基質效應對蔬菜中氨基甲酸酯類農藥測定的影響

王紅梅 肖傳勇 張倩 曹盟盟 崔立嬌

(德州市農產品質量檢測中心，山東 德州 253012)

農藥殘留一直是影響農產品安全的一個重要因素。隨著農藥殘留檢測標準的不斷完善，對農藥殘留檢測的準確度要求也在不斷提高，對影響檢測結果的基質效應的研究越來越多[1-4]。基質效應是指在樣品前處理不能完全去除雜質的干擾，這些與樣品一同提取出來的組分對目標化合物檢測結果測準確度產生影響[5,6]。氨基甲酸酯類農藥是一種高效殺蟲劑，雖然已經被禁止在蔬菜水果中使用，但從歷年的農藥殘留檢測數據來看，這種農藥的用量及范圍還在不斷擴大[7]。

目前，檢測氨基甲酸酯類農藥的方法較多采用的是液相色譜-串聯質譜法[8,9]，液相色譜法[10]。但由于液相色譜法檢測時，需要柱后衍生，操作所需試劑種類多，操作復雜，所以，這種方法逐漸被液相色譜-質譜法代替。無論采用哪種方法，基質效應都是普遍存在的。由于這幾種農藥是山東省蔬菜質量安全監督抽查中監測項目，所以有必要研究其在蔬菜中的基質效應，以更準確地定量。

本文選用西紅柿、黃瓜、韭菜、芹菜為代表基質，以農業標準方法NY/T761-2008進行樣品前處理，研究LC-MS/MS法檢測蔬菜水果中7種氨基甲酸酯類農藥的基質效應，為農藥殘留準確定量提供依據，有很高的實用價值。

1 材料與方法

1.1 儀器、試劑與材料

LCMS-8050液相色譜-三重四級桿質譜儀(日本Shimadzu公司)；1%天平(北京賽多利斯儀器系統公司)；氮吹儀(organomation N-EVAPTM112)；高速組織勻漿機(IKART25 digital ULTRA TURRAXR德國)；0.22μm有機針式濾膜；燒杯；具塞量筒；氨基柱；甲醇、乙腈、甲酸、乙酸銨均為色譜純(美國Fisher公司)；水(杭州娃哈哈純凈水)；氯化鈉(分析純，國藥集團化學試劑有限公司)。

農藥標準品：涕滅威、涕滅威亞砜、涕滅威砜、克百威、3-羥基克百威、甲萘威、滅多威。標準樣品均購買于農業部環境質量監督檢驗測試中心(天津)。

1.2 試驗方法

1.2.1 色譜條件

色譜柱：Shim-pack GISS C18 2.1×50mm，1.9μm(日本島津公司)。流動相A為水(含0.05%甲酸V/V)，流動相B為乙腈。流速：0.3mL·min-1，柱溫：40℃，進樣量：1.0μL，梯度洗脫程序見表1。

表1 梯度洗脫程序

1.2.2 質譜條件

離子源：電噴霧離子源(ESI)，掃描方式：正離子掃描。離子源溫度：300℃，霧化器流速：3.0L·min-1，干燥氣流速：10.0L·min-1。脫溶劑管溫度：200℃，加熱塊溫度：400℃。加熱氣流速：10.0L·min-1。離子源電壓4.0kV，碰撞氣體壓力為270kPa，采用分段多反應監測(MRM)模式。駐留時間：30mse。7種農藥的采集參數見表2。

表2 7種農藥的質譜參數

1.2.3 樣品前處理

樣品前處理參考農業行業標準NY/T 761-2008[11]，稱取25.0g待測樣品放入150mL燒杯，量取50.0mL乙腈加入燒杯中，在均質機中12000r·min-1均質2min后過濾，將濾液收集在盛有5～7g氯化鈉(含水分較多的蔬菜，氯化鈉可加10g左右)的具塞量筒中，收集濾液50mL，劇烈振搖1min，開蓋排氣，室溫下靜置30min，用移液管量取10.00mL上層乙腈溶液放入50mL燒杯里，將燒杯放置在80℃水浴氮吹裝置，氮吹近干，加入2.0mL甲醇加二氯甲烷(1∶99)待凈化。將凈化液加入活化好的氨基柱，用離心管收集洗脫液，再用4mL甲醇加二氯甲烷(1∶99)分2次洗燒杯后過柱，在50℃水浴氮吹近干，用甲醇定容至5.0mL。0.22μm濾膜過濾后上機檢測。選擇不含有7種農藥的樣品為空白樣品，作為基質配標準溶液。

1.2.4 試驗設計

先將上述7種氨基甲酸酯類農藥的標準品用甲醇稀釋成5μg·mL-1的混合標準溶液，然后每種蔬菜空白樣品取6份，按照樣品前處理方法，每份空白樣品提取液為5mL，氮吹近干后用5μg·mL-1的混合標準溶液稀釋，配制成0.005μg·mL-1、0.01μg·mL-1、0.02μg·mL-1、0.05μg·mL-1、0.1μg·mL-1、0.5μg·mL-1系列基質匹配標準溶液，稱為基質標準溶液。用甲醇水將5μg·mL-1混合標準溶液稀釋成同樣濃度梯度的標準溶液，為溶劑標準溶液。基質效應按照以下公式計算[1]：

當ME>0時，為基質增強效應，ME<0時，為基質抑制效應。-20%

2 結果與分析

2.1 7種農藥的色譜圖

按照上述儀器條件，將黃瓜空白基質7種氨基甲酸酯類農藥上機檢測，由圖1可以看出，該方法在5min內能實現目標化合物的分離。

圖1 黃瓜空白基質中7種氨基甲酸酯類農藥的色譜圖(0.05μg·mL-1)

2.2 黃瓜中氨基甲酸酯類的基質效應

從表3可以看出，乙腈溶劑和黃瓜基質標中，7種氨基甲酸酯類農藥在0.005～0.5μg·mL-1范圍內線性關系良好，相關系數r2在0.9991～0.9999,根據基質效應的計算公式，計算出每種農藥的基質效應，結果見圖2。

表3 7種氨基甲酸酯類農藥在溶劑與黃瓜基質匹配標準溶液中的校準曲線

圖2 7種氨基甲酸酯類農藥在黃瓜中的基質效應

由圖2可以看出，在黃瓜基質中，涕滅威亞砜、涕滅威砜、3-羥基克百威、滅多威表現為基質增強效應，涕滅威、克百威、甲奈威表現為基質抑制效應。基質效應均在-20%

2.3 韭菜中氨基甲酸酯類農藥的基質效應

從表4可以看出，乙腈溶劑和韭菜基質標中，7種氨基甲酸酯類農藥在0.005～0.5μg·mL-1范圍內線性關系良好，相關系數r2在0.9997～0.9999，按照基質效應的計算公式，計算每種農藥的基質效應，結果見圖3。

表4 7種氨基甲酸酯類農藥在溶劑與韭菜基質匹配標準溶液中的校準曲線

由圖3可以看出，在韭菜基質中，涕滅威亞砜、涕滅威砜、滅多威表現為基質增強效應，其它農藥表現為基質抑制效應，無論是基質增強效應還是基質抑制效應，因為-20%

圖3 7種氨基甲酸酯類農藥在韭菜中的基質效應

2.4 芹菜中氨基甲酸酯類農藥的基質效應

從表5可以看出，乙腈溶劑和芹菜基質標中，7種氨基甲酸酯類農藥在0.005～0.5μg·mL-1范圍內線性關系良好，相關系數r2>0.999，根據基質效應的計算公式，分別計算出每種農藥的基質效應，結果見圖4。

表5 7種氨基甲酸酯類農藥在溶劑與芹菜基質匹配標準溶液中的校準曲線

由圖4可以看出，在芹菜基質中，只有涕滅威亞砜表現為基質增強效應，其它農藥表現為基質抑制效應，其中涕滅威基質效應-50%

圖4 7種氨基甲酸酯類農藥在芹菜中的基質效應

2.5 西紅柿中氨基甲酸酯類農藥的基質效應

從表6可以看出，乙腈溶劑和西紅柿基質標中，7種氨基甲酸酯類農藥在0.005～0.5μg·mL-1范圍內線性關系良好r2>0.999，按照基質效應的計算公式，計算每種農藥的基質效應，結果見圖5。

表6 7種氨基甲酸酯類農藥在溶劑與西紅柿基質匹配標準溶液中的校準曲線

由圖5可以看出，在西紅柿基質中，所有農藥均表現為基質抑制效應，其中涕滅威基質效應-50%

圖5 7種氨基甲酸酯類農藥在西紅柿中的基質效應

3 結論

通過對比不同蔬菜基質樣品中7種氨基甲酸酯類農藥的基質效應，發現7種農藥在蔬菜中均存在一定的基質效應，且大部分為基質抑制效應。基質效應與蔬菜品種有關，黃瓜基質中涕滅威亞砜、涕滅威砜、3-羥基克百威、滅多威是基質增強效應；韭菜基質中涕滅威亞砜、涕滅威砜、滅多威表現為基質增強效應；芹菜基質中只有涕滅威亞砜是基質增強效應；7種農藥在西紅柿中均表現為基質抑制效應，其中，涕滅威為中等基質效應。對于存在基質效應的農藥和樣品，采用基質配標準曲線來減弱基質效應，從而保證檢測結果的可靠性。