Peguero-Lo Presti 指數聯合微小RNA-1對高血壓合并左心室肥厚的診斷價值

宋潔，尹德錄，李群星，伏開全，虞宗穎

1徐州醫科大學附屬連云港醫院，江蘇連云港222002；2連云港市贛榆區人民醫院；3鎮江市第四人民醫院

左心室肥厚(LVH)是一種心肌細胞的生理和病理性反應，是眾多心血管事件的高危因素[1]。心電圖(ECG)已成為當今臨床篩選和診斷LVH的首選輔助檢查措施[2]。Peguero-Lo Presti 指數是一種新型LVH的ECG診斷標準,具有較高的靈敏度，但特異度低[3]。因此，臨床因ECG檢查高度懷疑為LVH的患者，應建議其進一步檢查進行確診。微小RNA-1(miRNA-1)是心肌的特異性miRNA，對高血壓患者LVH有較高的特異性診斷價值[4]。2016年4月—2019年4月,我們選擇150例3級高血壓患者，以超聲心動圖(UCG)作為LVH的診斷金標準，探討Peguero-Lo Presti指數聯合miRNA-1對高血壓合并LVH的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2016年4月—2019年4月江蘇大學附屬第四人民醫院心內科住院治療的3級高血壓患者150例，其中男74例、女76例，年齡(61.30±11.55)歲，高血壓病程(11.74±5.66)年。納入標準：①年齡≥18周歲；②臨床診斷為3級高血壓，高血壓診斷標準參照2010年中國高血壓防治指南[5]，即未服用相關降壓藥下，多日多次測得靜息狀態下收縮壓≥180 mmHg和(或)舒張壓≥110 mmHg；③LVH超聲診斷標準：左室質量指數(LVMI)男性≥115 g/m2，女性≥95 g/m2；④簽署知情同意書。排除標準：①未成年人、妊娠及哺乳期婦女；②先天性肥厚型心肌病和先天性心臟病；③存在冠心病、急性冠脈綜合征、心包積液、風濕性心臟病和肺源性心臟病等心臟疾病者；④存在心房顫動、房室傳導阻滯和起搏器植入患者。本研究已獲得醫院倫理委員會批準。患者均接受UCG檢查。根據UCG檢查結果，分為單純高血壓組(73例)和高血壓合并LVH組(77例)。單純高血壓組男30例、女43例，年齡(60.62±10.99)歲；高血壓病程(11.34±5.58)年。高血壓合并LVH組男44例、女33例，年齡(61.95±12.08)歲；高血壓病程(12.12±5.74)年。兩組性別、年齡和高血壓病程差異均無統計學意義(P均>0.05)。

1.2 ECG檢查及Peguero-Lo Presti指數計算 檢查前患者安靜休息約30 min，采用北京麥迪克斯十二導聯同步心電分析系統(型號MECG-200)對患者進行12導聯同步ECG檢查。檢查時患者取平臥位，平靜呼吸，按照順序連接肢體及胸前導聯，常規設置走紙速度為25 mm/s，并設置電壓為10 mm/mV，描記心電圖；去除導聯。測量所有導聯最深的S波振幅(SD)和V4導聯的S波振幅(SV4)值，根據公式SD+SV4計算Peguero-Lo Presti指數，如果最深的S波振幅在V4，則雙倍。LVH的電壓診斷標準為男性≥2.8 mV，女性≥2.3 mV。心電圖的測量及計算均由兩位高年資心電圖醫師獨立完成。

1.3 血漿中miRNA-1表達檢測 采用RT-PCR法檢測患者血漿中miRNA-1表達。采集患者肘靜脈血4～6 mL，應用TRIzol試劑盒提取總RNA，并進行溶解，隨后采用Bio-Rad法檢測所抽取的RNA濃度。采用逆轉錄試劑盒進行RNA逆轉錄反應，將所得的逆轉錄產物cDNA于-20 ℃下保存備用。按照miRNA-1的逆轉錄引物序列5′-GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGA

CATACAC-3′設計miRNA-1的RT-PCR引物；同時根據序列：5′-CGCTTCACGAATTTGCGTGTCAT-3′設計內參U6逆轉錄引物。采用聚合酶鏈反應試劑盒進行PCR擴增反應：在冰上依次加入1 μL的cDNA、miRNA和U6引物各1 μL、10 μL的TaqMan GEx MASTER Mix試劑，隨后加入雙蒸水補至20 μL。在95 ℃反應10 min，92 ℃反應15 s，隨后60 ℃反應1 min，共進行60個循環的擴增。將所得的產物在熒光定量PCR儀上進行分析，測量Ct值，以U6為內參，計算miRNA-1的表達量。

2 結果

2.1 Peguero-Lo Presti指數對高血壓合并LVH的診斷價值 74例男性高血壓患者中，UCG陽性44例，其中Peguero-Lo Presti指數陽性34例，靈敏度為77.27%；UCG陰性30例，其中Peguero-Lo Presti指數陰性17例，特異度為56.67%。76例女性高血壓患者中，UCG陽性33例，其中Peguero-Lo Presti指數陽性24例，靈敏度為72.73%；UCG陰性43例，其中Peguero-Lo Presti指數陰性19例，特異度為44.19%。

2.2 兩組血漿miRNA-1表達比較 74例男性患者中，高血壓合并LVH組患者血漿miRNA-1表達量高于單純高血壓組[(1.33±0.28)比(1.01±0.11),P均<0.05]，且血漿miRNA-1表達量診斷LVH的靈敏度為68.18%，特異度為86.67%。76例女性患者中，高血壓合并LVH組患者血漿miRNA-1表達量高于單純高血壓組[(1.26±0.25)比(0.95±0.19),P均<0.05]，且血漿miRNA-1表達量診斷LVH的靈敏度為60.61%，特異度為90.70%。

2.3 Peguero-Lo Presti指數聯合血漿miRNA-1對高血壓合并LVH的診斷價值 Peguero-Lo Presti指數診斷高血壓患者LVH的AUC男性為0.650，95%CI為0.52～0.78，P=0.030；女性AUC為0.674，95%CI為0.55～0.80，P=0.009。血漿miRNA-1表達量診斷LVH的AUC男性為0.867，95%CI為0.79～0.95，P<0.01；女性為0.849，95%CI為0.76～0.94，P<0.01。Peguero-Lo Presti指數聯合血漿miRNA-1診斷高血壓合并LVH的AUC男性為0.880，95%CI為0.81～0.95，P<0.01，靈敏度73.64%，特異度93.33%；女性為0.862，95%CI為0.78～0.94，P<0.01，靈敏度75.76%，特異度97.67%。

3 討論

LVH是高血壓患者常見的靶器官損害之一，是高血壓患者的獨立危險因素[1]。早診斷、早治療能有效延緩心臟重塑，改善患者預后。ECG具有方便、快捷、經濟和易操作等優點，已成為當今臨床篩選和診斷LVH的首選輔助檢查措施[6]。研究顯示，LVH患者的心肌細胞增粗、增長，左心室面積增大，心肌細胞除極時產生的電偶數增多、電動力增大；同時，肥厚的左室與胸壁間的距離縮短。因此，投射在左心室導聯上的QRS振幅增大[7]。

多年來，經過眾多心臟病和心電圖學家的共同努力，目前有關LVH的ECG診斷標準已超過30種。臨床常用的Sokolow-Lyon指數和Cornell指數，二者的診斷特異度均可達到90%左右，但靈敏度普遍較低，對于輕度LVH的診斷靈敏度為7%～35%，中重度LVH的診斷靈敏度僅為10%～15%[8～10]。Peguero-Lo Presti 指數由美國學者Peguero教授通過一項回顧性研究在2017所提出的新型LVH心電圖診斷標準，其診斷公式為SD+SV4，SD是心電圖所有導聯中最深的S 波振幅。該標準認為，進行12導聯心電圖檢查時，當患者Peguero-Lo Presti 指數≥2.8 mV(男性)或2.3 mv(女性)時，可考慮LVH診斷[11]。我國學者研究發現，Peguero-Lo Presti 指數能提高ECG診斷LVH的靈敏度，但降低了特異度[3,12,13]。國外學者亦發現，Peguero-Lo Presti 指數對LVH的診斷價值優于Sokolow-Lyon指數和Cornell指數[14]。

本研究對150例高血壓患者進行ECG檢查，結果亦提示Peguero-Lo Presti指數診斷高血壓合并LVH的靈敏度高(男性77.27%，女性66.67%)，但特異度低(男性63.33%，女性44.19%)。分析其原因主要是LVH患者的電壓變化主要反映QRS后期的S波；而Peguero-Lo Presti指數采用最深的S 波振幅和胸前4導聯的S波幅之和，能早期識別S波的變化，故其靈敏度較高。但由于患者年齡、性別、肥胖、心臟內血流量及傳導性、心臟的位置等因數的影響，Peguero-Lo Presti指數診斷高血壓合并LVH的特異度較低，易增加誤診率。

近年來，隨著基因技術的發展，miRNA因其多樣性及特異的生理功能，眾多學者推測miRNA可作為診斷LVH新型生物標志物[15]。miRNA-1是一種特異性表達與心肌細胞的微小RNA，是由21～25個核苷酸序列組成的內源性非編碼RNA分子，能通過調控miRNA基因表達，廣泛參與心臟相關病理生理過程[16]。前期研究發現，檢測血漿miRNA-1表達可作為早期診斷急性心肌梗死的生物學標志物。司煜安等研究發現，miRNA-1 表達與高血壓LVH的發生發展密切相關，是特異性診斷高血壓LVH的潛在標志物[4]，miRNA預測高血壓LVH的AUC為0.937(95%CI：0.88～0.96)。本研究發現，高血壓合并LVH患者的血漿miRNA-1高于單純高血壓患者，且miRNA-1診斷高血壓合并LVH的AUC為：男性0.867(95%CI:0.79～0.95)，女性0.849(95%CI:0.76～0.94)；且特異度高，但敏感度偏低。分析其原因，主要考慮血漿中的miRNA-1含量較低，且miRNA-1表達易受蛋白質等雜質影響，穩定性差；導致機體中的miRNA 難以被準確測量。另一方面考慮二者均為小樣本單中心研究，存在一定程度個體差異性。

多數學者認為miRNA-1對診斷LVH有一定價值，可與其他檢查方法及生物標志物聯合檢測，有助于臨床醫師更準確診斷LVH。本研究首次證實，相較于單獨檢測，Peguero-Lo Presti指數聯合miRNA-1能提高高血壓合并LVH診斷的準確性(AUC男性為0.880，女性為0.862)、靈敏度(男性為73.64%，女性為75.76%)和特異度(男性為93.33%，女性為97.67%)。Peguero-Lo Presti指數聯合miRNA-1對高血壓合并LVH診斷有較高價值。