)合益生菌培養(yǎng)物為研究對(duì)象，以不同的水平添加在肉羊基礎(chǔ)日糧中，旨在探討其對(duì)肉羊生長(zhǎng)性能、糞便微生物菌群結(jié)構(gòu)及血液生化指標(biāo)的影響，為復(fù)合益生菌培養(yǎng)物在臨床中的進(jìn)一步應(yīng)用提供研究基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 主要材料 復(fù)合益生菌培養(yǎng)物由乳酸桿菌、乳雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌、糞尿球菌、酵母菌等組成，乳酸桿菌、乳雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌活菌數(shù)均為9.0×109cfu/g，糞尿球菌、酵母菌活菌數(shù)為4.5×109cfu/g，均由本試驗(yàn)制備；MRS培養(yǎng)基、大腸桿菌顯色培養(yǎng)基、LB培養(yǎng)基均購(gòu)自廣東環(huán)凱微生物科技有限公司；總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）、血尿素氮（BUN）檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程公司。

1.2 飼糧配比 參照NRC（2004）推薦的中國(guó)肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制飼糧，飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1，精料制成顆粒飼料（直徑為6 mm，長(zhǎng)度為10 mm）。

表1 飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）%

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與管理 采用單因素設(shè)計(jì)試驗(yàn)，選擇體重為（25±2.0）kg健康肉羊80只，隨機(jī)分成4個(gè)組，每組20個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只，1組為空白對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)2、3、4組分別在基礎(chǔ)日糧中添加2.5%、5.0%、10.0%的復(fù)合益生菌培養(yǎng)物，試驗(yàn)期為60 d。每個(gè)重復(fù)單獨(dú)圈舍飼養(yǎng)，飼喂方式按照常規(guī)的精粗比混合飼喂，自由采食和飲水，定期免疫疫苗、驅(qū)蟲(chóng)及環(huán)境消毒。

1.4 生長(zhǎng)性能指標(biāo)的測(cè)定 在試驗(yàn)期間，對(duì)每個(gè)重復(fù)組試驗(yàn)肉羊提前斷料12 h后稱(chēng)重，記錄每個(gè)重復(fù)組的試驗(yàn)開(kāi)始與結(jié)束的體重及試驗(yàn)期間的耗料量。測(cè)定平均日增重、平均日采食量、飼料轉(zhuǎn)化率。

1.5 糞便微生物菌群結(jié)構(gòu)的測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束前3 d，采集每個(gè)重復(fù)組的新鮮糞便樣品，經(jīng)處理后，分別接種于MRS培養(yǎng)基、大腸桿菌顯色培養(yǎng)基、LB培養(yǎng)基檢測(cè)糞便中乳酸桿菌、雙歧桿菌和大腸桿菌的數(shù)量。參考何佳（2017）報(bào)道的方法記錄每克糞便中所含乳酸桿菌、雙歧桿菌和大腸桿菌總數(shù)，用對(duì)數(shù)（lg cfu/g）表示。

1.6 血清生化指標(biāo)的測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束后每個(gè)試驗(yàn)組隨機(jī)抽取5只肉羊，頸靜脈采血5 mL，離心分離血清。按說(shuō)明書(shū)測(cè)定血液生化指標(biāo)TP、ALB、GPT、GOT、BUN。

1.7 試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析 采用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件SPSS 19.0對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析，以P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)合益生菌培養(yǎng)物對(duì)肉羊生長(zhǎng)性能的影響由表2可知，試驗(yàn)2、3、4組的平均日增重均高于1組，其中試驗(yàn)3、4組平均日增重較1組比分別提高 11.2%、9.5%，差異性顯著（P<0.05），試驗(yàn) 2組與1組相比，差異性不顯著（P>0.05），試驗(yàn)2、3、4 組之間相比，差異性不顯著（P>0.05）；試驗(yàn)2、3、4組的干物質(zhì)采食均高于1組，差異性不顯著（P>0.05）；試驗(yàn) 2、3、4 組料重比均低于 1 組，其中試驗(yàn)3、4組料重比較1組相比分別降低11.2%、10.6%，差異性顯著（P<0.05），試驗(yàn) 2 組與 1 組相比，差異性不顯著（P>0.05），試驗(yàn) 2、3、4組之間相比，差異性不顯著（P>0.05）。

表2 復(fù)合益生菌培養(yǎng)物對(duì)肉羊生長(zhǎng)性能的測(cè)定結(jié)果

2.2 復(fù)合益生菌培養(yǎng)物對(duì)肉羊糞便微生物菌群結(jié)構(gòu)的影響 由表3可知，試驗(yàn)2、3、4組糞便中大腸桿菌的含量均低于1組，其中試驗(yàn)3、4組糞便中大腸桿菌的含量較1組分別降低21.5%、20.1%，差異性顯著（P<0.05）；試驗(yàn)2組與1組相比，差異性不顯著（P>0.05），試驗(yàn) 2、3、4 組之間相比，差異性不顯著（P>0.05）；試驗(yàn) 2、3、4 組糞便中乳酸桿菌和雙歧桿菌的含量均高于1組，其中試驗(yàn)3、4組糞便中乳酸桿菌和雙歧桿菌的含量較1組相比分別提高 20.1%、19.5%、12.6%、13.7%（P<0.05），試驗(yàn) 2組與 1 組相比，差異性不顯著（P>0.05），試驗(yàn)2、3、4組之間相比，差異性不顯著（P>0.05）。

表3 復(fù)合益生菌培養(yǎng)物對(duì)肉羊糞便微生物菌群結(jié)構(gòu)的測(cè)定結(jié)果lg cfu/g

2.3 復(fù)合益生菌培養(yǎng)物對(duì)肉羊血液生化指標(biāo)的影響 由表4可知，試驗(yàn)2、3、4組血清中TP含量均高于1組，其中試驗(yàn)3、4組血清中TP含量較1組比分別提高15.5%、15.6%，差異性顯著（P<0.05），試驗(yàn)2組與1組相比，差異性不顯著（P>0.05），試驗(yàn) 2、3、4 組之間相比，差異性不顯著（P>0.05）；試驗(yàn)2、3、4組血清中的ALB含量均高于1組，但差異性不顯著（P>0.05）；試驗(yàn) 2、3、4 組血清中GOT、BUN含量均低于1組，差異性不顯著（P>0.05）；試驗(yàn)2、3、4組血清中GPT含量均低于1組，其中試驗(yàn)3、4組的血清中GPT含量較1組相比分別降低 11.9%、10.4%，差異性顯著（P<0.05），試驗(yàn) 2 組與 1 組相比，差異性不顯著（P>0.05）；試驗(yàn) 2、3、4組之間相比，差異性不顯著（P>0.05）。

表4 復(fù)合益生菌培養(yǎng)物對(duì)肉羊血液生化指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 復(fù)合益生菌培養(yǎng)物對(duì)肉羊生長(zhǎng)性能的影響王杰等（2016）研究表明，在基礎(chǔ)日糧中添加一定量的復(fù)合益生菌制劑可以提高仔豬生長(zhǎng)性能。申紅春（2019）報(bào)道，復(fù)合微生物制劑可以提高肉牛的生長(zhǎng)性能。本試驗(yàn)研究表明，試驗(yàn)3、4組平均日增重較1組比分別提高 11.2%、9.5%（P<0.05），試驗(yàn)2、3、4組的干物質(zhì)采食量均高于1組 （P>0.05），試驗(yàn)3、4組料重比較1組相比分別降低11.2%、10.6%（P<0.05）。表明不同水平的復(fù)合益生菌培養(yǎng)物添加可以提高杜寒雜交肉羊的生長(zhǎng)性能。可能由于復(fù)合益生菌培養(yǎng)物可以提高瘤胃的微生物活性，促進(jìn)對(duì)飼料中粗纖維的消化，同時(shí)能促進(jìn)肉羊消化道內(nèi)許多消化酶的分泌，提高飼料利用率，從而提高生產(chǎn)性能。

3.2 復(fù)合益生菌培養(yǎng)物對(duì)肉羊糞便微生物菌群結(jié)構(gòu)的影響 相關(guān)研究表明，動(dòng)物腸道菌群結(jié)構(gòu)的平衡對(duì)動(dòng)物健康具有重要意義（郭小華，2017）。大腸桿菌是存在于動(dòng)物腸道中的正常菌群，當(dāng)外界條件改變時(shí)，該菌可以轉(zhuǎn)化為致病菌引起動(dòng)物相關(guān)的疾病，嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡（李雪莉，2018）。本試驗(yàn)研究表明，試驗(yàn)3、4組糞便中乳酸桿菌和雙歧桿菌的含量較1組相比分別提高20.1%、19.5%、12.6%、13.7%（P<0.05），試驗(yàn) 3、4 組糞便中大腸桿菌的含量分別降低21.5%、20.1%（P<0.05）。說(shuō)明不同水平的復(fù)合益生菌培養(yǎng)物添加可以降低其大腸桿菌的含量，提高糞便中雙歧桿菌和乳酸桿菌等益生菌的含量，維持腸道菌群平衡。復(fù)合益生菌培養(yǎng)物添加可以有效提高腸道內(nèi)有益菌的生長(zhǎng)繁殖，抑制有害菌的生長(zhǎng)，從而達(dá)到腸道菌群平衡的作用。何佳（2016）等研究表明，復(fù)合益生菌制劑可以改善仔豬腸道菌群平衡。

3.3 復(fù)合益生菌培養(yǎng)物對(duì)肉羊血液生化指標(biāo)的影響 相關(guān)研究表明，血清中的TP和ALB含量變化可以反映蛋白質(zhì)代謝水平和動(dòng)物肝臟蛋白質(zhì)合成能力，GPT和GOT是評(píng)價(jià)肝功能重要指標(biāo)之一，血清中BUN是評(píng)價(jià)腎功能重要的指標(biāo)之一（張召興，2017）。因此，血液生化指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化可以反映機(jī)體物質(zhì)代謝情況及健康狀態(tài)。本試驗(yàn)研究表明，試驗(yàn)3、4組血清中TP含量較1組比分別提高 15.5%、15.6%（P<0.05），試驗(yàn) 2、3、4 組血清中的ALB含量均高于1組（P>0.05）；試驗(yàn)2、3、4組血清中 GOT、BUN 含量均低于 1組（P>0.05），試驗(yàn)3、4組的血清中GPT含量較1組相比分別降低11.9%、10.4%（P<0.05）。說(shuō)明不同復(fù)合益生菌培養(yǎng)物的添加可以提高血清中TP、ALB含量，降低血清中GPT、GOT及BUN的含量。復(fù)合益生菌培養(yǎng)物所含的活性物質(zhì)可以提高肝、腎代謝水平，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在體內(nèi)的代謝。其作用機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，不同水平復(fù)合益生菌培養(yǎng)物的添可以提高肉羊的生產(chǎn)性能，改善腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)，提高肝腎代謝水平，以5.0%添加為適宜。